位移型板单元内力解的杂交化后处理

本文针对如何提高位移型板弯曲单元内力解的问题进行了一些探讨，在总结位移型和杂交型有限元的特点基础之上，提出了利用杂交元原理对位移型单元内力解进行重算的后处理方案：首先由位移型板元求出单元结点位移；其次假设满足平衡方程的单元内力场，并利用杂交能量泛函原理确定其与单元位移之间的联系，进而求出单元内力解。数值算例表明，本文所提出的方法可以明显改善多种板弯曲单元内力解的性态，使单元在获得较精确的位移解的同时，又可获得较好的内力解，而且又不使单元列式过于复杂。本文为改善位移型有限元的内力和应力解提供了一条可行的新途径。

三角形层合板单元及应力解的杂交化后处理

基于一阶剪切变形理论(FSDT),构造了一个新型无闭锁的三角形复合材料层合板单元CGCLLM-T9,并根据Hellinger-Reissner变分原理,运用应力杂交化后处理方法来改善此位移型复合材料板单元所得应力解的精度,使得此单元能够简单、准确地预测出层合板的应力,特别是层间横向剪应力,本单元可适用于复杂边界问题．数值算例表明,此单元不仅自由度少,列式简单,且可以得到较高精度的位移解和应力解;是一种性能较好的厚薄板通用的复合材料层合板三角形单元．

电针可增强大鼠脑内前脑啡肽原mRNA的表达:原位杂交组织化学研究

本文采用原位杂交组织化学技术，结合计算机图象处理系统，对电针后大鼠脑内前脑啡肽原（ＰＰＥ）ｍＲＮＡ的表达进行半定量的观察。ＰＰＥｍＲＮＡ探针以半抗原的地高辛标记。电针１０小时之后，ＰＰＥｍＲＮＡ阳性信号的强度和神经元内合ＰＰＥｍＲＮＡ的面积在许多与痛和镇痛有关的核团明显增加，如尾核，伏核，视前区，中脑的脚间核，导水管周围灰质，黑质，红核等。表明电针促进了ＰＰＥｍＲＮＡ在大鼠脑内的表达。这可能是针刺具有累积和长期效应的机制之一。

尖锐湿疣的原位杂交组化和免疫组化对比研究

目的 寻找尖锐湿疣的一种较确切的病理诊断方法。方法 对 48例尖锐湿疣 (CA)档案蜡块作连续切片 ,分别作HE、原位杂交组化HPV DNA和免疫组化HPV Ag(HPV衣壳抗原 )染色 ,在光镜下对比观察 ,统计分析。 结果 3 0例免疫组化阳性病例 ,进行原位杂交组化和重复免疫组化染色均为阳性 ;18例免疫组化阴性病例 ,原位杂交组化 13例 (72 .2 % )阳性 ,重复免疫组化染色 5例 (2 7.2 % )阳性 ;在连续切片上 ,显示原位杂交组化比免疫组化的阳性细胞明显增多。结论 HPV原位杂交组化特异性好 ,灵敏度高 ,方法与免疫组化相似 。

生长抑素mRNA与神经肽Y，催产素在大鼠前脑内的分布及其共存现象──地高辛标记c－RNA探针原位杂交与免疫组化联合法

本实验应用地高辛标记ｃＲＮＡ探针原位杂交组化和免疫组化联合法在同一切片上先后显示了生长抑素ｍＲＮＡ神经元和催产素神经元，生长抑素ｍＲＮＡ神经元和神经肽Ｙ神经元。结果表明生长抑素ｍＲＮＡ及神经肽Ｙ广泛地共存于大鼠的大脑新皮质，尾壳核，以及海马等处的神经元中。所有位于大脑新皮质，尾壳核处的神经肽Ｙ神经元均含有生长抑素ｍＲＮＡ，部分位于海马的神经肽Ｙ神经元含有生长抑素ｍＲＮＡ，而所有位于下丘脑弓状核，室周核的神经肽Ｙ神经元均不含有生长抑素ｍＲＮＡ；生长抑素ｍＲＮＡ与催产素虽然共同分布于下丘脑许多核区，但未见共存于同一神经元。本文对地高辛标记ｃＲＮＡ探针原位杂交组化以及它与免疫组化联合法的技术问题进行了讨论。

RNA可视化原位杂交技术对感染细胞中猪瘟病毒RNA定位与分布

【目的】为研究CSFV RNA在体外感染细胞中的分布及定位,建立了一种准确、敏感的RNA可视化原位杂交技术。【方法】本研究通过比对Gen Bank中公布的CSFV、BVDV和BDV全序列,避开BVDV和BDV的同源区,设计了CSFV RNA及内参基因β-actin的特异探针。以CSFV中等致病力毒株(He BHH1/95)为参考毒株,在PK15细胞中培养病毒,加入RNA可视化原位杂交的特异探针和相应试剂,采用荧光共聚焦显微镜进行成像观察。通过综合分析观测结果、荧光强度、重复性等因素,采用正交试验优化了对原位杂交过程中具有重要影响的蛋白酶K浓度和甲醛固定时间,建立了CSFV RNA可视化原位杂交技术,并与FAT方法比较该技术灵敏度;用我国目前流行的CSFV 1.1、2.1、2.2、2.3基因亚型及BVDV、PPV、PRV和PCV-2病毒进行特异性试验。最终,以CSFV强致病力毒株(SM)接种PK15细胞,病毒感染后0.5、1、3、6、8、10、14、18、24、36、48、72、96h(hours post inoculation,hpi)取样,每个时间点2个重复,采用CSFV RNA可视化原位杂交技术进行检测。为佐证病毒蛋白在细胞中的定位及分布,同时采用FAT方法对SM株E2蛋白在PK15细胞中的表达情况进行动态研究。【结果】采用该技术在荧光共聚焦显微镜下可观察到CSFV RNA在细胞中的定位;当蛋白酶K浓度为1:1 000、甲醛固定时间为30min时为最优反应条件;灵敏度试验表明该技术对病毒的检测极限为10-8/200μL,比FAT高3.5个数量级;特异性试验结果显示该探针能与CSFV 1.1、2.1、2.2、2.3亚型结合,与BVDV、PPV、PCV-2、PRV无交叉反应。采用该技术对CSFV RNA感染后在靶细胞中的定位与分布研究结果显示:0.5hpi在胞核和胞浆均能检测到RNA,0.5—6hpi RNA主要分布于胞核内并在核内富集;10hpi胞浆内RNA逐渐增多,胞核内RNA逐渐减少,24hpi RNA主要集中在胞浆内细胞核周围;36hpi核外RNA大量聚集增多,72hpi达到峰值;96hpi RNA总量有所下降。而FAT结果显示:8hpi在少数细胞的胞浆内检测到病毒E2蛋白,10—24hpi蛋白表达数量一直较少;36hpi蛋白表达量不断增多,72hpi达到最大值;96hpi荧光信号由强变弱。病毒蛋白在细胞浆内的聚集数量与细胞浆中RNA含量成正相关。【结论】首次建立了CSFV RNA可视化原位杂交检测技术,并对CSFV强致病力毒株在细胞中的RNA定位分布进行了研究,发现病毒RNA吸附和进入靶细胞的时间早于0.5hpi,观察到CSFV RNA有在细胞核内的生活史。

精化杂交法及精化平面四边形单元

基于新的泛函、合理的变量假设及应变正交化，提出了称之为精化杂交 元的方法。精化杂交法可以使单元的应变能按假定的应变模式分解，由此得 到相应的分解的单元刚度矩阵，而且常常可以推出显式。精化杂交法有效地 提高了杂交应力元或广义杂交元的精度和计算效率。所建立的平面四边形精 化杂交元，可以作为对著名的Ｐｉａｎ单元的改进。算例表明，所建立的四边形 单元较已有的各类平面四边形单元具有更高的精度和计算效率。

大鼠实验性胃溃疡期间大脑皮层SS免疫组织化学和原位杂交组织化学研究

目的 观察大鼠实验性胃溃疡期间大脑皮层生长抑素免疫反应(SS-ir)和SSmRNA神经元的变化。方法 免疫细化PAP法;地高辛标记反意SScRNA探针mRNA原位杂交组化法。结果 正常大鼠SS-ir神经元广泛分布于大脑皮层。溃疡术后1d,大脑皮层纹状皮质区各层SS-ir神经元减少,但可见大量串珠样SS强阳性纤维,溃疡组SS-ir神经元数与盐水组相比无差异;术后4d,溃疡组大脑皮层纹状皮质区各层SS-ir神经元密集、数量明显增多,与盐水组、正常组相比均有差异(P<0.05,P<0.01或P<0.001)。术后10和23d,以上核区SS-ir神经元数仍高于盐水组和正常组(P<0.01,P<0.001)。术后4d,溃疡组大脑皮层SSmRNA神经元数量明显多于盐水组(P<0.001)。结论 大鼠实验性胃溃疡时期,大脑皮层SS-ir和SSmRNA神经元可能参与了胃溃疡自愈过程的调节。

玉米雄性不育化杂交种加速应用的商榷意见

玉米雄性不育化杂交种由于出现种子混杂以及管理失误造成产量的减低与失收,未能实现大面积的推广。介绍了我国利用雄性不育化杂交育种的情况,探讨了雄性不育化杂交种实践应用价值,明确了雄性不育化杂交种育性稳定、技术匹配可靠及高产特性,阐明雄性不育化制种可以取得纯净、整齐一致的种子,而管理具有突出的重要性。因此,应用雄性不育化杂交种,不但有增产的趋势,而且可以降低生产成本增加经济效益。

精化杂交压电固体单元的研究

基于力、电耦合问题的三类变量广义变分原理,提出了广义杂交压电单元列式。为了进一步改进单元的性能和保证单元能够通过分片检验,通过引入非协调模式、放松电学方程约束条件和单元间的弱连续性条件,建立了新的、修正的广义变分原理,在此基础上成功地引入了应力、应变的正交化插值模式,从而建立了精化杂交压电单元法,它继承了常规精化杂交单元的全部优点。文中所推导的八节点精化杂交压电固体单元列式完全避免了矩阵求逆运算,较广义杂交压电单元和杂交应力压电单元均显著提高了计算效率。数值算例表明,与同类型其他单元相比,该单元明显具有更好的对歪斜网格的适应性。

标化消减杂交:提高差异表达cDNA筛选效率的新策略

在回顾分析了消减杂交技术改进历程的基础上,我们提出了“标化消减杂交策略”。此策略的核心是“用标化cDNA制备消减杂交反应的单链驱动子和单链示踪子,分离回收消减杂交后的单链示踪子用于制备差异表达cDNA文库,并从标化cDNA文库制备探针来对差异表达cDNA文库进行检测”,将主要用于筛选与细胞特殊表型密切相关的(或与不同发育阶段等密切相关的)呈“全或无”差异形式表达的低丰度全长cDNA。此策略有望能较以往的消减杂交策略在降低假阳性背景、提高低丰度差异表达cDNA获得率、得到较长甚至全长差异表达cDNA等方面有较好表现,但尚待检验。

精化的广义杂交方法与修正的Wilson非协调方法等价性

统一分析了修正的Ｗｉｌｓｏｎ非协调四边形元与精化的广义杂交元的等价性。

分裂泛素化酵母双杂交系统研究光合膜蛋白相互作用

光合类囊体膜主要由光系统Ⅱ、细胞色素b6f复合物、光系统Ⅰ以及ATP合酶4个超分子复合物组成.利用分裂泛素化酵母双杂交系统研究光合类囊体膜蛋白间的相互作用.将叶绿体psbA基因编码的D1蛋白作为诱饵蛋白,以叶绿体基因psbD编码的D2蛋白、petB编码的Cytb6蛋白作为靶蛋白,分别共转化酵母菌株后进行相互作用分析.实验结果表明,诱饵蛋白D1能与来源于同一复合物光系统Ⅱ的D2蛋白发生相互作用,而与来源于细胞色素b6f复合物的Cytb6蛋白没有互作.这一结果表明,分裂泛素化酵母双杂交系统可以用于检测光合膜蛋白间的相互作用,从而为研究光合膜蛋白生物发生的调控机理提供一个有效的工具.

用原位杂交组化方法探测肾上腺中合成前脑啡肽原的mRNA

取经Zambonis’固定液固定的豚鼠肾上腺作冰冻切片.切片经预杂交后,用含生物素标记的前脑啡肽原A(PPA)的cDNA探针的杂交液孵育,然后孵于链霉抗生物素-辣根过氧化物酶复合物溶液中,用DAB呈色.结果:约90％的肾上腺髓质细胞呈阳性反应,阳性反应产物位于细胞质中。

恢复型玉米雄性不育化杂交种ST501选育及配套技术研究

泰安市农科所通过体细胞培养产生雄性不育变异 ,经田间纯合选择 ,选育出优良雄性不育系ST0 2 9及其保持系 ;通过测交筛选 ,选育出对ST0 2 9具有强恢复性的优良恢复系恢 3 19。组配成强优势恢复型玉米杂交种ST5 0 1,其F1 代自然恢复株率达到96%以上 ,散粉结实正常 ,可以直接应用于生产。经 3a试验 ,比同型可育系增产 6.2 % 。

Y型玉米雄性不育化杂交种形态特征及推广可行性初探

该文以如皋市大面积推广的掖单１３号不育化杂交种为例，研究Ｙ型不育化杂交种与同核型杂交种（用保持系配制的杂交种）个体植株发育及产量结构方面的差异。研究结果表明，不育化杂交种的生长速度快，整齐度高，增产因素显著。同时，制种省工节本，纯度好，产量高，推广是可行的。

二倍体杂交种棱果沙棘双向杂交起源及其母本主要来源于中国沙棘的分子证据

棱果沙棘为同域分布的中国沙棘和肋果沙棘同倍化自然杂交形成的。本文利用母系遗传的cpDNA trnS-G序列检测青海祁连棱果沙棘及其亲本中国沙棘和肋果沙棘同域分布的两个地区(拱北湾、八宝河滩)共93个个体的遗传关系。结果表明棱果沙棘及其亲本在拱北湾和八宝河滩分别有12个和7个单倍型,两地区的棱果沙棘都与其亲本共享单倍型,其中拱北湾棱果沙棘共36个个体中有28个与中国沙棘共享3个单倍型(H2,H4,H5),有2个个体与肋果沙棘共享单倍型(H11),八宝河滩的棱果沙棘共10个个体中有7个与中国沙棘共享一个单倍型(H4),3个与肋果沙棘共享单倍型(H7)。应用最大简约法(MP)分别对两地区的棱果沙棘及其亲本trnS-G序列构建的系统发育树中棱果沙棘的大部分个体都与中国沙棘聚在一起,另外,棱果沙棘4种特有单倍型(H3、H7、H8、H9)的6个个体在系统树上也与中国沙棘聚为一支。以上结果进一步证明了二倍体自然杂交种棱果沙棘为双向杂交起源,但其主要母本来源应为中国沙棘。