杂色蛤仔提取物对小鼠免疫功能的影响

初步探讨了杂色蛤提取物对小鼠免疫功能的影响。结果表明:灌服不同浓度蛤仔提取物,可明显增加小鼠脾脏重量(P<0.01);提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数(P<0.01);明显抑制小鼠胸腺重量(P<0.05)及由SRBC所致的迟发型超敏反应(P<0.05);对小鼠外周血清溶血素的生成无显著影响(P<0.05)。提示杂色蛤提取物对免疫系统不同环节,作用不同。

温度对杂色蛤子仔贝生长发育的影响

通过实验研究了杂色蛤子仔贝的生长和水温的关系.结果表明:仔贝除9℃水温以外,其它所有实验水温都能正常发育,水温和生长速度呈直线关系,其回归式为R_G=0.368t-2.89;仔贝生长的生物学零度经计算为7.8℃.

pH胁迫对菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)耗氧率、排氨率、免疫和抗氧化酶活性以及组织形态的影响

随着人类工业迅速发展,CO_(2)大量排放,引起了海洋的酸化效应,不仅导致了全球气候变暖,也严重危害了海洋生物的生态健康。以菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)为研究对象,研究pH变化对菲律宾蛤仔耗氧率、排氨率、鳃组织结构以及鳃和内脏团的免疫、抗氧化酶活性的影响。将菲律宾蛤仔置于酸化海水(pH 6.4、7.1和7.7)中,以自然海水(pH 8.1)为对照。结果表明:耗氧率和排氨率随着pH的升高或降低而降低,在pH=8时达到最大值;6.4酸化组蛤仔鳃组织结构损伤严重,鳃丝间距扩大,纤毛黏合;鳃组织碱性磷酸酶(AKP)第42天所有酸化组活性显著高于对照组(P<0.05),所有酸化组溶菌酶(LZM)和酸性磷酸酶(ACP)活性显著低于对照组(P<0.05),7.7酸化组超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和总抗氧化能力(T-AOC)显著高于对照组(P<0.05),所有酸化组丙二醛(MDA)含量显著低于对照组(P<0.05);内脏团7.1和7.7酸化组LZM活性显著高于对照组(P<0.05),所有酸化组T-AOC和SOD活性显著高于对照组(P<0.05),7.1和7.7酸化组MDA含量显著低于对照组(P<0.05)。酸化致使菲律宾蛤仔耗氧率和排氨率降低,减缓其生理活动,降低鳃组织的免疫和抗氧化酶活性,打破蛤仔原有的代谢水平,会增加蛤仔患病的可能性。

菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)金属硫蛋白基因克隆及Cd^(2+)胁迫下的表达分析

金属硫蛋白(Metallothionein,MT)是一类富含半胱氨酸的小分子蛋白质,参与机体重金属解毒和金属元素代谢等生理过程。本研究采用RACE技术,克隆获得了菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)金属硫蛋白(RpMT)的全长cDNA序列。RpMT的cDNA全长为570bp,编码75个氨基酸,包含15个MT所特有的Cys-Xn-Cys结构。采用实时荧光定量PCR技术,分析了两种壳色菲律宾蛤仔(白蛤和斑马蛤)RpMT基因在Cd2+暴露后的表达变化。结果发现:Cd2+急性和亚慢性暴露均可导致两种壳色蛤仔消化腺和鳃组织RpMT基因表达量的显著上调;暴露后两种壳色蛤仔鳃组织RpMT基因表达量的增加幅度均高于消化腺组织,且以白蛤鳃组织基因表达水平的上调幅度较高。上述结果表明,RpMT可能在菲律宾蛤仔抵御Cd2+胁迫过程中发挥了重要作用。

冻煮杂色蛤仔肉的加工技术

杂色蛤仔，俗称花蛤（我国北方称砂蚬子或砂蛤）。其贝壳较厚，呈长卵圆形，壳长5-6厘米，左右两壳相等。贝壳表面棕色或黄褐色，并具有深浅交替的褐色或赤褐色放射状彩纹，从壳顶至腹面常有淡色的色带2—3条。杂色蛤仔是浅海中生长的一种双壳贝类，主要分布在我国南北沿海，朝鲜、日本也有分布。近几年在辽宁、

杂色蛤仔滩涂高产养殖新技术

蛤仔，是我国主要的海产经济贝类之一。它与缢蛏、牡蛎和泥蚶被称为我国传统的“四大养殖贝类”。蛤仔广泛分布于我国南北沿海，由于其具有生长快、移动性差、适应力强、生产周期短、养殖方法简便，并且有投资少、收益大等特点，是一种很有发展前途的滩涂养殖贝类。同时，还可利用虾塘设施与对虾混养、轮养，也是一种不错的养殖模式。近年来蛤仔土池育苗获得成功，我国的蛤仔养殖得到迅猛发展。如浙江省宁海地区2010年的蛤仔养殖面积达1万余亩，总产鲜蛤1万吨。

不同形态金藻对菲律宾蛤仔幼虫生长发育的影响

为了评估不同形态的球等鞭金藻(Isochrysis galbana)对菲律宾蛤(Ruditapes philippinarum)仔幼虫生长发育的效果,本研究选择人工培养的球等鞭金藻3011、金藻粉和金藻泥作为饵料,投喂菲律宾蛤仔D形幼虫,测定了幼虫的密度、相对生长率以及淀粉酶(AMY)、丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)和胰岛素样生长因子(IGF)的基因表达水平。结果显示,投喂活体球等鞭金藻的菲律宾蛤仔幼虫在生长速度和存活率方面均优于投喂金藻粉和金藻泥的幼虫,表明干燥处理和浓缩冷冻会影响金藻的营养价值;投喂藻泥的蛤仔幼虫存活率高于藻粉组,但生长率低于藻粉组;饥饿的蛤仔幼虫生长速度、存活率、淀粉酶和生长发育相关基因的表达均处于较低水平。本研究表明,合适的饵料供给对菲律宾蛤仔幼虫的生长发育至关重要,金藻粉和金藻泥还不能完全替代活体金藻,在生产中可以作为添加剂部分替代活体金藻。本研究可为菲律宾蛤仔幼虫营养需求和工厂化人工育苗技术研究提供参考。

杂色蛤仔的繁殖习性与胚胎发育

杂色蛤仔Venerupis Variegata.Sowerby)俗称花蛤、砂蚬仔，属于瓣鳃纲Lamallibranchia真瓣鳃目Eulamellibranchia异齿亚目Heierodonta帘蛤科Voneridae蛤仔属Genus Venerupis广布南北海区，是一种主要养殖贝类。

两种蛤仔线粒体16S rRNA基因和COⅠ基因的序列比较

对菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)和杂色蛤仔(Ruditapes variegata)的线粒体16S rRNA基因和COⅠ基因序列进行了分析。结果表明,16S序列共有117个变异位点,COⅠ序列共有160个变异位点,COⅠ基因编码的219个氨基酸序列中有29个不同。根据16S序列和COⅠ基因编码的氨基酸序列进行聚类分析,两种蛤仔与硬壳蛤(Mercenaria mercenaria)之间的聚类结果并不一致,有必要对缀锦蛤亚科更多的相近种进行序列分析。

氨氮对菲律宾蛤仔免疫力的影响

通过氨氮对菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)的急性毒性实验,发现氨氮质量浓度对数与死亡概率单位之间的相关性方程为y=1.827 1x+0.651 9,R2=0.971 9,据此方程计算出,氨氮对菲律宾蛤仔的24 h半致死浓度为239.88 mg/L,24 h内引起5%个体死亡的氨氮质量浓度为13.49 mg/L。通过氨氮对菲律宾蛤仔血细胞数量和血淋巴溶菌活力的影响实验,发现在各取样时间下,菲律宾蛤仔血细胞数量随着氨氮质量浓度的增加而降低,且差异显著(F﹥F0.05);随着时间的延长,各个处理组中菲律宾蛤仔的血细胞数量表现出相同的变化趋势,即在受到氨氮胁迫后6 h时达到最低值,之后有所升高,但第12小时与第24小时菲律宾蛤仔血细胞数量无显著差异(F﹤F0.05)。氨氮对菲律宾蛤仔血淋巴溶菌活力影响显著(F﹥F0.05),各取样时间下,随着氨氮质量浓度的升高,其血淋巴溶菌活力逐渐降低;第6小时,各氨氮质量浓度下的溶菌活力均达到最低值,同一氨氮浓度下第6,12,24小时时的溶菌活力无显著差异(F﹤F0.05)。

两种蛤仔群体遗传多样性的形态参数及AFLP分析

采用多变量形态度量学方法,对大连(DL)、青岛(QD)、厦门(XM)、珠海(ZH)4个菲律宾蛤仔群体和湛江(RV)1个杂色蛤仔群体的形态变异进行了比较研究,建立了群体形态聚类图和形态判别函数,结果较客观地显示了4个菲律宾蛤仔群体之间以及与杂色蛤仔群体之间的差异。利用4对引物组合对菲律宾蛤仔青岛群体与杂色蛤仔湛江群体共48个个体进行了AFLP分析,共得到216个位点,其中特有位点29个,可作为2个物种鉴别的分子标记。两种蛤仔都显示了较高的群体遗传多样性,菲律宾蛤仔群体内遗传相似度为0.6051,杂色蛤仔为0.6882,群体间的平均遗传相似度只有0.2968。群体内香农多样性指数菲律宾蛤仔为0.2526,略高于杂色蛤仔的0.2154。对所有个体聚类分析,同种个体可以很好地聚在一起,没有出现种间的交叉,表明两种蛤仔具有明显的遗传差异。

蒽、菲、芘、(艹屈)混合液对菲律宾蛤仔抗氧化酶活性的影响

以菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)为研究对象,在实验生态条件下采用不同浓度的蒽(Fluoranthene)、菲(Phenaphthene)、芘(Pyrene)、(Chrysene)混合液进行染毒实验,研究菲律宾蛤仔体内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)和谷胱苷肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPx)的剂量-效应关系和时间-效应关系。实验的3种混合液浓度为5μg/L(低浓度组),50μg/L(中浓度组),500μg/L(高浓度组)。结果表明,在低浓度混合液下(5μg/L),CAT比SOD和GPx更快受到诱导;4种多环芳烃混合污染物对SOD、CAT和GPx活性的影响均为先诱导后抑制的变化过程。

菲律宾蛤仔不同地理群体生化遗传结构与变异的研究

采用聚丙稀酰胺凝胶电泳技术对福建平潭岛、浙江象山港、江苏海州湾和辽宁辽东湾4个海区菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)野生群体的生化遗传特征进行了分析。结果表明,菲律宾蛤仔4个群体的多态位点比例为62.5%～75.0%,平均杂合度观测值在0.2743～0.3387之间,与平均杂合度期望值相近;平均有效等位基因数在1.4891～1.6325之间,遗传变异水平较高;杂合子缺失不显著。比较群体间的遗传分化指数和群体每代迁移数发现,平潭岛、象山港和海州湾3个群体间的遗传分化不显著,而辽东湾群体与3个群体间出现遗传差异。聚类分析同样表明,平潭岛群体首先与象山港群体聚类,再与海州湾群体相聚,最后与辽东湾群体相汇。讨论了杂合子缺失不显著原因和群体间遗传分化机制。

盐度对菲律宾蛤仔摄食率和清滤率的影响

实验室条件下，对15、20、25、30和35五个盐度梯度下菲律宾蛤仔（Ruditapes philippinarum）的摄食率R1和清滤率Rc进行了测定。结果表明，在15～25的盐度条件下，蛤仔的摄食率RI和清滤率Rc随着盐度的升高而增大，在25时达到最大值，而在25～35盐度条件下，随盐度的增加而减小。

菲律宾蛤仔性腺发育生物学零度的研究

分别于2004年、2005年,对取自大连、福建自然海区的菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)进行室内人工控温促熟直至自然排放精、卵,观察并记录日平均水温及精、卵排放时间,根据积温公式K=H(T-t)拟合升温曲线,计算得出大连、福建菲律宾蛤仔性腺发育的生物学零度分别为6.774,10.990℃;此外,定期取样,常规组织学切片观察,以人工促熟条件下有50%个体性腺发育进入增殖期时的水温做为生物学零度对计算结果进行验证。结果表明,人工促熟条件下大连、福建菲律宾蛤仔有50%个体性腺发育进入增殖期时的日平均水温分别为7.0,10.1℃,通过组织学研究方法证明了计算结果的准确性。研究还表明南北方不同海区菲律宾蛤仔性腺发育生物学零度是有差异的。