家蚕基因库保存遗传系统白卵突变的杂交鉴定

用杂交分析的方法 ,采用各已知白卵基因的标志系统对家蚕基因资源库 2 1个未知基因的白色卵系统进行鉴定 ,结果 :①有 3个系统为母性遗传白卵 ,基因座位均与w - 1相同 ,其中 2个与w - 1遗传模式完全一致 ,但另 1个表现为混合型母性遗传 (F1似母 ,F2 普通遗传 ) ,可能为一新的卵色基因 ;②有 4个系统与w - 2杂交后代不分离 ,很可能直接由w - 2基因支配 ;③地方品种 19- 340为黑眼浅褐色白卵 ,普通遗传 ,与w - 3杂交后代无正常型黑色卵分离 ,初步推定为w - 3复等位基因群又一新成员 ;④有 13个系统与桃红眼白卵 (pe)系杂交后代不分离 ,且卵色纯一 ,初步推定它们均由pe基因支配。此外 ,部分白卵系统具有红色卵 (re)的re/re或re/

受辐照窄颖赖草花粉DNA进入小麦胚囊的电镜自显影证据及杂种原位杂交鉴定

采用3H 胸腺嘧啶标记窄颖赖草 (Leymusangustus)花粉结合电镜自显影的方法证明受辐照窄颖赖草花粉DNA进入了小麦胚囊 ,运用基因组原位杂交技术证明所得杂种为真杂种 ,经辐照花粉获得的普通小麦J 1

浙江红花油茶×广宁红花油茶杂交子代的表型性状及其SSR分子鉴定

浙江红花油茶(Camellia chekiangoleosa)种仁含油率和油酸含量高,广宁红花油茶(C.semiserrata)具有较强的生长势和抗性。为了利用浙江红花油茶和广宁红花油茶的优点,培育优良种质材料,该研究对浙江红花油茶与广宁红花油茶的45个F_(1)杂交子代进行表型性状分析,以掌握杂交子代的表型性状情况,同时利用SSR标记对其进行杂种真伪鉴定,并筛选可用于油茶杂交子代鉴定的SSR标记。结果表明:(1)浙江红花油茶×广宁红花油茶的F_(1)子代表现为树形高大、生长迅速且其叶脉、萼片、柱头均倾向于父本广宁红花油茶的性状,而花和叶片形态等性状与母本浙江红花油茶接近,叶片颜色与大小等特征介于双亲特征之间。(2)从32个SSR标记中筛选出了8个可区分双亲且能明确杂交子代来源的完全互补型标记,用于开展杂交子代鉴定,其中7个标记杂种鉴定效率高达100%,1个标记杂种鉴定效率为55.56%;8个标记相互补充鉴定出45个杂交子代全是真杂种。(3)8个SSR标记对杂交子代进行的鉴定能力验证表明,利用这些SSR标记鉴定油茶杂交子代是可行的。该研究结果为油茶物种间的杂交育种提供了参考,同时也为后续油茶物种间的杂交子代SSR标记鉴定提供了依据。

姜荷花杂交子代的SSR鉴定及遗传多样性分析

姜荷花(Curcuma alsimatifolia Gagnep.)为姜科姜黄属多年生球根草本花卉,其花朵外形似郁金香,享有“热带郁金香”之美誉,是泰国引进的热带新兴花卉。目前姜荷花品种主要依赖进口,国内缺乏自主知识产权新品种,因此开展姜荷花育种工作,培育姜荷花新品种,对姜荷花产业发展、提高国内姜荷花产业竞争力十分重要。为选育具有自主知识产权的姜荷花新品种,丰富姜荷花品种多样性,本研究以姜荷花黄色梦幻品种为母本,红衣少女、白银公主和荷兰红为父本进行杂交的3个不同杂交组合,共327株杂交子代为研究对象,基于SSR分子标记技术鉴定其真假杂种。分别筛选5对特异SSR引物鉴定3个杂交组合的杂种F_(1)代的真实性,并对亲本和杂交F_(1)代群体的基因分离规律以及遗传多样性和遗传关系进行分析。结果表明:筛选出的SSR标记对4个亲本材料的分辨率较高,扩增多态性好,可有效鉴定其杂交后代血缘的真实性;327份F_(1)代个体中共鉴定出真杂种295份,黄色梦幻×红衣少女、黄色梦幻×白银公主、黄色梦幻×荷兰红3个杂交组合的真杂种率分别为91.8%、90.8%、93.4%。聚类结果分析显示,杂交组合黄色梦幻×红衣少女F_(1)代偏母本遗传,杂交组合黄色梦幻×白银公主和黄色梦幻×荷兰红多数杂交F_(1)代为偏父本遗传。因此,SSR分子标记引物具有较高的多态性,可直接用于姜荷花遗传多样性分析、杂种鉴定等相关研究,本研究为姜荷花杂交育种、分子标记辅助育种以及姜荷花新品种选育提供参考依据,为促进国内姜荷花产业的发展具有重要意义。

3种野生铁线莲杂交子代表型性状及ISSR分子鉴定

为培育铁线莲新品种、丰富其栽培类型,以大叶铁线莲、卷萼铁线莲、短尾铁线莲3种不同生长类型的野生铁线莲为亲本进行远缘杂交育种并鉴定其子代的真实性,探究子代与亲本的遗传变异规律和遗传多样性。结果表明:利用12条ISSR引物对3个亲本的6个杂交组合的子代进行真实性鉴定,47个子代鉴定出了43个真杂种。杂交亲本及子代的等位基因数变化范围为1.731~1.937,有效等位基因数变化范围为1.449~1.613,期望杂合度变化范围为0.273~0.352,多样性指数在0.417~0.527之间,表明子代具有丰富的遗传变异。杂交子代部分表型性状受到了亲本的影响,在直立和藤蔓2种亲本生长类型的基础上出现了匍匐生长类型的子代,萼片长度、萼片宽度、花径、叶片宽度呈现增加趋势,其余花部和叶部性状则相反。表型性状结合分子标记可有效用于野生铁线莲杂交子代早期真实性鉴定,缩短育种周期,为新品种选育提供理论依据。

石斛兰杂交后代SRAP鉴定与遗传多样性分析

以麝香石斛、檀香石斛及麝香石斛×檀香石斛的100个杂交后代株系为试材,采用SRAP分子标记的方法,研究了杂交后代的真实性及亲本与杂交后代群体的遗传多样性,以期为加速石斛兰新品种的选育提供参考依据。结果表明:综合6对SRAP引物组合的扩增情况,共鉴定出100个杂交后代为真杂种,鉴定效率达100%;6对SRAP引物组合的多态性比例达97.26%,多态性信息含量均值为0.85;由聚类分析可知,92%的杂交后代在亲缘关系上与父本聚为一类;由遗传相似系数分析可知,杂交后代与父本间的遗传相似系数平均值大于母本。综上所述,供试的麝香石斛×檀香石斛杂交后代均为真杂种,且表现为偏父本遗传,SRAP分子标记可作为石斛兰杂交后代早期鉴定的有效手段。

基于InDel标记的长杂谷2922杂交种纯度鉴定

为了鉴定谷子杂交种长杂谷2922的纯度,本研究从11个候选InDel标记中筛选出在长杂谷2922及其双亲之间具有多态性的InDel标记Re2632,利用Re2632对长杂谷2922进行分子标记鉴定,并喷施除草剂进行验证。分子鉴定结果显示,杂交种纯度在20.83%~44.68%之间,平均纯度为33.72%。除草剂鉴定结果显示,杂交种纯度在18.32%~50.60%之间,平均纯度为32.59%。t测验结果显示,2种方法鉴定结果无显著差异,表明Re2632可以作为长杂谷2922分子鉴定的标记。

鸭茅杂交种SRAP分子标记鉴定及遗传分析

【目的】利用分子标记技术对鸭茅杂交种进行快速鉴定和遗传分析,建立鸭茅杂交种的快速鉴定体系,揭示鸭茅杂交种群体遗传信息,为鸭茅资源保护利用及新品种选育提供科学依据。【方法】利用SRAP标记技术对140个鸭茅杂交种单株及其亲本(01996、YA02-103)DNA进行扩增,分析杂交种与其亲本间扩增谱带的多态性,以鉴别真假杂交种,并结合形态标记对杂交后代的遗传变异进行分析。【结果】从192对SRAP引物中筛选出64对引物在杂交种和双亲间存在扩增多态性,多态性百分比为33.33%。利用能扩增出父本特征带的引物鉴定了140个杂交种,其中106个具有父本的特征带,可鉴定为真杂交种。选择16对多态性引物对亲本和106个真杂交种进行扩增,获得151条条带,其中多态性条带71条,平均每对引物扩增出4条多态性条带,多态性位点百分比为47.24%。【结论】SRAP用于鸭茅杂交种鉴定及多态性分析是可行的。

油菜杂交种合油杂2号纯度鉴定的SSR引物筛选

以陕西渭北旱塬最新审定的双低油菜品种合油杂2号以及亲本为试验材料,用SSR标记技术研究杂种与双亲之间的扩增谱带多态性以甄别真假杂种。结果发现,200对SSR引物先用亲本进行预选,有45对引物可以特异区分两亲本,进一步反复筛选,其中引物CB10524分别在杂交种和其双亲之间存在扩增条带的多态性,表现为杂交种条带均为父母本的互补型,很适合做杂交种纯度鉴定。用该引物对合油杂2号杂交种进行SSR纯度鉴定,所测纯度分别为93%,与田间实测纯度94.27%非常接近,表明开发的SSR标记技术在合油杂2号油菜杂交种子纯度室内快速检测中具有广阔的应用前景。

花生杂交F_1种子真伪的分子鉴定研究

杂交是花生新品种选育的重要环节。为选育抗病、特色的花生新品种,我们分别将抗黄曲霉的"GT-C20"与感黄曲霉的"Tifrunner"进行正反杂交、抗青枯病的"J04"和感青枯病的"J62"进行正反杂交、"潍花10号"与黑种皮花生品种"豫花29"进行杂交、大花生品种"丰花1号"与野生资源"SAAS2015ID"进行杂交。本试验利用MITE转座子和SSR标记对各杂交组合的F_1代杂交种进行真伪性检测。根据分子标记检测结果,从254粒杂交F_1中共鉴定出96粒真杂交种,真杂种率为37.79%。本研究证明分子标记可有效地对花生杂交后代进行真实性鉴定。在播种前进行真杂种的鉴定可为后续材料的种植节约时间和成本,为遗传群体构建、新品种选育等奠定基础。

应用SSR分子标记技术鉴定张氏红山茶杂交F1代真实性的研究

张氏红山茶Camellia changii是新兴的山茶属珍稀种质资源,在茶花杂交育种方面具有极高的科研价值。为建立鉴定张氏红山茶杂交后代的方法,本研究采用SSR标记技术,对以张氏红山茶为亲本的杂交后代以及所有杂交组合的亲本进行了分子鉴定。研究结果显示:张氏红山茶和博白大果油茶杂交后代仅有母本特征带,推测其有可能是自交种;张氏红山茶和超级南天武士的杂交后代出现了父母本均没有的条带,显示可能有外来血缘;其余组合杂交F1代均包含了父母本的特征带,从而表明杂交是成功的。从本研究结果看,应用SSR分子标记技术,可以方便地对杂交后代的真实性进行鉴定。

文心兰杂交后代的EST-SSR和SRAP分子标记鉴定

【目的】采用EST-SSR和SRAP分子标记技术,对文心兰杂交后代株系进行鉴定,以期为文心兰杂种后代的真实性鉴定提供方法。【方法】以文心兰黄金午后、百万金币及其46个杂交后代株系为试验材料,从21对文心兰EST-SSR引物和176对SRAP引物组合中筛选出具有父本特征带且带型清晰稳定的有效引物,利用筛选出的有效引物对供试材料进行扩增,根据扩增结果进行文心兰杂交后代真实性鉴定、聚类分析及遗传相似系数分析。【结果】共筛选出6对EST-SSR引物和10对SRAP引物组合用于文心兰杂交后代真实性鉴定,供试的46个杂交后代株系均鉴定为真杂种;6对EST-SSR引物共扩增到34个多态性条带,多态性比例为87.18%,10对SRAP引物组合共扩增到81个多态性条带,多态性比例为81.82%;从聚类结果可以看出,供试的杂交后代株系与母本的亲缘关系较近;遗传相似系数分析发现,杂交后代与母本间的平均遗传相似系数大于父本,说明供试的杂交后代在遗传上更偏向母本,与聚类结果相吻合。【结论】EST-SSR和SRAP分子标记技术均可有效应用于文心兰杂交后代真实性鉴定研究。

本山茶与勐库茶疑似杂交后代的RAPD鉴定

应用随机扩增多态性DNA(RAPD)分子标记技术,对云南临沧白莺山的8个茶树植株进行了亲缘关系鉴定。筛选出的19个RAPD引物在疑似双亲本山茶和勐库茶中,分别能扩增出28和20条各自的特异条带。通过特异条带在疑似杂交后代的表现数量、表现率及聚类树状图两方面的分析,可能的推测是:黑条子茶、二嘎子茶可能是本山茶在长时间的历史过程中发生较大变异的产物;白芽子茶、黑条子茶和二嘎子茶可能是本山茶与勐库茶自然杂交获得的F1代后又经混交,经数代繁衍后形成的产物。

30个玉米杂交组合主要农艺性状鉴定与综合评价研究

以30个玉米杂交组合为材料,在方差分析、相关分析与通径分析的基础上,采用主成分分析和隶属函数分析等方法对30个杂交组合的产量、株高、穗位、籽粒含水量等指标进行了综合分析。通过主成分分析,将7个单独的指标转换为相互独立的4个综合指标后,4个综合指标的累积贡献率为86.96%。结合隶属函数确定材料综合性评价D值,根据D值进行聚类分析,可将30个杂交组合划分为三类,第一类为综合性指数优秀的组合,共有16Rb26、16Rbl9等12个,第二类为综合性指数一般的组合,包括16Rb1、16Rb4等10个,第三类为综合性指数较差的杂交组合,包括16Rb3、16Rbl1等8个。这一分析方法使杂交组合的评价更加直观、简化,为开展杂交组合的综合评价奠定了一定基础。

SRAP标记在秋石斛杂交后代鉴定中的应用

基于序列相关扩增多态性(SRAP)分子标记对秋石斛四面佛与水芙蓉的杂交后代进行鉴定,并进行遗传多样性和聚类分析。结果显示,共筛选出5对SRAP引物组合用于杂交后代真实性的鉴定,供试17个杂交后代新株系均鉴定为真杂种;5对SRAP引物组合共扩增到23个多态性条带,多态性比例为88.46%。从聚类结果可以看出,绝大多数杂交后代在亲缘关系上先倾向于母本后倾向于父本;遗传相似系数分析结果表明,杂交后代与母本间的遗传相似系数大于父本,说明供试杂交后代在遗传上更偏向于母本,与聚类结果吻合。由研究结果可以看出,所筛选的5对SRAP引物组合用于秋石斛杂交后代鉴定是可行的。

谷子单籽粒醇溶蛋白提取方法的建立及其在杂交种纯度鉴定中的应用

谷子[Setaria italica (L.) P.Beauv]是起源于中国的一种古老作物,营养价值高,富含人体所需的多种维生素、氨基酸和矿物质,具有抗旱、耐瘠薄、抗逆性强的特点,尤其适合在北方干旱和半干旱地区种植。杂种优势利用已经成为提高作物产量的有效途径,在谷子杂交种应用方面已经获得了一定突破。谷子杂交种是由不育系母本和恢复系父本配组育成的两系杂交种,且母本具有5%左右的自交结实率,因此在制种过程中不可避免地会导致杂交种中混杂一定的不育系自交种。此外,由于授粉时杂株花粉的污染、收获时的机械混杂以及收获后的处理程序等原因,也会导致杂交种中混有恢复系和其他假杂交种,从而严重影响谷子杂交种的纯度。这些假杂种或者几乎没有产量,或者产量明显低于真杂交种,它们的存在必然导致杂交种增产潜力得不到充分发挥。因此,如何有效地鉴定谷子杂交种的纯度,成为保证杂交种增产效果的重要一环。

葡萄F1代杂交种的SRAP分子标记鉴定

葡萄在遗传上高度杂合,从分子水平上对葡萄杂交后代的真伪性进行早期、快速鉴定,旨在为加速葡萄种质创制提供辅助手段。采用SRAP分子标记技术对3对葡萄杂交组合红提×红玫瑰、红提×贝达和红提×贵妃的8个F1代实生苗进行了杂种真实性鉴定。从196对SRAP-PCR引物中筛选出10对可以在红提与贝达间产生清晰、稳定的多态性条带的引物,其中有4对引物能够区别红提与红玫瑰,有4对引物能够区别红提与贵妃;各选取3对引物分别对3对杂交组合的F1代实生苗进行鉴定。结果表明:8个F1代实生苗均为真杂种。该研究为利用SRAP标记技术有效、快速鉴定葡萄杂种后代提供依据。

利用RAPD方法鉴定西瓜杂种纯度的研究

以不同西瓜杂交种及亲本自交系为材料,研究利用RAPD技术鉴定西瓜杂种的纯度及种质.结果表明:在反应条件适合、引物选择正确的情况下,RAPD技术完全适合于西瓜杂交种纯度的早期鉴定及种质鉴定.同时发现,引物OPD16及OPA07适合种内鉴定,而引物OPA10、OPA13、OPH18可用于杂种纯度鉴定.同时,对利用同工酶技术和RAPD技术在进行西瓜杂交种鉴定过程中的优缺点进行了分析与讨论.

蒺藜苜蓿SSR反应体系优化及在一年生苜蓿种质鉴定中的应用

利用正交设计和完全随机试验优化蒺藜苜蓿(Medicago truncatula Gaertn)SSR标记的PCR反应体系。结果表明,适合于一年生苜蓿(Medicago L.)遗传分析的SSR技术体系为:10μL反应体系中TaqDNA聚合酶为1U,dNTP浓度为0.20mmol/L,Mg2+浓度为2.0mmol/L,引物浓度为1.5umol/L,模板DNA用量为20ng/uL;利用该反应体系将2个蒺藜苜蓿亲本和杂交种有效鉴别;利用SSR标记对19个一年生苜蓿种质进行SSR-PCR扩增,用8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,不同种质间DNA谱带多态性丰富,通过UPGMA方法聚类分析可以明确区分19个一年生苜蓿种质。

‘湘农大棉1号’的SSR数字指纹图谱构建及纯度鉴定

为了快速而准确地鉴定杂交棉种子的纯度和真伪,根据亲本材料来源和被推荐使用的SSR核心引物,挑选了33对引物对‘湘农大棉1号’及其亲本进行多态性筛选。结果表明,其中8对SSR引物在父母本及其杂交种扩增出清晰、稳定的多态性条带,且这些位点在F1中均表现为共显性标记。获得的共显性标记都能用于该杂交种的纯度鉴定,可以用来区别其中混杂的母本、父本及其他种子。将这8对引物在3个材料中扩增得到的01(二进制)数据转换成十进制数据,构建了‘湘农大棉1号’及其亲本的数字指纹图谱。采用多对引物构建的杂交棉数字指纹图谱,能为杂交种的真伪鉴定、纯度检测及亲本提纯等工作提供更加准确的技术指导。