杜仲黄酮类化合物的研究进展

杜仲黄酮是杜仲中的重要活性成分,具有多种医疗功效。本文综述了近年来杜仲黄酮类化合物的提取分离、测定方法、化学成分、生理活性以及应用现状等方面的研究进展,并展望了其在医药、保健品、食品等方面的应用前景。

杜仲黄酮对小鼠淋巴细胞增殖及IL-2和IFN-γ诱生的影响

采用MTT法和ELISA技术,通过考察不同纯度的杜仲黄酮对小鼠脾淋巴细胞增殖及细胞因子IL-2和IFN-γ诱生作用的影响,初步探讨杜仲黄酮的免疫活性。结果表明,杜仲黄酮粗品及槲皮素均对经Con A或LPS刺激下的小鼠脾淋巴细胞的增殖和细胞因子IL-2与IFN-γ的分泌有协同作用;随细胞培养时间延长,与空白组比较作用效果也逐渐显著。多重显著性分析结果显示,在一定范围内,不同浓度的样品对脾淋巴细胞的增殖效果存在差异,并有一定的浓度依赖性。而山奈酚则随浓度的升高对淋巴细胞的增殖呈抑制趋势,同时对细胞因子的诱生起下调作用。

超声波辅助提取杜仲皮中的杜仲胶和杜仲黄酮

对超声波辅助提取杜仲皮中的杜仲胶和杜仲黄酮进行了研究.通过筛分和风选方式分选物料,分别提取胶和黄酮,使杜仲有效成分得到较大利用.研究超声频率、功率、提取时间和物料质量浓度对杜仲胶提取量的影响.结果表明,频率40 kHz时提取效果较好,提取量随功率、时间的增加和物料质量浓度的减少而提高.空气压缩机风速为4.9 m/s时,物料分选效果和1 mm筛选效果近似.通过前期分选,杜仲胶和杜仲黄酮没有损失.将杜仲粉碎后,粉末中杜仲胶的含量远小于絮状物中杜仲胶含量,并且先提取杜仲胶再提黄酮,更有利于杜仲胶和杜仲黄酮的利用.

杜仲黄酮与鸡软骨肽的相互作用对抗氧化活性及荧光特性的影响

本文对杜仲黄酮与鸡软骨多肽的相互作用进行研究,以为其在相关食品和保健食品中的应用提供一定的参考。通过DPPH·清除活性检测以及荧光光谱法,研究杜仲黄酮与鸡软骨肽相互作用后其抗氧化活性以及荧光特性的变化。5 mg/mL鸡软骨肽分别与9、12、15、18、21μg/mL杜仲黄酮相互作用后,其DPPH·清除活性均呈现出显著的协同增强效果;高温杀菌(121℃,20 min)及pH6.0的酸性体系有利于提高相互作用产物的DPPH·清除活性。杜仲黄酮对鸡软骨肽的内源荧光有明显的猝灭作用,且随黄酮浓度的增加,荧光猝灭效果越明显,同时荧光最大发射峰出现了明显的红移。说明,杜仲黄酮可与鸡软骨肽发生相互作用,使其抗氧化活性及荧光特性等发生了相应的改变。

杜仲黄酮类3种药物成分治疗大鼠骨质疏松的比较研究

目的研究杜仲黄酮类3种药物成分治疗大鼠骨质疏松的疗效。方法将51只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、雌激素组、槲皮素组、山奈酚组和芦丁组。假手术组与模型组给予羧甲基纤维素钠,雌激素组与3个药物组分别给予雌激素及对应药物。12 w后测定大鼠体重及子宫重量,并测定骨形成及代谢相关血液学、尿液指标,Micro-CT分析骨相关参数及骨小梁形态。结果相同药物浓度下,山奈酚、芦丁、槲皮素3种药物成分均可降低尿液中钙、磷的丢失,同时增强碱性磷酸酶的活性,其中山奈酚的作用优于芦丁和槲皮素。山奈酚、芦丁和槲皮素均可改善绝经后骨质疏松的骨微结构,增加骨密度,尤其是山奈酚,但均不能使骨小梁结构完全恢复。结论杜仲黄酮类3种药物成分中,山奈酚治疗大鼠骨质疏松的疗效最佳,芦丁次之,槲皮素最弱。

杜仲黄酮对糖尿病肾病小鼠Nrf2/HO-1氧化应激信号通路的影响

目的探讨杜仲黄酮对糖尿病肾病(DN)小鼠肾脏氧化应激及其Nrf2/HO-1信号通路的影响。方法 昆明种小鼠经静脉注射链脲佐菌素诱导糖尿病肾病模型,成功诱导的DN小鼠随机分组为模型对照组、缬沙坦对照组、杜仲黄酮低、高剂量组[80、160 mg/(kg·d)],并以健康昆明小鼠为正常对照。各组小鼠灌胃给药连续60 d,末次给药后收集小鼠血清和肾组织标本用于检测空腹血糖、肾功能指标、氧化应激相关指标和核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶1(HO-1)信号通路蛋白表达。结果与模型组比较,杜仲黄酮给药组空腹血糖有不同程度下降,肾功能指标也明显改善。此外,杜仲黄酮组肾脏组织中超氧化物歧化酶活性升高,而丙二醛下降,Nrf2和HO-1蛋白表达升高(P<0.05)。结论杜仲黄酮对糖尿病肾病小鼠具有降低空腹血糖和改善肾功能作用,其作用机制可能与其能通过调节Nrf2/HO-1信号通路,进而改善肾脏组织氧化应激状态有关。

杜仲黄酮对糖尿病小鼠胰腺线粒体功能的影响

目的:探讨杜仲黄酮对糖尿病小鼠胰腺线粒体功能的影响。方法:链脲佐菌素联合高脂高糖饮食共同诱导构建糖尿病小鼠模型。将40只糖尿病模型小鼠随机分为模型组、二甲双胍组和杜仲黄酮低、高剂量组,每组10只。另以10只健康昆明小鼠为空白对照组。末次给药2 h后检测各组空腹血糖(FBG)。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清胰岛素(FNS)、总抗氧化能力(T-AOC)含量,过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性,胰腺组织ATP酶、线粒体呼吸链ComplexI、ComplexIII活性及氧自由基(ROS)、ATP含量。Western blotting法检测胰腺组织中核呼吸因子1(NRF1)、线粒体融合蛋白1(Mfn1)蛋白表达量。结果:与模型组比较,杜仲黄酮高、低剂量组小鼠FBG水平显著下降,血清FNS、T-AOC含量及CAT、SOD活性增加(P<0.05或P<0.01);胰腺ATP含量增加,ROS含量减少,ATP酶、Complex I、ComplexⅢ活力增加(P<0.05或P<0.01);胰腺中NRF1、Mfn1蛋白表达增加(P<0.05或P<0.01)。结论:杜仲黄酮能改善胰腺组织线粒体功能,其作用机制可能为调节线粒体生物合成因子和融合因子的表达,提高胰腺的抗氧化能力及线粒体的呼吸功能,保障能量的供应,使胰岛素分泌增加,达到降血糖的作用。

杜仲黄酮对2型糖尿病小鼠胰腺凋亡因子的影响

目的探讨杜仲黄酮对2型糖尿病小鼠胰腺凋亡因子的影响。方法通过链脲佐菌素(STZ)和高脂高糖饮食诱导构建糖尿病小鼠模型。将糖尿病模型小鼠随机分为模型组、二甲双胍组、杜仲黄酮低、高剂量组。另以健康昆明小鼠为空白组。各组予相对应药物灌胃60 d,每日1次。空白对照组和模型组予等体积生理盐水灌胃。末次给药后,小鼠禁食不禁水12 h,测其空腹血糖(FBG)。取部分胰腺组织进行TUNEL染色,观察其细胞凋亡情况。ELISA法检测血清中空腹C-肽的含量以及胰腺中氧自由基(ROS)、炎症因子白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、跨膜蛋白Fas、跨膜蛋白配体Fasl的含量。Western blot检测胰腺中促进细胞凋亡因子Bax和抑制细胞凋亡因子Bcl-2表达。结果与模型组比较,杜仲黄酮组小鼠空腹血糖下降(P<0.05);胰腺组织病理形态改善,血清中C-肽含量升高(P<0.05);胰腺中ROS、IL-6、TNF-α、Fas、Fasl含量及Bax表达减少,Bcl-2表达增加(P<0.05)。结论杜仲黄酮能降低糖尿病小鼠血糖及抑制胰腺细胞凋亡,其作用机制可能与调节胰腺组织中相关凋亡因子表达,减少炎症因子含量有关。

蜂毒素联合杜仲黄酮外用治疗类风湿关节炎的实验研究

目的观察蜂毒素联合杜仲黄酮外用对于胶原诱导型(CIA)类风湿关节炎小鼠的影响,并观察杜仲黄酮能否有效抑制蜂毒素的溶血作用。方法 1动物实验:采用CIA法诱导40只类风湿关节炎的小鼠,将其随机分为PBS组、蜂毒素组、杜仲黄酮组和蜂毒素联合杜仲黄酮混合给药组,同时取5只未经过任何处理的小鼠组成空白对照组。蜂毒素组每日外用蜂毒素5μl/爪(含药浓度1μg/μl),杜仲黄酮组每日外用杜仲黄酮5μl/爪(含药浓度1μg/μl),混合给药组给药剂量相同(为蜂毒素与杜仲黄酮等比例混合制成,含药浓度为1μg/μl),PBS组每日给等量的PBS,空白对照组不给予任何治疗,连续给药15天观察小鼠的相关变化。2溶血实验:2%红细胞悬浊液中分别加入100μl的蜂毒素溶液,杜仲黄酮溶液,蜂毒素联合杜仲黄酮1∶1溶液,蜂毒素联合杜仲黄酮2∶1溶液,蜂毒素联合杜仲黄酮1∶2溶液,37℃水浴加热后过夜,肉眼及紫外分光光度计检测OD值。结果蜂毒素组、杜仲黄酮组和混合给药组均对类风湿关节炎CIA小鼠在大体观察、足垫厚度、足踝宽度、TNF-α、IL-1β、IL-2、GM-CSF及影像学方面与PBS组相比,均有好转,差异有统计学意义;蜂毒素联合杜仲黄酮组治疗效果好于两种药物单独外用;蜂毒素联合杜仲黄酮1∶1,1∶2溶液不产生红细胞溶血现象,蜂毒素组、蜂毒素联合杜仲黄酮2∶1溶液会使红细胞悬浊液产生溶血现象。结论蜂毒素、杜仲黄酮、蜂毒素联合杜仲黄酮外用对于类风湿关节炎CIA小鼠有治疗效果,其中联合用药效果更好;杜仲黄酮可以有效的抑制蜂毒素的溶血现象。

超声-微波协同提取杜仲树皮及树叶中的黄酮类化合物

为优化杜仲黄酮得率,通过脱胶预处理的杜仲树皮及杜仲树叶为材料,运用超声-微波协同提取方法(UMAE),由单因素实验及响应面法考察UMAE提取工艺条件,并利用HPLC结合标准品比对法比较了树皮与树叶黄酮类成分。结果显示:UMAE的最佳提取条件为乙醇浓度58%,液料比70∶1(m L∶g),温度75℃,微波功率420 W,时间6 min,此时粗黄酮得率为11.80%±0.09%。将超声-微波协同提取方法与单独微波或单独超声法进行比较,其黄酮得率及抗氧化能力(以清除DPPH自由基能力计)均显著高于单独法(p<0.001)。扫描电镜结果显示,超声波与微波协同作用时,植物细胞壁破碎更为彻底,利于黄酮溶出,因此UMAE提取黄酮的提取效率显著优于单独超声及单独微波的提取方法。通过比较树皮与树叶中黄酮成分的含量,发现杜仲树叶中芦丁、槲皮素、山奈酚含量明显高于树皮,说明杜仲树叶更适用于提取黄酮。