杜仲总黄酮对荷瘤小鼠的抗肿瘤作用

目的:研究杜仲总黄酮对荷瘤小鼠的抗肿瘤作用,并探讨其可能的机制。方法:采用H22荷瘤小鼠模型,给予杜仲总黄酮12d后,观察荷瘤小鼠肿瘤生长情况,测定抑瘤率;检测血清中SOD、MDA变化;病理切片观察瘤细胞生长及病理形态变化情况;免疫组化检测肿瘤组织中Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果:杜仲总黄酮对小鼠H22皮下移植瘤具有明显的抑制作用,小鼠成瘤时间普遍晚于空白对照组,肿瘤生长缓慢,低、中、高3个剂量组抑瘤率分别为35.90%、44.70%、47.60%;与空白对照组比较,杜仲总黄酮能提高小鼠SOD值,且具有一定的量效关系(P<0.05);病理切片显示杜仲总黄酮各组和环磷酰胺组坏死面积均比空白对照组大;免疫组化结果显示,小鼠经杜仲总黄酮作用后,肿瘤组织内Bcl-2蛋白的表达水平下降,Bax蛋白表达水平上升。结论:杜仲总黄酮具有很强的体内抗肿瘤作用,其作用机制可能与清除自由基和下调Bcl-2蛋白的表达水平、上调Bax蛋白的表达水平有关。

杜仲素与杜仲总黄酮连续提取分离研究

通过对 7种大孔树脂的研究 ,筛选出适宜于连续提取分离杜仲素和杜仲总黄酮的树脂为 LY- 7,其对绿原酸和桃叶珊瑚甙的最大吸附容量分别为 1 0 .0 6、6.79mg/g,吸附时间为1 8h,洗脱剂浓度为 2 0 % ;杜仲素和杜仲总黄酮的得率分别为 7.44%和 2 .80 % ;产品杜仲素中绿原酸的含量为 1 5 .5 1 % ,桃叶珊瑚甙的含量为 1 1 .2 4 % ,另一产品杜仲总黄酮中黄酮的含量为 2 2 .41 %。

淫羊藿总黄酮、杜仲总黄酮对维甲酸所致小鼠骨质疏松的实验研究

为研究淫羊藿总黄酮、杜仲总黄酮对实验性骨质疏松症小鼠骨代谢生化指标的影响,采用维甲酸灌胃造成小鼠实验性骨质疏松症模型,同时灌服高、中、低3种剂量的含有淫羊藿总黄酮、杜仲总黄酮的供试药,检测小鼠血清总碱性磷酸酶、血清羟脯胺酸/肌酐值等指标的变化.结果显示3个给供试药剂量组的血清总碱性磷酸酶含量与模型组相比均升高,而血清羟脯胺酸/肌酐值与模型组相比下降,高、中剂量有显著性差异.表明淫羊藿总黄酮、杜仲总黄酮对维甲酸所致小鼠骨质疏松症有一定的防治作用.

淫羊藿总黄酮联合杜仲总黄酮对维甲酸鼠骨代谢的影响

目的研究淫羊藿总黄酮、杜仲总黄酮对实验性骨质疏松小鼠骨代谢生化指标的影响。方法采用维甲酸灌胃造成小鼠实验性骨质疏松症模型,同时灌服高、中、低3种剂量的含有淫羊藿总黄酮、杜仲总黄酮的供试药,检测小鼠血清总碱性磷酸酶(AKP)、血清骨钙素(BGP)、血清游离钙(Ca2+)、血清羟脯胺酸/肌酐(HOP/Cr)的变化。结果与模型组相比,淫羊藿总黄酮、杜仲总黄酮可以使小鼠BGP、Ca2+、HOP/Cr的水平显著下降,同时可以使AKP升高。结论淫羊藿总黄酮、杜仲总黄酮对维甲酸所致小鼠骨质疏松症有一定的防治作用。

杜仲总黄酮对铅中毒小鼠学习记忆能力的影响

研究了杜仲总黄酮对铅中毒小鼠学习记忆障碍的改善作用,并探讨其可能的作用机制。建立铅中毒模型,用小鼠跳台实验检测小鼠学习记忆能力;检测脾脏和胸腺指数;生物化学法检测脑组织中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化氢酶(GSH-Px)、总体抗氧化酶(T-AOC)的活力和丙二醛(MDA)的含量。结果表明:杜仲总黄酮能改善铅中毒小鼠的学习记忆能力;提高铅中毒小鼠的脾脏和胸腺指数;提高脑组织中T-SOD、GSH-Px、T-AOC活力和降低MDA的含量。杜仲总黄酮对铅中毒小鼠学习记忆障碍有明显的改善作用,其作用机制可能与杜仲总黄酮能提高机体的免疫能力和抗氧化能力有关。

杜仲总黄酮对体外培养大鼠成骨细胞增殖的影响

目的通过观察杜仲总黄酮对新生大鼠颅盖骨体外培养成骨细胞增殖的影响,筛选杜仲防治骨质疏松的药效成分。方法乙醇分段法提取杜仲皮中总黄酮,以25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml浓度分别加入新生Wistar大鼠颅骨分离培养的成骨细胞中,用MTT法评价对成骨细胞增殖的影响。结果50、100μg/ml杜仲总黄酮剂量组的OD570吸光值明显增高,与对照组比较,差异显著(P<0.05)。结论杜仲总黄酮能直接促进体外成骨细胞的增殖。

杜仲总黄酮对人肺腺癌细胞H1299细胞增殖的影响

目的通过观察杜仲总黄酮对人肺腺癌细胞H1299细胞增殖的影响,筛选杜仲抗肿瘤的药效成分。方法乙醇分段法提取杜仲皮中总黄酮,以25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml浓度分别加入H1299细胞中,用MTT法检测H1299细胞的增殖情况。结果杜仲总黄酮为25μg、50μg、100μg、200μg/ml剂量组的OD490吸光值均降低,与对照组相比,有统计学意义(P<0.05)。结论杜仲总黄酮能直接抑制体外培养的人肺腺癌细胞H1299细胞增殖。

杜仲总黄酮对小儿血管瘤内皮细胞凋亡的影响

目的研究杜仲总黄酮对小儿血管瘤内皮细胞凋亡的影响。方法体外培养小儿血管瘤内皮细胞,实验分为空白组(正常培养小儿血管瘤内皮细胞);杜仲总黄酮高剂量组(50μg/mL杜仲总黄酮处理小儿血管瘤内皮细胞);杜仲总黄酮中剂量组(5μg/mL杜仲总黄酮处理小儿血管瘤内皮细胞);杜仲总黄酮低剂量组(0.5μg/mL杜仲总黄酮处理小儿血管瘤内皮细胞),继续培养72 h后,MTT法检测细胞活力;TUNEL法检测细胞凋亡;Western blot法检测小儿血管瘤内皮细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和caspase-9表达水平。结果与空白组相比,杜仲总黄酮中、高剂量组能够抑制小儿血管瘤内皮细胞增值,差异有统计学意义(P<0.05);杜仲总黄酮中、高剂量组细胞凋亡升高,差异有统计学意义(P<0.05);杜仲总黄酮高剂量组Bax蛋白表达上升,差异有高度统计学意义(P<0.01);杜仲总黄酮中、高剂量组caspase-9蛋白表达上升,差异有统计学意义(P<0.05);杜仲总黄酮低、中、高剂量组Bcl-2蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论杜仲总黄酮能够通过抑制Bcl-2蛋白表达、促进Bax和caspase-9蛋白表达,从而诱导小儿血管瘤内皮细胞发生凋亡,有望成为是一种有效的小儿血管瘤治疗剂。

杜仲总黄酮对H_2O_2诱导的IEC-6细胞氧化损伤的保护作用

目的:研究杜仲总黄酮对H2O2诱导IEC-6细胞氧化损伤的保护作用。方法:利用H2O2致IEC-6细胞氧化损伤模型,MTT法检测细胞存活率;采用微量酶标法测定乳酸脱氢酶(LDH)漏出量,观察细胞的损伤程度;硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量,WST-1法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:与H2O2处理组相比,杜仲总黄酮各剂量组能使细胞存活率明显升高(P<0.01),细胞培养液中LDH的漏出量减少,细胞内MDA含量降低,SOD活性明显升高(P<0.05)。结论:杜仲总黄酮对H2O2诱导的IEC-6细胞氧化损伤具有明显的保护作用。

杜仲总黄酮对小鼠急性肝损伤的保护作用

研究了杜仲总黄酮对四氯化碳(CCl_4)诱导的急性肝损伤的保护作用。通过腹腔注射CCl_4诱导小鼠急性肝损伤,检测小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的含量、肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)的活性、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的含量,考察杜仲总黄酮的保肝作用。结果表明:杜仲总黄酮能显著降低急性肝损伤小鼠血清中的ALT、AST活性与肝脏中的MDA含量,并能提高肝脏中的SOD与GSH活性。杜仲总黄酮对CCl_4引起的急性肝损伤小鼠具有保护作用,其作用机制可能与抗氧化作用有关。

杜仲总黄酮对去卵巢大鼠骨组织代谢的影响

目的探讨杜仲总黄酮(TFE)对去卵巢大鼠骨组织的影响。方法 6月龄SD大鼠摘除双侧卵巢制作雌激素缺乏导致的骨质疏松模型,50、100、200 mg·kg^(-1)·d^(-1)TFE持续灌胃12 w后处死大鼠;测量血清中Ⅰ型前胶原氨基端肽(PINP)和β-Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(β-CTXⅠ)浓度;取股骨测量骨密度和骨矿物质含量;取胫骨切片观察骨胶原的表达。结果与假手术组相比,模型组血清中PINP和β-CTXⅠ含量显著升高,股骨骨密度和骨矿物含量显著减少,骨胶原面积比显著下降(P<0.05)。与模型组相比,TFE中、高剂量组PINP浓度、骨密度、骨矿物含量和骨胶原面积比显著增加,而TFE中、高剂量组和雌二醇组β-CTXⅠ浓度显著下降(P<0.05);TFE的作用效果与剂量呈正相关(P<0.05)。结论 TFE可以升高去卵巢SD大鼠血清中PINP的浓度而降低β-CTXⅠ的浓度;抑制骨密度降低,减少骨矿物质和骨胶原的丢失,对骨组织具有保护作用。

杜仲总黄酮对铅中毒小鼠免疫器官抗氧化能力的影响

目的探讨杜仲总黄酮对铅中毒小鼠免疫器官抗氧化能力的影响。方法将50只雄性小鼠分为正常对照组、铅中毒组、阳性对照组及杜仲总黄酮治疗组(高、低剂量分别为200、50 mg/kg)。连续8 d腹腔注射70 mg/kg乙酸铅溶液,复制铅中毒小鼠模型。杜仲总黄酮治疗14 d后,摘眼球取血及脾脏和胸腺,测定血液、脾脏、胸腺中铅的含量,检测脾脏和胸腺指数及脾脏和胸腺中总超氧化物歧化酶(TSOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,总抗氧化能力(T-AOC)以及丙二醛(MDA)含量。结果连续8 d腹腔注射70 mg/kg乙酸铅溶液造成铅中毒小鼠免疫能力下降,杜仲总黄酮可明显提高铅中毒小鼠的免疫能力,主要表现为连续灌胃杜仲总黄酮14 d后,铅中毒小鼠脏器指数明显提高(P<0.01)。与铅中毒组相比,200mg/kg杜仲总黄酮治疗组铅中毒小鼠血液、脾脏和胸腺中铅的含量显著降低,脾脏和胸腺中SOD、GSH-Px活性及T-AOC提高,MDA含量降低(P<0.01);50 mg/kg杜仲总黄酮治疗组铅中毒小鼠血液、脾脏和胸腺中铅的含量降低不明显,但脾脏和胸腺中SOD、GSH-Px活性及T-AOC均有不同程度地提高,MDA含量降低。结论杜仲总黄酮可有效增强铅中毒小鼠免疫器官的抗氧化能力。

杜仲总黄酮对多囊卵巢综合征模型大鼠相关激素水平的干预作用

目的:探讨杜仲总黄酮对多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)模型大鼠的干预作用。方法:空白组除外,采用颈背部皮下注射脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone,DHEA)溶液0.2 mL(0.06 mg·g^-1)法建立PCOS大鼠模型。模型大鼠随机分为模型组,达英35组(0.3392 mg·kg^-1),杜仲总黄酮高剂量组、中剂量组、低剂量组(200、100、50 mg·kg^-1)。各组动物每天给药1次,连续给药21 d后取材,计算体质量、卵巢指数、子宫指数。酶联免疫吸附法测定各组大鼠血清中雌二醇(estradiol,E2)、睾酮(testosterone,T)、促性腺激素释放激素(gonadotrophin releasing hormone,GnRH),卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)、催乳素(prolactin,PRL)、促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、17α-羟孕酮(17α-hydroxyprogesterone,17α-OHP)、孕酮(progesterone,P)、胰岛素(insulin,INS)水平。结果:与模型组比较,杜仲总黄酮各剂量组可不同程度降低模型大鼠体质量、子宫及卵巢相关指数,降低模型动物血清中GnRH、LH、T、PRL、INS、17α-OHP水平,升高模型动物血清中FSH、E2、P水平(P<0.05或P<0.01)。杜仲总黄酮低剂量组可降低模型动物血清中INS水平,但与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:杜仲总黄酮可有效降低多囊卵巢综合征大鼠体质量、卵巢指数、子宫指数,降低模型动物血清中GnRH、LH、T、PRL、INS、17α-OHP水平,升高模型动物血清中FSH、E2、P水平。

基于PI3K/AKT/mTOR通路研究杜仲总黄酮对多囊卵巢综合征大鼠性激素水平及卵巢组织自噬的影响

目的:探讨杜仲总黄酮基于磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠性激素水平及卵巢组织自噬的影响。方法:55只SD大鼠随机取10只作为正常对照组,其余建立PCOS大鼠模型,40只大鼠建模成功,随机分为模型对照组、PI3K抑制剂BKM12040 mg/kg组、BKM12040 mg/kg+杜仲总黄酮200 mg/kg组、杜仲总黄酮200 mg/kg组,各组灌胃生理盐水或相应药物,连续干预3 w。Elisa法检测血清促黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、抗苗勒氏管激素(AMH)水平;HE染色观察卵巢病理学变化;流式细胞术检测卵巢组织颗粒细胞自噬率;Western blot检测卵巢组织中PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白及微管相关蛋白1轻链3 II(LC3 II)表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠AMH、LH、T含量显著升高,FSH含量显著降低P<0.01);大鼠卵巢组织颗粒细胞自噬率显著升高(P<0.01),p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR比值显著降低,LC3 II/LC3 I比值显著升高(P<0.01);与模型对照组比较,抑制剂组大鼠AMH、LH、T含量显著升高,FSH含量显著降低(P<0.01),卵巢组织颗粒细胞自噬率显著升高,p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR比值显著降低,LC3 II/LC3 I比值显著升高(P<0.01);杜仲总黄酮+抑制剂组、杜仲总黄酮组大鼠AMH、LH、T含量明显降低,FSH含量明显升高(P<0.05或P<0.01),卵巢组织颗粒细胞自噬率显著降低(P<0.01),p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR比值显著升高,LC3 II/LC3 I比值显著降低(P<0.01)。模型对照组卵巢表面苍白,黄体减少,出现多个囊状扩张卵泡;杜仲总黄酮+抑制剂组、杜仲总黄酮组卵巢体积减小,表面色泽较红,黄体有所增加,囊状扩张卵泡减少;抑制剂组卵巢体积更大、黄体更少,囊状扩张卵泡更多。结论:杜仲总黄酮可能通过激活PI3K/AKT/mTOR通路降低PCOS大鼠卵巢组织自噬水平,改善其性激素水平。