蜡块保存年限对乳腺癌HER2基因荧光原位杂交结果的影响

目的以浸润性乳腺癌HER2基因表达为研究对象,探讨蜡块保存年限对HER2基因荧光原位杂交(FISH)检测结果的影响。方法回顾性收集2012年1月至2017年12月在首都医科大学附属北京友谊医院病理科初诊为原发浸润性乳腺癌的石蜡样本70例,其中免疫组织化学检测HER2蛋白2+且FISH检测HER2基因扩增的病例每年度10例,共60例,归为Fp组,包括手术切除标本32例,穿刺标本28例;另外选取2012年1月至2012年12月HER2蛋白2+且FISH检测HER2基因未扩增的病例10例,作为阴性对照,归为Fn组,包括手术切除标本5例,穿刺标本5例。将所有病例的归档蜡块以4μm厚度连续切片2张,一张用于苏木精和伊红染色以确定肿瘤位置,另一张重新进行FISH检测,切片预处理采用高温高压热修复方法,胃酶消化使用光学显微镜观察控制。最后按照乳腺癌HER2检测指南(2019版)进行判读并将计数的平均HER2拷贝数/细胞、平均CEP17拷贝数/细胞以及HER2/CEP17比值与初诊结果进行对比。结果Fp组60张切片中,除1张2016年的穿刺组织杂交失败外,其余组织均杂交成功,成功率为98.33%(59/60),成功的切片均判读为阳性,与初诊结果符合率为100%;Fn组10张切片全部杂交成功且均判读为阴性,与初诊结果符合率为100%。Fp组、Fn组中平均HER2拷贝数/细胞、平均CEP17拷贝数/细胞以及HER2/CEP17比值与初诊结果相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论保存5~10年的乳腺癌归档蜡块,采用高温高压热修复后行HER2基因FISH检测,成功率高、结果准确,可为初诊HER2 IHC 2+但未行FISH检测的癌转移患者在抗HER2靶向用药的筛选中提供一定的依据。

纯化探针降低基因芯片杂交结果的背景

研究探针的纯化对基因芯片杂交结果的影响。将乙醇沉淀的探针和用DNA纯化试剂盒纯化的探针分别与基因芯片杂交 ,在同等条件下进行杂交后清洗和芯片扫描检测。结果表明 ,纯化的探针与基因芯片杂交结果的背景低 ,而未纯化的探针背景强 ,阳性信号界限比较模糊。运用基因芯片进行基因表达谱研究 ,要求杂交检测的结果必须低背景。

蝴蝶兰红花系品种间杂交结果率研究

选取9个蝴蝶兰红花系品种按完全双列杂交进行自交与杂交，共获得5个自交组合与16个杂交组合．总结果率为9．3％，其中自交结果率为22．2％，杂交结果率为7．7％．各组合果荚生长曲线走势大致相同，授粉后7～9d，子房开始膨大，约于50d趋于平稳状态．平均果实采收时间、质量、长及宽分别为（103±4）d，（3．41±0．18）g、（5．50±0．43）cm及（9．37±0．54）mm．果质量、果长、果宽三者之间呈正线性相关．

两种限制性标记方法提高基因芯片杂交结果的信噪比

目的研究采用荧光标记的通用引物扩增或在扩增中掺入荧光标记dNTP两种限制性荧光标记方法标记探针对提高表达谱基因芯片杂交结果信噪比的作用。方法酵母mRNA经常规逆转录标记方法及两种限制性标记方法进行标记,探针纯化后与酵母表达谱基因芯片进行杂交,在同等条件下进行杂交后清洗和芯片扫描检测。结果两种限制性标记方法与直接逆转录标记相比杂交结果背景低,信噪比及灵敏度高,其中以荧光标记的通用引物扩增效果最佳。结论采用限制性标记方法后杂交结果信噪比提高,有利于基因芯片技术的应用。

568例HER2不确定乳腺癌原位杂交结果分析

目的比较2013版及2018版美国临床肿瘤学会/美国病理医师学院(ASCO/CAP)乳腺癌HER2检测指南,对免疫组织化学HER2不确定(2+)乳腺癌FISH判读结果的影响及其临床意义。通过与FISH对比,分析DISH的准确性及存在问题。方法选取568例免疫组织化学HER2不确定浸润性乳腺癌石蜡包埋标本,使用FISH技术进行HER2基因状态检测,分别采用2013及2018版ASCO/CAP乳腺癌HER2检测指南进行结果判读。随机选取60例样本进行DISH检测,并与FISH对比分析。结果依据2013版指南,HER2阳性183例(32.22%)、阴性365例(64.26%)、不确定20例(3.52%)。采用新指南判读标准,HER2阳性率减少了4.58%,阴性率无差别,两种判读标准差异具有统计学意义(P<0.01)。对60例肿瘤样本的FISH和DISH检测结果比较,两者总符合率为95.0%,阳性符合率为94.7%;阴性符合率为100%,两种方法的检测结果显著相关(r=0.636, P<0.01)。结论 2018版ASCO/CAPHER2检测指南与2013版相比,判读标准更明确、分类更精细,对临床用药更具指导作用。DISH技术具有亮视野的优点,与FISH有同样的临床诊断价值。

油桐若干性状双列杂交结果的分析

油桐5×5完全双列杂交配合力分析表明:12个性状中树高、分枝轮数、三年平均产量等性状的SCA方差和反交效应方差差异显著,这些性状的遗传方差主要由非加性基因效应引起。各性状的遗传力大小不同,平均产量的h_(B^2)最高。25个杂交组合中以0×8组合后代的产量最高,15×3组合后代比较全面,各性状的SCA值较高。所以选择特定杂交组合,在后代产量上可以有34%的△G。0号亲本产量上GCA值最高,利用其加性基因效应,也可以有22.79%的△G。油桐自交后代在产量上有衰退现象,在杂交育种时应尽量加以避免。

力竭性游泳对大鼠胰岛 A、B 细胞形态学变化的影响——免疫组化及原位分子杂交结果分析

采用免疫组化及原位分子杂交技术，本文研究了负重力竭性游泳对大鼠胰岛Ａ、Ｂ细胞分泌功能的影响。主要结果发现：力竭状态下，①大鼠胰岛Ｉｎｓ－ＩＲ细胞呈色反应强度增加，而Ｇｌｕ－ＩＲ细胞呈色反应强度降低，说明Ｂ细胞Ｉｎｓ释放被抑制，Ａ细胞Ｇｌｕ释放增多。②大鼠胰岛Ｂ细胞内Ｐｒｏ－ＩｎｓｍＲＮＡ杂交信号明显减弱，说明Ｐｒｏ－Ｉｎｓ－ｍＲＮＡ转录受到抑制，Ｉｎｓ合成受抑。③Ｉｎｓ－ＩＲ和ＩＡＰＰ－ＩＲ细胞未呈现相同程度的呈色反应变化，提示Ｂ细胞内存在着含ＩＡＰＰ／Ｉｎｓ不同比率的分泌颗粒，可随机体的机能状态需要而分别释放。

DNA固定技术对结核分枝杆菌PCR产物杂交结果影响的研究

目的 比较各种ＤＮＡ 固定方法对结核分枝杆菌ＰＣＲ 产物杂交结果的影响。方法 选取结核分枝杆菌ＰＣＲ 扩增产物并点于尼龙膜上，用紫外线、加热和碱液三种方法固定ＤＮＡ，然后以ＰＣＲ 产物作探针用增强化学发光标记试剂进行标记，并对三种不同方法固定的ＰＣＲ 产物杂交分析。结果 结核分枝杆菌ＤＮＡ固定方法对ＰＣＲ 扩增产物的检测结果具有较大的影响，碱液固定具有较好的敏感性和重复性。结论 各地结核分枝杆菌ＰＣＲ 实验室可考虑用碱液法对ＰＣＲ

两种PCR方法对检测A组轮状病毒膜芯片杂交结果的影响

A组轮状病毒(rotavirus,RV)是导致全世界婴幼儿腹泻的最主要病原,危害巨大。拟用RT-巢式PCR技术对A组RV的保守序列进行高度扩增,通过同本室自制的膜芯片杂交,实现对该病毒的检测。分别采用对称PCR和不对称PCR扩增,均可得到扩增的目的片段。对称式扩增产物杂交结果不理想。而不对称式扩增得到了大量待检单链产物,同膜芯片杂交获得了理想的杂交结果。显著地提高了对A组RV杂交检测的灵敏度。表明不对称式PCR扩增是一种制备用于芯片杂交大量单链产物的理想方法,尤其是针对富含AT的核酸检测区域。

DNA固定技术对结核分枝杆菌PCR产物杂交结果影响的研究

目的 比较各种ＤＮＡ固定方法对结核杆蓖ＰＣＲ产物杂交结果的影响。方法 选取结核杆菌ＰＣＲ扩增产物并点样于尼龙膜上，用紫外线，加热和碱液三种方法固定ＤＮＡ，然后以结核杆菌ＰＣＲ产物作探针用增强化学发光标记剂进行标记，并对三种不同方法固定的ＰＣＲ产物杂交分析，结果结核杆菌ＤＮＡ固定方法对结核杆菌ＰＣＲ扩增产物的检测结果具有较大的影响，碱液固定具有较好的敏感性和重复性。

比较两种脱钙液对Kappa/Lambda原位杂交结果的影响

Kappa／Lambda原位杂交的检测对浆细胞骨髓瘤的诊断帮助很大，能有效减少Kappa／Lambda在免疫组化染色中导致的背景过重从而影响病理医师诊断的问题。然而在日常工作中，不同脱钙液对Kappa／Lambda原位杂交的影响很大，

100例多发性骨髓瘤患者荧光原位杂交结果汇总分析

目的探讨荧光原位杂交(FISH)技术检测在多发性骨髓(MM)诊断和治疗中的作用及临床意义。方法应用FISH技术,采用特异性探针(RB1、P53、D13S319、IGH及Iq21),对100例初诊MM患者进行检测,分析其染色体异常情况,与患者的临床指标进行相关性分析。结果 FISH技术检测100例初诊MM患者中60例(60%)基因异常,其中IGH重排42例(42%),Iq21扩增32例(32%),RB1缺失23例(23%),D13S319缺失21例(21%),P53缺失5例(5%)。各基因异常结果与临床指标相关性分析如下:IGH基因重排与骨髓内浆细胞水平(>30%)、ISS分期存在相关性;del(13q)与ISS分期、骨髓浆细胞水平(>30%)及β2-微球蛋白水平(β2-MG)水平存在相关性;Iq21扩增与β2-MG、ISS分期存在相关性;P53缺失检出率最低,预后可能较差。MM患者存在染色体异常的主要以Ig G型和Ⅲ期为主。结论 MM最常见的基因异常是IGH基因重排以及Iq21扩增,其次是RB1和D13S319缺失,P53缺失最少。Ⅲ期和Ig G型患者出现染色体异常的可能性更高。FISH的检出率要优于染色体常规核型分析(CC)技术,FISH联合CC可作为MM患者的常规检查,指导临床治疗。

15年猪杂交结果的总结

１５年猪杂交结果的总结刘志武吕耀忠（黑龙江省畜研所·富拉尔基·１６１０４１）徐树臣刘岩杨俊奎李国英张淑英张洪发杨兴隆孟祥本王明杰（齐齐合尔种畜场）（大庆油建猪场）（大庆供电猪场）薛德才韩同举刘龙王亚波高明何勇于福谦姜海云邹智慧（大庆四部猪场）（兰西县...

香型优质高产杂交稻新品种野香优669的选育与应用

【目的】选育产量、米质和抗性相协调的香型优质水稻新品种。【方法】利用亲本间的遗传多样性和农艺性状的互补性,以高产、高配合力的父本福恢669与香型、优质、抗病的不育系野香A杂交,结合多生态点抗性鉴定、高温逼熟后品质分析、多年多点品比试验等相结合。【结果】选育出优质、高产、抗病,株叶态协调的杂交稻品种野香优669。2019–2020年参加福建省中稻区域试验,全生育期两年平均139.8 d,比对照II优3301早熟1.1d,产量平均9363 kg·hm^(-2),比对照增产2.24%,未达显著水平。两年稻瘟病抗性鉴定综合评价为抗稻瘟病,稻米品质达部颁一等优质食用稻品种品质标准,2021年通过福建省农作物审定委员会审定(闽审稻20210014)。野香优669聚合了来自双亲的22个有利基因,其中6个为单方携带,16个为双亲均携带。【结论】野香优669产量高、抗性强、品质好、口感佳,在生产上大面积推广应用,是福建省农业主推品种之一。

土壤施硒量对杂交狼尾草生长和硒积累的影响

为探讨杂交狼尾草(P.americanum×P.purpureum)产能对富硒强化措施的响应,本研究采用盆栽试验,研究不同土壤施硒量(0,0.50,1.00,2.00,5.00,10.00,20.00,30.00,40.00和50.00 mg·kg^(-1))处理对杂交狼尾草幼苗成活率、产能和硒积累的影响。结果显示,土壤施硒量1.00 mg·kg^(-1)对杂交狼尾草的生长有促进作用;20.00 mg·kg^(-1)显著抑制幼苗的成活率和分蘖期的生长,对拔节期和成熟期植株影响不显著;40.00 mg·kg^(-1)抑制拔节期的生长。土壤施硒量≤5.00 mg·kg^(-1)时,杂交狼尾草地上部和根系对硒有较强的富集能力,富集能力强于紫云英、黑麦草和紫花苜蓿等;通过杂交狼尾草的生物转化,大量无机硒可转化为有机硒,而在≤5.00 mg·kg^(-1)施硒量下有机硒转化率最高,为56.19%~73.91%。研究表明,杂交狼尾草是一种富硒能力强的饲草,在土壤施硒量≤5.00 mg·kg^(-1)(土壤硒本底值为0.07 mg·kg^(-1))时对硒的富集效果最佳,有机硒转化率高,具备作为高硒、高值化饲料添加剂材料的开发潜力。

梨杂交F_(1)果实性状遗传倾向分析

以延边大香水为母本,红香酥、早酥、红茄、晋酥、晋密、鄂梨1号和云红1号为父本的7个梨杂交组合F_(1)为试材,对果实性状进行连续3年调查,总结分析果实性状遗传倾向,以期为梨遗传育种提供参考依据。结果表明:杂种F_(1)单果重、果实横径、果实纵径、果柄长度、果柄粗度、果形指数及可溶性固形物等7个性状都有趋中遗传倾向。其中,单果重产生退化,向小果遗传趋势强;可溶性固形物和果形指数变异系数较小,遗传传递力较高;果柄粗度呈趋中偏低遗传,果柄长度、果实横径、果实纵径呈趋中偏高遗传。对不同组合果实性状遗传倾向研究认为果实底色、萼片类型、萼洼深度、质地、汁液、风味等性状受母本影响较大,为母性遗传;萼洼广度有趋中遗传倾向;果实香气受父本影响较大;果实面色可隔代遗传。以上研究结果为梨果实性状遗传规律研究及杂交育种亲本的选择选配提供参考价值。

杜湖杂交F_(1)代羔羊与湖羊生产性能比较研究

本研究旨在通过对纯种湖羊羔羊和杜泊羊与湖羊杂交F_(1)代羔羊生产性能进行比较,探讨在榆林当地舍饲条件下用杜泊羊与湖羊杂交对湖羊肉用性能的改良效果。试验选择30只遗传背景相同、生长状况良好、经产且繁殖性能正常的湖羊母羊,随机分为2组,分别用湖羊公羊(HH组)、杜泊公羊进行交配(DH组),测定并比较2组母羊的繁殖性能、羔羊的生长性能、6月龄羔羊的屠宰性能和肉质性能。结果表明:母羊繁殖性能各性状在DH组和HH组间均无显著差异;在生长性能方面,DH组羔羊2月龄、3月龄、4月龄及6月龄体重均极显著高于HH组,而初生重差异不显著,且2组间的日增重除在3~4月龄间差异不显著外,其余0~2月龄、2~3月龄、4~6月龄各阶段的日增重均为DH组显著大于HH组,而6月龄体尺指标除胸围为DH组显著高于HH组外,其余指标包括体高、体长、十字部高、胸宽、胸深及管围在2组间均差异不显著;6月龄羔羊屠宰性能所测各指标均为DH组高于HH组,且屠宰率差异显著,而宰前活重、胴体重、净肉重、肉骨比、胴体产肉率差异极显著;肉质性能测定中,DH组的熟肉率显著高于HH组,其他肉品质所测指标、肌肉常规营养成分均无显著差异。说明在榆林当地舍饲条件下,用杜泊羊与湖羊进行经济杂交可显著提高F1代羔羊的生长性能和屠宰性能,而对F1代羔羊羊肉品质无显著影响。

甘肃西部地区肉羊与湖羊杂交组合效果研究

试验旨在研究甘肃西部地区杂交一代羊与湖羊纯繁组的生产性能及肉用性能,筛选适宜该区域生态条件的肉羊杂交组合模式。以杜泊羊、澳洲白、萨福克羊为父本,以湖羊为母本开展杂交试验,按照体重、年龄相近的原则,随机选择90只杂交羔羊,分成杜湖组(DHF1组)、澳湖组(AHF1组)和萨湖组(SHF1组),每组3个重复,每个重复10只羊;以30只湖羊纯繁(HHF1组)作为对照组,比较各组F1代羔羊的生长性能、产肉性能及肉品质。结果显示,各试验组F1代羔羊的5月龄体重和平均日增重均显著高于对照组(P<0.05),以DHF1组最高。各试验组F1代羔羊的宰前活重、胴体重、屠宰率、眼肌面积、GR值均高于对照组,其中DHF1组显著高于对照组(P<0.05)。各组羊肉中必需氨基酸占总氨基酸的40%以上,必需氨基酸占非必需氨基酸的70%以上,均高于FAO/WHO的推荐值。综合比较,DHF1组肉用性能较好。研究表明,DHF1组羊生长发育快、屠宰性能高、肉品质相对较好,可作为甘肃西部地区商品肉羊生产的二元杂交模式优先推广应用。

气吸式杂交稻单粒排种器研制

针对气力式水稻精量排种器充种不稳定、单粒播种精度不高和播种量大的问题,该研究设计了一种具有矩形吸种孔和辅助充种装置的气吸式杂交稻单粒排种器。根据“吉田优”型杂交稻的长短轴重力分布情况,确定排种盘吸种孔形状;基于CFD-DEM(Computational fluid dynamics,Discrete element method)流固耦合理论,以吸附力为指标,进行5类具有相同面积的吸种孔单因素仿真试验,确定吸附力最大的吸种孔规格为0.8 mm×2.25 mm;以该型吸种孔为基础,选取辅助充种角、工作转速和工作负压为试验因素,以单粒率S、多粒率M和漏播率L为试验指标,开展Box-Bhnken台架试验,对试验结果进行响应曲面分析和多目标优化,得到排种盘辅助充种角为80.90°、工作转速为42.65 r/min、工作负压为621 Pa时,排种器的单粒率为86.91%,漏播率为3.63%。验证试验结果的排种器单粒率为86.36%、漏播率为3.41%,与优化结果吻合。研究结果可为后续气吸式杂交稻单粒排种器的优化设计和直播机整机作业精度的提高提供指导。