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农杆菌介导将Bt杀虫蛋白基因导入优良玉米自交系的研究 被引量:43
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作者 张艳贞 王罡 +4 位作者 胡汉桥 魏松红 季静 王军军 李昌 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期35-39,共5页
以杂交育种中广泛使用的优良玉米自交系 34 0、4112为材料 ,用带有质粒pGBIL0 4(Pactin -Bt-Tnos)的根癌农杆菌LBA44 0 4转化其幼胚及其初始愈伤组织 ,共培养 3天后 ,在含PPT的培养基上连续筛选培养 3代 ,然后分化获得再生植株。PCR检... 以杂交育种中广泛使用的优良玉米自交系 34 0、4112为材料 ,用带有质粒pGBIL0 4(Pactin -Bt-Tnos)的根癌农杆菌LBA44 0 4转化其幼胚及其初始愈伤组织 ,共培养 3天后 ,在含PPT的培养基上连续筛选培养 3代 ,然后分化获得再生植株。PCR检测证明目的基因已整合到再生植株的基因组中。实验结果表明幼胚预培养后形成的新鲜的初始愈伤组织是比较适宜的转化受体 ,结果还发现将共培养温度降到 2 2℃可以提高农杆菌介导的玉米遗传转化的筛选频率。 展开更多
关键词 玉米 自交系 基因 农杆菌 预培养 共培养温度 PCR Bt杀虫蛋白基因
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转基因抗虫油菜中Bt杀虫蛋白基因稳定遗传和高效表达及抗虫性研究 被引量:20
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作者 林良斌 官春云 +2 位作者 周小云 何业华 杨志新 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期175-178,共4页
通过对转 Bt杀虫蛋白基因油菜植株的后代进行卡那霉素抗性分析和 PCR技术检测 ,结果表明 :Bt杀虫蛋白基因是以单拷贝、杂合地整合到转基因植株 (T0 1、T0 2、T0 3、T0 5、T0 6、T0 7、T0 8)的基因组中 ,并稳定地遗传。EL ISA检测表明 :... 通过对转 Bt杀虫蛋白基因油菜植株的后代进行卡那霉素抗性分析和 PCR技术检测 ,结果表明 :Bt杀虫蛋白基因是以单拷贝、杂合地整合到转基因植株 (T0 1、T0 2、T0 3、T0 5、T0 6、T0 7、T0 8)的基因组中 ,并稳定地遗传。EL ISA检测表明 :在第 3~第 9叶期 Bt杀虫蛋白基因在转基因油菜植株中高效地表达 ,Bt杀虫蛋白的表达量为 170~ 2 6 0 ng/ 2 5mg鲜叶 ,占植物可溶性蛋白的 0 .0 6 7%~ 0 .10 5 % ,其抗虫效果高达 72 .0 %~ 94 .4 %。但从第 11叶期后 Bt杀虫蛋白表达量显著地降低 ,只有 7~ 5 0 ng/ 2 5 mg鲜叶 ,占植物可溶性蛋白的 0 .0 0 3%~ 0 .0 2 %。 展开更多
关键词 基因油菜 Bt杀虫蛋白基因 遗传转化 卡那霉素 PCR技术
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转Bt杀虫蛋白基因的抗棉铃虫棉花新种质 被引量:34
3
作者 倪万潮 黄骏麒 +12 位作者 郭三堆 束春娥 吴敬音 王武钢 张震林 陈松 毛立群 汪洋 徐英俊 顾立美 周宝良 沈新莲 肖松华 《江苏农业学报》 CSCD 1996年第1期1-6,共6页
采用花粉管通道途径,将合成的 Bt 杀虫蛋白基因导入棉花优良品种泗棉3号和中棉所12号,获得了转基因植株。组织化学分析表明,GUS 标记基因已在 R_1代植株中得到表达。据对 GUS 阳性转基因棉株的 PCR 分析结果,证明 Bt 杀虫蛋白基因出现在... 采用花粉管通道途径,将合成的 Bt 杀虫蛋白基因导入棉花优良品种泗棉3号和中棉所12号,获得了转基因植株。组织化学分析表明,GUS 标记基因已在 R_1代植株中得到表达。据对 GUS 阳性转基因棉株的 PCR 分析结果,证明 Bt 杀虫蛋白基因出现在 R_1代中,并通过自交传递至 R_2代。经鉴定,获得了5株对棉铃虫幼虫有高度毒杀作用的 R_1代单株S545、S591、S636、S1001(泗棉3号+Bt/GUS)及 Zh1109(中棉所12号+Bt/GUS),棉铃虫幼虫致死率分别达到91.6%、93.8%、92.3%、85.7%、75.0%。并由 R_1代自交后形成 R_2代抗虫棉群体,表明获得了抗棉铃虫棉花新种质。 展开更多
关键词 棉花 Bt杀虫蛋白基因 棉铃
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苏云金杆菌Kurstaki HD-1亚种的一个杀虫蛋白基因毒性区的核苷酸序列 被引量:9
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作者 乔利亚 田颖川 莽克强 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第5期383-386,共4页
为了更好地利用苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,以下简称 B.t)这个生物杀虫剂并培育抗虫转基因植物,80年代以来各国科学家们纷纷加强了对 B.t 杀虫蛋白基因的结构和功能方面的研究。到目前为止已有42种以上的 B.t 杀虫蛋白基因... 为了更好地利用苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,以下简称 B.t)这个生物杀虫剂并培育抗虫转基因植物,80年代以来各国科学家们纷纷加强了对 B.t 杀虫蛋白基因的结构和功能方面的研究。到目前为止已有42种以上的 B.t 杀虫蛋白基因(或称为晶体蛋白基因)得到克隆并进行了 DNA 展开更多
关键词 苏云金杆菌 杀虫蛋白基因 毒性区
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以基因枪法将Bt杀虫蛋白基因导入常规玉米自交系的研究 被引量:4
5
作者 张艳贞 季静 +3 位作者 张领兵 张艳华 魏松红 王罡 《玉米科学》 CAS CSCD 2001年第4期23-26,共4页
以生产上大面积使用的优良玉米自交系 792 2为材料 ,以来源于其幼胚的Ⅱ型胚性愈伤为受体 ,经预实验选择标准制弹用量一半的金粉 ,通过基因枪轰击法 ,将Bt杀虫蛋白基因转入其细胞中 ,并再生了大量的转基因植株。抗性植株再生频率为 78 4... 以生产上大面积使用的优良玉米自交系 792 2为材料 ,以来源于其幼胚的Ⅱ型胚性愈伤为受体 ,经预实验选择标准制弹用量一半的金粉 ,通过基因枪轰击法 ,将Bt杀虫蛋白基因转入其细胞中 ,并再生了大量的转基因植株。抗性植株再生频率为 78 40 % ,PCR分子检测证明目的基因已转入玉米中 ,转化频率为 3 0 9%。 展开更多
关键词 玉米自交系 基因枪转化 Bt杀虫蛋白基因 PCR 转化频率 玉米
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利用激光微束穿刺法将杀虫蛋白基因导入油菜的研究 被引量:6
6
作者 侯丙凯 宋桂英 +3 位作者 王兰岚 周奕华 刘桂诊 陈正华 《激光生物学报》 CAS CSCD 1999年第4期270-274,共5页
利用激光微束照射油菜子叶柄,将来自苏云金杆菌的杀虫蛋白(Insecticidalcrystalprotein,ICP)基因导入油菜细胞中,经植株再生和卡那霉素筛选,获得了转基因植株。对转基因植株进行了PCR检测和饲虫... 利用激光微束照射油菜子叶柄,将来自苏云金杆菌的杀虫蛋白(Insecticidalcrystalprotein,ICP)基因导入油菜细胞中,经植株再生和卡那霉素筛选,获得了转基因植株。对转基因植株进行了PCR检测和饲虫实验,发现转基因植株为PCR扩增阳性,某些植株表现出了较强的抗虫性。实验结果表明外源抗虫基因已被整合到油菜基因组并得到了表达。 展开更多
关键词 激光微束 油菜 杀虫蛋白基因 基因植株
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农杆菌介导法将Bt杀虫蛋白基因导入玉米自交系的研究 被引量:3
7
作者 姚丹 王丕武 +3 位作者 刘占柱 郝文媛 林春晶 关淑艳 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期27-31,共5页
利用β 葡萄糖苷酸酶(gus)基因的瞬时表达和稳定表达对农杆菌转化玉米愈伤组织的条件进行优化,通过用带有Bt抗虫基因和bar抗除草剂基因的根癌农杆菌LBA4404(ACT)转化玉米自交系7922、H99和P2的胚性愈伤组织,获得了抗性愈伤组织,并分化... 利用β 葡萄糖苷酸酶(gus)基因的瞬时表达和稳定表达对农杆菌转化玉米愈伤组织的条件进行优化,通过用带有Bt抗虫基因和bar抗除草剂基因的根癌农杆菌LBA4404(ACT)转化玉米自交系7922、H99和P2的胚性愈伤组织,获得了抗性愈伤组织,并分化出植株。PCR检测初步证明Bt杀虫蛋白基因已整合到玉米再生植株中。 展开更多
关键词 农杆菌介导法 Bt杀虫蛋白基因 玉米 自交系 β-葡萄糖苷酸酶 遗传转化 愈伤组织
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Bt杀虫蛋白基因导入新疆棉花获得抗虫转基因植株 被引量:5
8
作者 孙严 倪万潮 郭三堆 《西北农业学报》 CAS CSCD 1998年第4期1-3,共3页
通过花粉管通道法将人工全序合成的Bt杀虫蛋白基因导入新陆早4号和C6524两品种中,收获注射过Bt杀虫蛋白基因的棉花种子2万余粒。经棉铃虫饲喂的抗虫性生物检测,得到高抗虫的18株新陆早4号转化苗和36株C6524转化... 通过花粉管通道法将人工全序合成的Bt杀虫蛋白基因导入新陆早4号和C6524两品种中,收获注射过Bt杀虫蛋白基因的棉花种子2万余粒。经棉铃虫饲喂的抗虫性生物检测,得到高抗虫的18株新陆早4号转化苗和36株C6524转化苗;以Bt基因的一对引物进行PCR分析,54株抗棉铃虫的转化棉苗均扩增出部分Bt杀虫蛋白基因的目标带。未转化的对照棉苗则无此条带,证实Bt杀虫蛋白基因已整合到转化抗虫棉株的染色体上,首次获得了新疆转目的基因的高效抗虫棉。 展开更多
关键词 棉花 Bt杀虫蛋白基因 棉铃 花粉管通道法
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转Bt杀虫蛋白基因植物及其抗虫性研究进展 被引量:6
9
作者 王世贵 《杭州师范学院学报》 2000年第3期90-95,共6页
利用遗传工程技术将苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis Berliner简称Bt)杀虫蛋白基因导入植物是近年来的研究热点,本文就Bt基因的转化及其在植物中的表达与抗虫效果、转Bt基因植物的产量及品质... 利用遗传工程技术将苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis Berliner简称Bt)杀虫蛋白基因导入植物是近年来的研究热点,本文就Bt基因的转化及其在植物中的表达与抗虫效果、转Bt基因植物的产量及品质以及存在的风险与安全性等方面的研究进展作一综述. 展开更多
关键词 苏云金杆菌 植物 转Bt杀虫蛋白基因植物
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类产碱假单胞菌核心杀虫蛋白基因的转化及杀虫活性
10
作者 黄敏 李达旭 +5 位作者 向文良 郭建华 赵健 张杰 杨志荣 孙群 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1198-1202,共5页
【目的】利用类产碱假单胞菌核心杀虫蛋白基因(Core Pseudomonas pseudoalcaligenes insec-ticidal protein gene,cppip)构建植物表达载体并转化烟草,以研究cppip在高等植物体内表达产物的活性。【方法】cppip在烟草基因组中的整合及转... 【目的】利用类产碱假单胞菌核心杀虫蛋白基因(Core Pseudomonas pseudoalcaligenes insec-ticidal protein gene,cppip)构建植物表达载体并转化烟草,以研究cppip在高等植物体内表达产物的活性。【方法】cppip在烟草基因组中的整合及转录通过烟草转化系T0代种子发芽的抗生素抗性分离及其T1代株系的分子检测来证明;烟草转化系后代表达产物的杀虫效果通过测定蝗虫死亡率来分析。【结果】证明了cppip能以一定拷贝数插入到烟草基因组内,并按照孟德尔遗传方式传递给后代;比较含信号肽(signal peptide sequence,SPS)和不含信号肽的类产碱假单胞菌杀虫蛋白基因(Pseudomonas pseudoalcaligenes insecticidal protein gene,ppip)表达产物的杀虫活性,发现不含SPS的ppip烟草转化系蛋白表达产物对2~3龄蝗虫幼虫的平均致死率为83.37%,并对幼虫的生长发育有明显抑制作用,而含有SPS的ppip烟草转化系蛋白表达产物对2~3龄蝗虫幼虫的平均致死率为15.65%,两者之间有着显著的差异。【结论】推测ppip的SPS会影响该基因在高等植物体内表达产物的活性,本研究结果对于高效利用ppip进行植物转化及抗虫具有重要参考价值。 展开更多
关键词 类产碱假单胞菌核心杀虫蛋白基因 烟草转化 活性 信号肽 生物测定
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治理昆虫对转苏云金芽胞杆菌杀虫蛋白基因植物的抗性 被引量:1
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作者 李建洪 邓望喜 喻子牛 《湖北植保》 1997年第6期21-22,共2页
治理昆虫对转苏云金芽胞杆菌杀虫蛋白基因植物的抗性华中农业大学植保系(430070)李建洪邓望喜华中农业大学生命科学院(430070)喻子牛迄今为止,通过遗传工程的方法,已获得了40多种表达苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白(... 治理昆虫对转苏云金芽胞杆菌杀虫蛋白基因植物的抗性华中农业大学植保系(430070)李建洪邓望喜华中农业大学生命科学院(430070)喻子牛迄今为止,通过遗传工程的方法,已获得了40多种表达苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白(ICPS)毒素的植物。美国EPA于... 展开更多
关键词 基因植物 苏云金芽胞杆菌 杀虫蛋白基因
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双价杀虫蛋白基因在荧光假单胞菌中的表达及增效 被引量:11
12
作者 丁之铨 张杰 +2 位作者 宋福平 黄大昉 李季伦 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期573-578,共6页
利用广宿主质粒载体 pJMS6α lac将苏云金芽胞杆菌 (Bacillusthuringiensis)杀虫晶体蛋白基因cry1Ac和cry2Aa基因分别及一起进行克隆 ,将重组质粒导入能在多种作物上定殖、对植物病菌有良好抑菌和防治作用的荧光假单胞菌 (Pseudomonasfl... 利用广宿主质粒载体 pJMS6α lac将苏云金芽胞杆菌 (Bacillusthuringiensis)杀虫晶体蛋白基因cry1Ac和cry2Aa基因分别及一起进行克隆 ,将重组质粒导入能在多种作物上定殖、对植物病菌有良好抑菌和防治作用的荧光假单胞菌 (Pseudomonasfluorescens)P30 3菌株 ,分别得到工程菌株IPP1 0 1、IPP2 0 1和IPP2 0 2。PCR RFLP和Southernblot检测均证明目的基因已经导入了工程菌。SDS PAGE电泳显示工程菌中存在明显的Cry1Ac蛋白带 ;透射电镜观察发现含cry1Ac基因的两个菌株IPP1 0 1和IPP2 0 2中杀虫蛋白形成了典型的菱形晶体和蛋白包含体 ,而在野生P30 3菌株中均无这些结构。这些结果说明 ,工程菌中cry1Ac基因得到了很好表达。室内杀虫试验表明 :工程菌对棉铃虫初孵幼虫的致死中浓度 (LC50 ) ,只含cry1Ac的IPP1 0 1为 0 0 0 81 2mL/g饲料 ,只含cry2Aa的IPP2 0 1为 0 0 2 60 4mL/g饲料 ,含双基因的IPP2 0 2为 0 0 0 1 86mL/g饲料 ;HD73为 0 0 0 1 70mL/g饲料。cry1Ac和cry2Aa双基因表达产物具有显著增效作用 ,共毒系数达 332 8。 展开更多
关键词 荧光假单胞菌 晶体蛋白基因 表达
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苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白基因克隆及油菜叶绿体遗传转化研究 被引量:30
13
作者 侯丙凯 陈正华 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期39-40,共2页
关键词 苏云金芽孢杆菌 油菜 晶体蛋白基因 叶绿体转化
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食用菌异迟眼蕈蚊苏云金芽孢杆菌筛选及杀虫蛋白基因鉴定 被引量:3
14
作者 王帆帆 曲绍轩 +6 位作者 林金盛 李辉平 侯立娟 蒋宁 骆昕 马林 韩巨才 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期189-195,共7页
苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis, Bt)杀虫谱广,活性高,可以很好地应用于双翅目眼蕈蚊科的防治。为了筛选出对食用菌异迟眼蕈蚊(Bradysia difformis)有高毒力的苏云金芽孢杆菌菌株,并进行杀虫蛋白基因鉴定,采用醋酸钠-抗生素法,... 苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis, Bt)杀虫谱广,活性高,可以很好地应用于双翅目眼蕈蚊科的防治。为了筛选出对食用菌异迟眼蕈蚊(Bradysia difformis)有高毒力的苏云金芽孢杆菌菌株,并进行杀虫蛋白基因鉴定,采用醋酸钠-抗生素法,从江苏省南京市紫金山土壤中分离产晶体芽孢杆菌,通过室内毒力测定和对食用菌菌丝影响试验逐步进行筛选,同时进行Bt杀虫蛋白基因型聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restricted fragment length polymorphism, PCR-RFLP)扩增鉴定。结果从分离到的17株产晶体芽孢杆菌中筛选出7个对异迟眼蕈蚊杀虫活性的校正死亡率在50%以上且不影响食用菌菌丝生长的菌株。经16S rDNA基因序列同源性分析,这7株菌与公共数据库中苏云金芽孢杆菌菌株的同源性可达99%以上,初步认定为苏云金芽孢杆菌(B. thuringiensis)。Bt杀虫蛋白基因型鉴定发现,这7个菌株含有cry4/10、cry11、cyt1、cyt2等4个不同的毒蛋白基因型。筛选出的这7株Bt菌株对于防治食用菌异迟眼蕈蚊具有较好的开发利用潜力。 展开更多
关键词 异迟眼蕈蚊 苏云金芽孢杆菌 活性 晶体蛋白基因
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Bacillus thuringiensis营养期杀虫蛋白Vip3与其转基因植物研究进展 被引量:4
15
作者 张安红 罗晓丽 +2 位作者 肖娟丽 王志安 吴家和 《山西农业科学》 2012年第5期550-552,共3页
苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)是目前应用最多的生物杀虫剂。它能够产生多种杀虫因子,其中,最主要的是杀虫晶体蛋白(Insecticidal Crystal Proteins,ICPs)和营养期杀虫蛋白(Vegetative insectici-dal protein,Vip)。当前,... 苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)是目前应用最多的生物杀虫剂。它能够产生多种杀虫因子,其中,最主要的是杀虫晶体蛋白(Insecticidal Crystal Proteins,ICPs)和营养期杀虫蛋白(Vegetative insectici-dal protein,Vip)。当前,大部分商业化利用的转基因作物均为杀虫晶体蛋白类,随着这些转基因作物种植面积的扩大,害虫对这些较为单一的杀虫蛋白产生抗性已成为一个严峻的问题。Vip3是Vip杀虫蛋白中的一类,不形成蛋白晶体,和ICPs在进化上没有同源性;其对鳞翅目、鞘翅目和同翅目等害虫具有毒杀作用,抗虫谱较广。目前,已经把Vip3基因导入了水稻、玉米和棉花等多种作物中,为作物抗虫育种、延缓害虫产生抗性和减少作物产量损失等带来新的前景。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 营养期杀虫蛋白基因 广谱抗 基因植物
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苏云金芽孢杆菌4.0718菌株的杀虫晶体蛋白基因分析 被引量:9
16
作者 丁学知 刘全兰 +2 位作者 莫湘涛 高必达 夏立秋 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期413-417,共5页
In this study, we rapidly identified Bacillus thuringiensis 4.0718 strain that harbored the known cry1 and cry2 type genes by a PCR strategy. Three pairs of universal oligonucleotide primers were designed to detect al... In this study, we rapidly identified Bacillus thuringiensis 4.0718 strain that harbored the known cry1 and cry2 type genes by a PCR strategy. Three pairs of universal oligonucleotide primers were designed to detect all known cry1, cry2 and cry3 type gene sequences. Then the DNA of the positive strain 4.0718 was probed with a set of specific primers. One feacture of this screening method was that each gene was expected to produce a PCR product having a precise molecular weight. PCR products having different sizes probably represented the gene was a potentially novel gene. Differentiations among these genes was determined on the basis of the electrophoresis patterns of PCR products. Finally, five cry1 type genes (cry1Aa, cry1Ab, cry1Ac, cry1Cb, a novel cry4.5 type genes) and one cry2Ac type gene had been detected from Bacillus thuringiensis 4.0718 strain. 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 4.0718菌株 晶体蛋白基因 CRY基因 PCR
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苏云金芽胞杆菌及其杀虫晶体蛋白基因资源的研究进展 被引量:5
17
作者 谭芙蓉 王利刚 +2 位作者 王金斌 蒋玲曦 唐雪明 《上海农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第4期135-139,共5页
介绍了苏云金芽胞杆菌的一般特性、分类鉴定与分布以及其杀虫晶体蛋白基因的分类、在苏云金芽胞杆菌中的定位及鉴定方法,并对苏云金芽胞杆菌及其基因资源的应用前景作了展望。
关键词 苏云金芽胞杆菌 晶体蛋白基因 分类 鉴定 分布
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含苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白基因的杨树工程植株的建立 被引量:47
18
作者 伍宁丰 范云六 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 1991年第9期705-708,共4页
苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis, B.t.)制剂是杨树鳞翅目害虫的有效微生物农药,安全无毒,无环境污染问题。但无论施用化学农药或B.t.制剂防治叶部害虫时,都需要高压喷雾,困难很大。施用后如遇雨天,农药被冲走,达不到治虫效果;... 苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis, B.t.)制剂是杨树鳞翅目害虫的有效微生物农药,安全无毒,无环境污染问题。但无论施用化学农药或B.t.制剂防治叶部害虫时,都需要高压喷雾,困难很大。施用后如遇雨天,农药被冲走,达不到治虫效果;而在阳光直接照射下,又由于B.t.杀虫晶体蛋白对紫外线敏感,使杀虫效果大为减低。因此将B.t. 展开更多
关键词 杀虫蛋白基因 芽孢杆菌 杨树 植株
原文传递
苏云金芽胞杆菌YBT-1520杀虫晶体蛋白基因的属性 被引量:6
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作者 孙明 刘子铎 喻子牛 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期365-371,共7页
通过Southern杂交发现高毒力苏云金芽胞杆菌 (Bacillusthuringiensis)YBT 1 52 0菌株含有两个杀虫晶体蛋白基因片段 ,其 5’ 末端所在HindⅢ片段分别为 6 8kb和 4 6kb ,它们对应的基因分别命名为cry2 1 8和cry4 6。经PCR鉴定 ,该菌含有c... 通过Southern杂交发现高毒力苏云金芽胞杆菌 (Bacillusthuringiensis)YBT 1 52 0菌株含有两个杀虫晶体蛋白基因片段 ,其 5’ 末端所在HindⅢ片段分别为 6 8kb和 4 6kb ,它们对应的基因分别命名为cry2 1 8和cry4 6。经PCR鉴定 ,该菌含有cry1Aa、cry1Ab和cry1Ac基因 ,以及cry2基因 ,其中cry2 1 8属于cry1Ac。分析了cry2 1 8基因 41 90bp的核苷酸序列 ,在杀虫晶体蛋白基因分类系统中被命名为cry1Ac1 0。结合Southern杂交和PCR结果可判断 3个cry1A基因的拷贝数不同 ,其中cry1Ac拷贝数最高 ,YBT 1 52 0菌株与其它库斯塔克亚种的杀虫晶体蛋白基因所在限制性内切酶位置明显不同。 展开更多
关键词 苏云金芽胞杆菌 晶体蛋白基因 cry218基因
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苏云金杆菌杀虫晶体蛋白基因cry1A的克隆及特征分析 被引量:2
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作者 钟万芳 蔡平钟 +1 位作者 阎文昭 裴炎 《西南农业学报》 CSCD 2004年第1期38-40,共3页
苏云金芽孢杆菌猝倒亚种(Bacillusthuringiensissubsp.sotto)对鳞翅目幼虫有高毒力。根据cry1A类基因序列设计特异引物,应用PCR技术从该菌株中扩增得到一大小约为3 6kb的DNA片段。将获得的片段克隆至pGEM7zf中并转化大肠杆菌DH5α。在AB... 苏云金芽孢杆菌猝倒亚种(Bacillusthuringiensissubsp.sotto)对鳞翅目幼虫有高毒力。根据cry1A类基因序列设计特异引物,应用PCR技术从该菌株中扩增得到一大小约为3 6kb的DNA片段。将获得的片段克隆至pGEM7zf中并转化大肠杆菌DH5α。在ABIPRISM377自动测序仪上对其5′及3′端进行部分测序,结果表明其核苷酸序列与cry1A基因高度同源。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 晶体蛋白基因 序列分析 克隆
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