基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS技术的乔林与叶林杜仲叶次生代谢产物比较研究

本文应用超高效液相-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)技术,对乔林杜仲叶与叶林杜仲叶进行次生代谢产物分析,并比较其次生代谢产物差异。通过多级离子碎片信息结合mzCloud网络数据库、中药高分辨质谱数据库(OTCML),对照品比对及文献数据库进行准确定性。从乔林杜仲叶与叶林杜仲叶中共鉴定出次生代谢物62种,包括黄酮类9种,苯丙素类9种,环烯醚萜类2种,有机酸类21种,香豆素类5种,其他类成分16种,其中香豆素类成分为首次在杜仲叶中发现的成分。通过主成分分析(PCA)及正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对各样品数据进行处理,结果乔林杜仲叶与叶林杜仲叶能够很好地区分,根据变量重要性投影(VIP)值>1筛选出两种栽培方式的杜仲叶在相对含量上存在差异的成分有10个,其中独立样本t检验中存在显著差异(P<0.05)的成分有D-(-)-奎尼酸、柠檬酸、4-甲基伞形酮、4,5-二咖啡酰奎宁酸、3′,4′-二羟基苯丙酮。该方法可准确、高效地测定杜仲叶中的化学成分及其相对含量变化,为杜仲叶的品质评价提了供理论依据。

不同栽培模式对杜仲叶及枝皮中多种活性成分含量的影响

为了探寻不同栽培模式对杜仲叶及枝皮中多种活性成分含量的影响规律,以不同月份采集的吉首大学张家界校区校园内的杜仲矮林与乔林叶片与枝皮为试材,采用高效液相色谱法测定了其绿原酸、京尼平苷酸和松脂醇二葡萄糖苷的含量,采用硝酸铝-亚硝酸钠比色法测定了其总黄酮含量,还用对二甲氨基苯甲醛显色法测定了其桃叶珊瑚苷的含量。测定结果表明:7、9、10月采集的杜仲矮林叶中绿原酸的含量分别为2.416%、2.463%和2.934%,分别是同期采集的杜仲乔林的2.094、1.027和1.968倍;其总黄酮含量分别为1.224%、11.664%和14.564%,分别是杜仲乔林的0.159、0.759和1.146倍;其京尼平苷酸的含量分别为1.404%、1.012%和0.359%,分别是杜仲乔林的0.476、3.819和2.017倍;其桃叶珊瑚苷的含量分别为6.655%、6.543%和6.508%,分别是杜仲乔林的1.623、1.377和1.909倍。11月份采集的杜仲矮林枝皮中京尼平苷酸、桃叶珊瑚苷和松脂醇二葡萄糖苷的含量分别为6.711%、3.494%和0.467%,分别是杜仲乔林的1.035、2.024和1.052倍。测定结果还表明,杜仲矮林叶及枝皮中有多种活性成分的含量高于杜仲乔林,故矮林作业具有推广应用价值。