DNATyper^(TM)21与Verifiler^(TM)Plus试剂盒对常规案件检材检验的比较

本文通过比较DNATyper^(TM)21与Verifi ler^(TM)Plus两种STR检测试剂盒对各类案件检材的检验能力,探讨DNATyper^(TM)21试剂盒在常规案件检验中应用的可靠性。取0.03125、0.0625、0.125、0.25、0.5、1.0 ng/μL基因组标准品对两种试剂盒进行灵敏度测试;应用DNATyper^(TM)21与Verifi ler^(TM)Plus试剂盒分别对1056例常规案件检材DNA进行检验;对同一样本等位基因进行一致性比较。结果表明,两种试剂盒均可以成功检测出模板浓度在0.0625 ng/μL以上的标准DNA。在检验的1056例样本中,DNATyper^(TM)21试剂盒共检出881例,检出率为83.4%;Verifi ler^(TM)Plus试剂盒检出892例,检出率为84.5%。统计学结果表明两种试剂盒检出率无统计学差异,且同一样本相同基因座得到的等位基因分型一致。综上,DNATyper^(TM)21试剂盒对各类常规检材具有良好的检验能力,可应用于日常案件检验。

细胞分离检验技术在法医混合生物检材检验中的应用

混合生物检材检验中细胞分离检验技术具有一定的效果。常规细胞分离技术包含单细胞分离、细胞裂解、PCR扩增等,此次研究将细胞分离检验技术原理进行详细介绍,并且对其在法医检验中的前景进行展望。目前细胞分离、全基因组扩增以及二代测序技术综合后形成的技术为法医遗传学提供新思路,特别是微量混合生物检验,将技术手段提升。

电感耦合等离子体质谱法检测生物检材中的砷

本文建立了一种检测生物检材中砷元素的电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法。使用湿法消解对含有不同浓度砷元素的生物样品进行前处理,以元素锗(Ge)为内标,采用加标回收的方式考察了该方法的线性、检测限、定量限、回收率、精密度和基质效应,结果显示所有检材的线性相关系数(r)均大于0.999,日内和日间精密度均小于5%,回收率均大于90%,基质效应均在90%~115%范围内。该方法操作简单、有较高的准确度和灵敏度、成本消耗低,适用于生物检材中砷的快速检测。

依托咪酯检测方法研究进展

定性定量分析结果是依托咪酯新兴毒品犯罪案件能够准确定罪量刑的主要依据之一。对国内外依托咪酯检测技术进行综述,依托咪酯的原品检测方法主要来自于《中国药典》公布方法的更新迭代,生物检材中的依托咪酯检测方法研究集中于血液检测,尿液和毛发检测偏少。这些方法最大的缺点是单个样品检测周期长,无法实现大量样品的高通量的检测,或存在检测成本高昂、样品前处理程序复杂等弊端。结合当前司法实践中依托咪酯毒品违法犯罪案件高发态势,认为依托咪酯检测方法未来研究应重点关注掺杂物的影响、高通量的检测方法、代谢物和衍生物的检测等方面。

生物检材中乌头碱的GC/MS分析

目的 建立GC/MS-SIM检测生物检材中乌头碱的定性方法。方法 以MSTFA作为衍生化试剂,吡啶为溶剂,于60℃反应30min,综合质谱图及保留时间定性分析。结果 经该方法测得乌头碱最小检出量为20ng(S/N≥100)。结论 GC/MS-SIM法适用于药材及生物检材中乌头碱的定性分析。

疑难生物检材法医DNA检验的现状与进展

本文对法医DNA检验中遇到的降解生物检材、微量检材、混合生物检材三大类疑难检材的检验现状和研究进展进行了综述,分析了各种疑难检材的来源、处理方法和注意事项等,介绍了近年来在疑难检材的法医DNA检验中发展起来的一些新方法如利用线粒体检验系统、改变原有实验条件、低体积扩增等和一些新技术如全基因组扩增技术、激光捕获显微切割技术和mini-STR技术等。

生物检材中苯丙胺类兴奋剂和氯胺酮的LC-MS/MS分析

目的 建立生物检材中苯丙胺类兴奋剂和氯胺酮的液相色谱-串联质谱（LC-MS／MS）分析方法。方法 生物检材包括血液、尿液和毛发，采用稀释法和液液提取的前处理方法，应用两个不同的液相柱，优化LC-MS／MS分析方法，并考察了血液和尿液基质的离子抑制作用。结果 同时分析苯丙胺和MDA，液相1在3min内完成，液相2可用于确认分析或复杂基质分离。尿液稀释法检材用量少，前处理简便快速。毛发中苯丙胺类兴奋剂和氯胺酮的最低检测限（LOD）为0．005～0．05ng／mg。对送检案例检材产妇头发和胎毛进行苯丙胺类兴奋剂和氯胺酮的分析。结论 本方法可用于生物检材中苯丙胺类兴奋剂和氯胺酮的同时分析，血、尿等生物检材的离子抑制作用是影响本方法灵敏度的主要原因。

miniSTR基因座及其检测系统在降解检材中的法医学应用

目的建立16个miniSTR基因座的复合扩增体系,探讨其在法医学降解检材中的应用价值。方法采用六色荧光标记技术,对16个miniSTR基因座进行复合扩增体系的构建及法医学应用评估。结果开发出一个六色荧光标记的miniSTR扩增试剂盒,可同时对15个常染色体STR基因座、Amelogenin基因座和DYS391基因座进行分型检测,方法特异性好,分型结果稳定、准确,灵敏度达50 pg,实际案件中常见生物检材的检验结果良好。结论 16个miniSTR复合扩增体系对降解与微量检材的检测具有应用价值,灵敏度高,具有数据库兼容性,可以用于实际案件检验。

生物组织检材内异烟肼的薄层色谱扫描检测研究──附1例异烟肼中毒死亡者体内分布报告

改进血清中异烟肼的提取方法，建立了生物组织检材内异胭肼的提取和薄层色谱扫描检测方法，线性范围为2～32ug／ml或g，检出限为0．5ug／ml或g。l例异烟擀中毒死亡者体内异烟肼分布：肾31．6mg／100g、肝26．6mg／100g、脾22．1mg／100g、心21．3mg／100g、胃16．6mg／100g、脑15．5mg／100m、肺12．6mm／100g、小脑11．7mm／100g和10.5mm／100ml。

特殊载体上微量生物检材DNA检验2例

1案例资料 案例1 2003年2月8日,在浙江某地一公共厕所内发生一起抢劫杀人案.现场勘查中仅提取到一副近视眼镜,没有其他物证线索,而排查出来的嫌疑人均不承认是该眼镜的主人,也未到过现场.

扩增12S rRNA基因鉴定生物检材种属

目的建立一种能够在同一反应条件下鉴定多个具体物种,又满足简单、快速、特异、灵敏、准确等实用要求的种属鉴定方法。方法从GenBank中获取人、鸡、鸭、鹅、猪、兔、鼠、绵羊、水牛、狗、山羊等11个物种的12SrRNA基因序列,设计一对针对上述11个物种的通用引物和分别针对人、鸡和鸭的特异引物,同时扩增各物种12SrRNA基因。以通用引物扩增片段为内部对照,以特异引物扩增片段用于人、鸡和鸭的种属鉴定,并分别对人、鸡、鸭单一检材以及人和鸡、人和鸭、鸡和鸭等二元混合DNA进行鉴定。结果通用引物扩增,各物种均有400bp左右的扩增片段;特异引物只对各自目标种属有扩增产物,片段大小:人163bp、鸡286bp、鸭374bp;测序结果与GenBank既有序列比对,Identities分值:人100%、鸡99%、鸭100%;通用引物扩增人、鸡和鸭检材的灵敏度为2.5pg;特异引物扩增灵敏度人为2.5pg,鸡、鸭均为200pg;混合DNA中任一种DNA的含量只要高于检测灵敏度即可被准确检出,不受另一种DNA量的干扰;盲测结果准确。结论本方法可以利用同一种PCR反应条件鉴定多个物种的种属。

基于Cytb基因的动物检材种属鉴定在非传统领域的部分运用

传统意义上的种属鉴定主要用于法医学研究方面,然而随着科技的进步及社会发展的需要,种属鉴定在其他领域也有广泛的应用。主要以线粒体Cytb基因为切入点,简要介绍了线粒体DNA及Cytb基因的结构和特点,总结和归纳了基于Cytb基因进行种属鉴定的相关技术方法在打击动物走私、濒危物种保护、食品及动物产品或制品等的检验检疫方面的运用情况,并对存在的问题及发展趋势做一阐述。

检材采集与保存方式对DNA提取效率的影响

目的研究检材采集与保存方式对DNA提取效率的影响。方法使用生物检材采集与保存套管棉签、尖头棉签和普通医用棉签采集血样,分别放置于生物检材采集与保存套管或纸质物证袋中保存1周。剪取全部血样于96孔板中,用磁珠法结合自动化工作站提取DNA,以ABI7500型荧光定量PCR仪定量。结果生物检材采集与保存套管采集保存的血样所提取的DNA浓度平均为(2.54±0.63)ng/μL,而尖头棉签、普通医用棉签采集并分别用纸袋保存的血样提取的DNA浓度平均为(2.06±0.44)ng/μL和(0.93±0.59)ng/μL。结论生物检材采集与保存套管较之于尖头棉签或普通医用棉签采集、纸袋保存方式,其获得的DNA浓度显著提高,DNA提取率高。

生物检材中乌头类生物碱的检验

用薄层色谱 (TLC)、高效液相色谱 光电二极管阵列检测器 (HPLC/DAD)、动物实验等方法对生物检材中乌头生物碱进行检验 ,并对这些方法进行比较。结果发现 ,TLC法为此类药物检验筛选的首选方法 ,最小检出量为 0 3μg。在进行HPLC检测时 ,以乌头生物碱的特征紫外吸收光谱和动物实验结果为重要的定性手段 ,其特征吸收波长为 (2 2 8± 2 )nm和 (2 75± 2 )nm。乌头生物碱在 2mg/L～ 5 0mg/L时其色谱峰面积与质量浓度有很好的线性 ,相关系数为 0 9996。经实际案件证明 ,方法准确、灵敏 ,可用于生物检材中乌头类生物碱的检验。

生物检材中苯丙胺类兴奋剂的提取

苯丙胺类毒品是一类非法人工合成的有机胺类兴奋剂,种类较多,如何有效地从生物检材中分离出该类毒品,已是刑事科学技术研究的重要内容,本文综述了从尿液、血液、头发、唾液等生物检材中分离提取苯丙胺类毒品的常用8大类提取方法,比较分析了每一种提取方法的适用条件通过分析可知,对于液态或固态的生物检材,选择不同的提取方法,对后期仪器的线性范围、灵敏度、检测限都会产生影响,所以,在工作中针对不同的生物检材需要选择合适的提取方法,这样才能更有效地提取这类毒品。

高效液相色谱法测定生物检材中毒鼠强

建立了生物检材样品中微量毒鼠强的高效液相色谱法。生物检材样品经用乙酸乙酯提取,在优化的色谱条件下,以ZORBAX Eclipse XDB-C_8(4.6 mm×150 mm,5μm)为分离柱,乙腈-水(15+85,体积比)为流动相,在220 nm波长下进行检测;方法的线性范围为5～500μg·L^(-1),相关系数为0.999 9,方法的检出限(S/N=3)为0.5μg·kg^(-1),生物检材样品(包括血浆、胃内容物、肝、心)加标平均回收率在92.3～98.5%之间。相对标准偏差为2.67%～4.53%。