HPLC结合组分制备分析杆菌肽中的有关物质及有效组分含量

目的建立基于HPLC结合组分制备对杆菌肽中有关物质及有效组分含量测定的分析方法。方法采用Agilent HPLC,选择Diamonsil Plus C18色谱柱(4. 6 mm×250 mm,5μm),以50 mmol·L^(-1)甲酸铵溶液(p H经甲酸调至4. 0)为流动相A,乙腈为流动相B,流速为1 m L·min-1,线性梯度洗脱,检测波长为254 nm。经调整甲酸铵溶液的p H、流动相比例、溶剂等确定了分析方法,开展了专属性、线性、精密度、重复性、稳定性、耐用性等方法学研究。根据半制备液相色谱技术收集了杆菌肽A、B1/B2/B3、C1/C2/C3、F(采用《美国药典》40版中杆菌肽液相分析方法),并在甲酸铵-乙腈液相体系中进行定位及确认。结果建立了适用于杆菌肽有关物质的液相分析方法,方法学试验结果良好。已知组分与相邻杂质之间实现良好分离,特别是B1/B2的分离,明确了各组分的洗脱位置。对比了不同杆菌肽样品中各组分的含量,能够提供更加详细的样品信息。结论该液相分析方法可同时测定杆菌肽中的有关物质及有效组分含量,适用于该产品的质量控制。