杜鹃芽枯病菌PCR及实时荧光PCR检测

根据GenBank中杜鹃芽枯病菌(Seifertia azaleae)及其相关种ITS序列设计特异引物SA1/SA2和探针SA-P,建立杜鹃芽枯病菌常规PCR和实时荧光PCR检测方法。引物SA1/SA2能扩增5株S. azaleae菌株DNA,得到351 bp的预期扩增产物,其他供试菌株均不能扩增出预期产物,检测灵敏度达60 pg菌体DNA。探针SA-P对5株S. azaleae均表现为阳性扩增,其他供试菌株均为阴性扩增,检测灵敏度可达60 fg菌体DNA,比常规PCR高1000倍。对杜鹃花苞样品和叶片样品的检测结果表明常规PCR和实时荧光PCR检测方法均可用于进境杜鹃种苗中杜鹃芽枯病菌的快速检测。