吊干杏杏仁蛋白功能特性和结构特性

为提高吊干杏加工副产物的利用率,以吊干杏杏仁为原料,通过Osborne分级分离法和传统碱溶酸沉法分别提取清蛋白、球蛋白和分离蛋白,分析比较3种蛋白的氨基酸组成及功能和结构特性。结果表明,吊干杏杏仁中3种蛋白质的含量丰富,氨基酸配比合理,其中谷氨酸含量最高;在pH值为7的条件下,清蛋白溶解性[(50.00±0.87)%]、持油性[(16.06±0.22)g/g]均较好;pH值由3增加至9,3种蛋白的起泡能力呈现先降低后升高趋势。清蛋白和球蛋白泡沫稳定性变化趋势相似,与起泡性变化趋势相反。球蛋白的表面疏水性和游离巯基含量均显著高于清蛋白和分离蛋白(P<0.05);3种蛋白的二级结构均以β-转角和β-折叠为主。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明,3种蛋白亚基含量分布均较广,分子量在11~63 kDa,其中在21、22 kDa处的谱带最为强烈。

杏仁蛋白源ACE抑制肽的研究进展

研究发现杏仁副产品中蛋白质含量极为丰富,功能活性物质种类齐全,其中也包括ACE抑制肽。介绍了杏仁的营养成分,ACE抑制肽的降血压机理,阐述了杏仁ACE抑制肽制备方法与分离纯化方法,介绍了几种杏仁ACE抑制肽的结构鉴定方法和构效关系研究、分析检测方法,并对以后杏仁ACE抑制肽的研究给出展望。

谷氨酰胺转氨酶法交联苦杏仁蛋白水解物改善其胶凝性的工艺研究

本研究基于木瓜蛋白酶主要作用于赖氨酸和精氨酸等氨基酸、谷氨酰胺转氨酶催化蛋白质赖氨酸的ε-氨基和谷氨酸的γ-酰胺基结合的酶学特性,在利用木瓜蛋白酶催化苦杏仁蛋白限制性水解,使得更多赖氨酸残基暴露出来的基础上,利用谷氨酰胺转氨酶催化水解物的交联反应,从而改善苦杏仁蛋白的胶凝性,确定交联改性的最佳条件:谷氨酰胺转氨酶添加量16 U/g,交联温度38℃,pH值7.0,交联时间1.5 h,制得改性产物的胶凝性比改性前提高了209.43%,溶解性、持油性、乳化性也显著提高,起泡性、起泡稳定性略有提高,而持水性、乳化稳定性比改性前显著降低。改性产品的特性显著区别于天然苦杏仁蛋白,可为食品工业提供多样化的功能性蛋白。

苦杏仁蛋白的功能特性

采用稀盐溶液浸提及等电点盐析相结合的方法提取制备苦杏仁蛋白,研究pH值、NaCl浓度、蛋白质量浓度和温度等因素对苦杏仁蛋白功能特性(溶解性、持水性、吸油性、乳化性及乳化稳定性、起泡性及起泡稳定性)的影响。结果表明:在等电点pI附近时,苦杏仁蛋白的溶解性、持水性、乳化性及乳化稳定性、起泡性最差;在较低NaCl浓度范围内(0～0.8mol/L)提高NaCl浓度可促进蛋白溶解性、乳化性及乳化稳定性、起泡性及起泡稳定性的提高,而较高的NaCl浓度对蛋白功能特性提高具有抑制作用;当蛋白质量浓度达到一定水平时(3～4g/100mL),蛋白功能特性(乳化性及乳化稳定性、起泡性及起泡稳定性)提高趋于平缓;在适宜的温度范围内,提高温度可有效提高苦杏仁蛋白各项功能特性,但当温度继续上升,各项功能特性持续降低。

苦杏仁蛋白提取工艺优化及氨基酸分析

为了综合开发和利用苦杏仁资源,采用二次回归正交旋转组合设计,优化了碱溶酸沉法制备杏仁蛋白的工艺,并分析了其氨基酸组成。结果表明,杏仁蛋白等电点为pH4.0;杏仁蛋白的优化提取工艺参数为:pH10.0,提取温度45℃,料液比1∶13(m/V),提取时间30 min,连续提取2次,在此条件下杏仁蛋白提取率为87.58%,杏仁蛋白中粗蛋白质量分数为71.86%。苦杏仁蛋白的氨基酸组成种类齐全,必需氨基酸含量较高,是一类较优质的植物蛋白质资源,有待深度开发。

杏仁蛋白水解物对血管紧张素转化酶抑制作用的研究

分别采用Protamex、Alcalase、Neutrase、Flavourzyme、ProleatherFG-F、木瓜蛋白酶水解杏仁蛋白,利用高效液相色谱法测定水解物对血管紧张素转化酶(ACE)的抑制活性,以水解度(DH)和水解产物对ACE的抑制率为指标对酶解过程进行分析,并研究水解物的体外消化稳定性。结果表明,ProleatherFG-F和Alcalase对杏仁蛋白有较好的水解效果,其水解物对ACE抑制率较高,IC50分别为1.24mg/ml和0.98mg/ml。模拟胃肠消化实验结果表明,在消化酶的作用下杏仁蛋白水解物仍具有较强的ACE抑制活性。

甜杏仁蛋白的功能和结构的研究

溶解度测定表明,甜杏仁蛋白的等电点为4.5。对甜杏仁蛋白功能性质的测定表明,甜杏仁蛋白的吸水和吸油能力均优于大豆分离蛋白;当乳化温度由20℃上升至50℃时,其乳化能力逐渐上升,60℃后乳化能力逐渐下降,乳化稳定性在40℃后显著下降;其起泡性不如大豆分离蛋白,而泡沫稳定性与大豆分离蛋白相似。对甜杏仁蛋白的氨基酸组成分析表明,其氨基酸种类齐全,尤其谷氨酸含量丰富。组成分析结果表明,甜杏仁蛋白包含四种不同组分,其中77%左右为清蛋白,其余三种蛋白含量较低。

苦杏仁蛋白质功能特性的研究

目的研究苦杏仁蛋白加工特性,为其应用提供理论依据。方法采用单因素变量法测定p H值、温度、氯化钠浓度、蛋白质浓度等因素对杏仁蛋白加工特性的影响。结果在蛋白等电点附近时,杏仁蛋白的持水性、起泡性、乳化性及乳化稳定性均最差;在25~35℃范围内,提高温度可促进杏仁蛋白各项功能特性的提高,但超出55℃后,各项功能特性降低;低浓度的氯化钠可促进蛋白质起泡性及泡沫稳定性、乳化性及乳化稳定性的提高,高浓度氯化钠(0.8 mol/L)对蛋白功能特性提高具有抑制作用;蛋白质的起泡性及泡沫稳定性、乳化性及乳化稳定性随其浓度增加略有升高。结论 p H值、温度、氯化钠浓度、蛋白质浓度等因素对蛋白特性影响显著,在将杏仁蛋白应用于食品中时应考虑这些因素的影响。

杏仁蛋白Alcalase水解工艺及其体外抗氧化活性的研究

为深入开发利用杏仁蛋白资源,采用A lcalase蛋白酶水解杏仁蛋白,以水解度为指标对酶解过程进行研究,在单因素试验基础上以水解度和DPPH自由基清除率为指标进行酶解正交试验。结果表明制备抗氧化能力较强的杏仁蛋白水解物的最佳条件为:pH 8.0,温度55℃,酶底比4%,底物浓度5%。在此条件下进行水解试验,水解度为21.02%,水解物对DPPH自由基的清除率为66.13%。

杏仁蛋白质的研究进展

分别介绍了甜杏仁蛋白质和苦杏仁蛋白质的氨基酸组成、配比,并进行了简要的分析。对目前国内外提取杏仁蛋白的研究进展作了综述。

响应面法优化杏仁蛋白酶解工艺及其抗氧化活性研究

研究了杏仁蛋白的酶解工艺及其抗氧化活性。在单因素试验基础上,通过Box-Behnken中心组合设计优化酶解条件,确定出最佳酶解条件为pH 14.72、温度54℃、底物浓度2.8%、酶底比1.2%,在此最优条件下水解度(DH)为27.12%。杏仁蛋白酶解液对DPPH.自由基的清除能力最强,其次为O.2-自由基,最弱的为.OH自由基,清除率分别为85.92%、73.97%和65.92%.

Neutrase和N120P蛋白酶同步水解杏仁蛋白制备杏仁短肽工艺研究

采用Neutrase和N120P蛋白酶同步水解杏仁蛋白制备杏仁短肽,以短肽得率(TCA-NSI)及水解度(DH)为指标对制备工艺进行优化,并建立了回归模型。结合实际生产确定出了Neutrase和N120P蛋白酶水解杏仁蛋白的最适条件为:底物质量浓度0.04 g/mL,pH6.0,水解温度52.5℃,Neutrase与N120P复合酶比例2∶1,复合酶用量7 200 U/g,水解时间173.5 min。在此条件下,短肽得率为71.49%,水解度为26.20%。

杏仁蛋白酶解条件优化研究

采用二次回归正交旋转组合设计对杏仁蛋白的酶解工艺条件进行了优化,建立了水解度(Y)对水解温度(X1)、底物浓度(X2)、酶底比(X3)及水解时间(X4)四个实验因素的正交回归模型:Y=23.73865-3.16060X1-1.54037X2+2.07211X3+3.48164X4-3.31615X21-0.97209X22-0.40641X23-1.28322X24-0.21875X1X2+0.07125X1X3-0.26375X1X4-0.26375X2X3+0.07125X2X4-0.21875X3X4。从模型可知,当水解温度50℃时、底物浓度为2%、酶底比4%、水解时间为180min时,杏仁蛋白的水解度最大值达到27.22%,验证实验结果与模型值基本相符。

磷酸盐法提取杏仁蛋白的工艺研究

目的探讨以杏仁渣为原料提取杏仁蛋白的最优工艺条件。方法通过设计单因素实验和正交实验,将粉碎的杏仁渣加入磷酸盐溶液中水浴加热搅拌,离心,测定上清液的吸光度,计算提取率,确定提取工艺。结果采用磷酸盐法提取杏仁蛋白的工艺为,温度50℃、料液比1∶30,提取1.0 h,盐浓度为0.01 mol/L,蛋白质提取率为72%。结论采用磷酸盐法提取杏仁蛋白,对蛋白没有破坏,提取率较高,为其进一步开发奠定了基础。

响应面法优化超声波辅助提取苦杏仁渣中杏仁蛋白工艺

利用超声波辅助碱溶酸沉法研究了从甘肃产苦杏仁渣中提取杏仁蛋白质的工艺。在单因素实验的基础上,利用响应法优化了三个提取参数(提取时间、pH、温度)对蛋白提取率的影响。建立了杏仁蛋白提取率与因素变量的二次回归模型方程,该回归模型显著。响应面分析结果表明,最佳提取条件为:超声波辅助下温度48℃,提取时间1.2h,pH 11。在此条件下,蛋白质的提取率为79.74%±0.60%。

反胶束溶液萃取杏仁蛋白前萃工艺的研究

对AOT/异辛烷反胶束溶液萃取杏仁蛋白的前萃工艺进行了研究。试验以AOT/异辛烷为反胶束溶液体系,以蛋白质萃取率为指标,分别对溶液的pH值、W0值、萃取时间和萃取温度进行了单因素试验以及四因素三水平的正交试验,以确定杏仁蛋白前萃的最佳工艺。正交试验结果方差分析表明,在各因素中,W0值对蛋白质提取率影响达到显著水平,其他三因素未达到显著水平,确定的最佳工艺条件为:W0值为40,溶液pH值7.0,前萃温度25℃,前萃时间90 min。

新疆野生巴旦杏仁蛋白饮料生产工艺

研究野生巴旦杏仁中蛋白质的等电点及耐热特性，并认为野生巴旦杏仁蛋白饮料以仁与水比为1：15～20，浸泡温度20－25℃，浸泡时间22～26h，稳定剂组合：蔗糖酯2．5g，PGA3．5g，CMCNa1．1g，酪肪酸钠7．0g为其最佳生产工艺参数。

碱性蛋白酶Alcalase水解杏仁蛋白制备ACE抑制肽

采用Alcalase蛋白酶水解杏仁蛋白,以水解度(DH)及水解产物对血管紧张素转化酶(ACE)的抑制率为指标进行酶解工艺优化。结果表明,较大活性的ACE抑制肽的最佳水解条件为:pH值7.0,温度50℃,酶底比4%,底物质量分数为2%。该条件下经60min水解,其水解度为12.23%,得到ACE抑制肽的IC50值为0.85mg/mL。

均质对苦杏仁蛋白质溶解性的影响

本文研究了均质温度、均质压力两方面对苦杏仁蛋白溶解性的影响，试验结果表明：在均质压力相同的情况下。在20℃～60℃的范围内均质温度越高，蛋白质溶解度越高。在50℃条件下．均质压力越高。蛋白质的溶解度越高。

山杏仁蛋白酶水解物抑制炎症因子NO、TNF-α和IL-1β的产生

分别用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶制备山杏仁蛋白酶水解物,通过格里斯实验和ELISA方法,研究山杏仁蛋白酶水解物对巨噬细胞产生炎症因子NO、TNF-α和IL-1β的影响。结果表明山杏仁木瓜蛋白酶水解物显著抑制炎症因子NO、TNF-α和IL-1β产生,其抑制率分别为62%、11%和21%,而其它四种蛋白酶水解物没有显示明显的抗炎作用。将山杏仁木瓜蛋白酶水解物分离制备为5~10,3~5,1~3 k Da和小于1 k Da等不同分子量组分,进一步研究其抗炎活性,结果表明小于1 k Da低分子量组分具有较高抗炎活性,其对NO、TNF-α和IL-1β产生的抑制率分别为81%、59%和46%。分析氨基酸组成与含量结果表明,抗炎活性较强的小于1 k Da组分中,疏水性氨基酸和亲水性氨基酸含量均较高,同时谷氨酸、天冬氨酸和精氨酸等具有抗炎作用的氨基酸含量也较高。以上结果表明,山杏仁蛋白被木瓜蛋白酶水解后能够释放抗炎生物活性肽,该活性肽的分子量小于1 k Da,可能是具有两亲性的结构。