寒、热方剂对束缚水浸应激型胃溃疡寒、热证模型大鼠血清TXB_2、NT含量的影响

目的:探讨水浸应激型胃溃疡寒、热证模型的形成机制及寒、热方剂对该模型的作用机理及其方证相应的客观规律。方法:采用寒、热因素结合水浸应激法建立大鼠胃溃疡寒、热证模型,采用酶联免疫法检测受试大鼠血栓素B2(TXB2)和神经降压素(NT)的含量。结果:各模型组与空白组相比,TXB2含量均有不同程度的升高,且差异显著(P<0.01)。且水浸应激型胃溃疡寒、热证之病证结合模型较单证、单病模型TXB2含量明显升高。各模型组与空白组比较NT含量均明显降低,有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。但各模型组间比较无明显差异。大黄黄连泻心汤、理中丸可分别显著降低热模型组、寒模型组TXB2含量,升高NT含量(P<0.05或P<0.01)。结论:通过"方证相应"理论验证了"病证结合"胃溃疡寒、热证模型的可行性,大黄黄连泻心汤对热性胃溃疡、理中丸对寒性胃溃疡的治疗作用,可通过降低血清TXB2、升高血清NT的含量而实现。

长期慢性束缚水浸应激对大鼠胃窦Cajal间质细胞数量的影响

目的:研究不同时程低强度束缚水浸应激对大鼠Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)数量的影响,探讨慢性应激导致胃动力改变与ICC的相关性.方法:雄性SPF级SD大鼠48只被随机分为6组,即实验3d、7d、28d组和对照3d、7d、28d组,每组8只.实验组23℃水域箱内束缚水浸1h/d,对照组自由摄食饮水.4d、8d、29d晨序贯脱颈处死.取膜胃小弯侧(ICC-1)、腺胃小弯侧(ICC-3)、腺胃大弯侧上1/3处(ICC-5)、腺胃幽门旁0.5cm处(ICC-7)组织各一块放入固定液中,制成石蜡切片;抗c-kit免疫组织化学染色,观察不同层次ICC计数.结果:正常大鼠胃内ICC主要分布在肌内(ICC-MY)和肌间(ICC-IM),而黏膜下(ICC-SM)和深肌丛(ICC-DMP)较少.实验3d组的各层ICC数量与对照组相比无明显差异,实验7d和28d组大鼠不同部位、不同层次及同一部位不同层次ICC数量明显异于同期对照组.应激时间长短对不同部位不同层次及同一部位不同层次ICC总数有明显影响,其大致规律是先正常后增加再减少,即先升高后降低.应激主要引起ICC-MY及ICC-IM数量发生变化,而本来较少的ICC-SM和ICC-DMP受影响较轻.结论:长时间低强度的慢性束缚水浸应激可以使大鼠胃窦ICC数量发生变化.

不同时程束缚水浸应激对大鼠胃排空的影响

目的研究不同时程慢性束缚水浸应激对大鼠胃排空的影响。方法48只雄性150 g左右SD大鼠被随机分为6组,即实验3、72、8 d组和对照3、72、8 d组,每组8只。实验期间,每日观察大鼠体重、一般状况及行为学指标。实验组23℃水域箱内束缚水浸1 h/d,对照组自由摄食饮水。采用半固体排空实验(阿拉伯胶炭糊)来检测胃排空率,数据录入SPSS 13.0进行分析处理。结果①体重增加情况:不同组别和不同应激时间这两个因素对体重增加的影响差异均有显著性。②胃排空率:对照各组间比较均无统计学差异。3 d组间(实验3d组与对照3 d组)大鼠胃排空率无差异;而7 d组间和28 d组间比较则明显异常。随着应激时间的延长,实验组胃排空率呈现了先增高(7 d时)后降低(28 d)的变化趋势,且实验3 d组与7 d组、7 d组与28 d组间比较均有明显的统计学意义,而3 d组与28 d组比较则无统计学差异。结论不同时程的慢性束缚水浸应激可以导致大鼠胃排空率改变;随着应激时间的延长,呈现先上升后下降的规律。

不同时程慢性束缚水浸应激对大鼠胃窦Cajal间质细胞超微结构的影响

目的:研究不同时程慢性束缚水浸应激大鼠胃窦Cajal间质细胞(ICC)的超微结构改变.方法:♂SD大鼠48只随机分为6组,即实验3、7、28d组和对照3、7、28d组,每组8只.实验组每日束缚水浸1h,对照组自由摄食饮水;于实验第4、8、29天晨禁食12h后脱颈处死.取胃窦组织2块放入3%戊二醛中固定并电镜下观察ICC超微结构.结果:所有对照组ICC的超微结构均无异常改变,试验3、7、28d各组ICC的超微结构与同期对照组比较均有明显的损害,主要表现为ICC的缝隙连接减少、细胞器减少等,以肌内ICC(ICC-MY)和肌间ICC(ICC-IM)为主;随着应激时间的延长,ICC的超微结构受损逐渐加重.结论:慢性束缚水浸应激可以损伤大鼠胃窦ICC的超微结构.

寒、热方剂对水浸应激型胃溃疡寒、热证模型大鼠胃组织SOD活性、MDA含量的影响

目的:探讨水浸应激型胃溃疡寒、热证模型的自由基代谢机制及寒、热方剂对该模型的自由基代谢的影响,阐明其方证相应的客观规律。方法:采用寒因素(冰水,0.3mol/LNaOH液)、热因素(8%干辣椒粉的60%乙醇混悬液)分别结合水浸应激法,建立实验性大鼠胃溃疡寒、热证模型。采用黄嘌呤氧化酶法(羟氨法)、硫代巴比妥酸法检测胃组织中SOD活力及MDA含量。结果:SOD方面,水应激胃溃疡组、水应激胃溃疡寒证组、水应激胃溃疡热证组与空白比较活力下降,有显著性差异(P<0.01),但寒证与热证间比较无明显差异。MDA方面,水应激胃溃疡组、水应激胃溃疡热证组、单纯热证组与与空白比较含量明显升高,有显著性差异(P<0.01),且以水应激胃溃疡热证组升高最为显著。大黄黄连泻心汤、理中丸可选择性针对相应的寒性、热性模型体现出对自由基代谢的调节作用。结论:通过"方证相应"理论验证了"病证结合"胃溃疡寒、热证模型的可行性。水浸应激型胃溃疡寒、热证模型存在自由基代谢异常。MDA可作为水浸应激型胃溃疡热证的微观指征。

应激对反流性食管炎模型大鼠免疫功能的影响

目的:观察应激对反流性食管炎(RE)模型大鼠食管黏膜免疫功能的影响,探讨应激对RE的作用及可能机制。方法:健康雄性Wistar大鼠,随机分为对照组、应激组、模型组、应激模型组,每组15只。采用改良部分贲门肌切开术加外置幽门部分结扎术制备大鼠RE模型。造模后7 d,应激组和应激模型组采用束缚水浸方法行应激实验。实验结束后,观察各组食管下段黏膜病理改变,并检测单位面积内肥大细胞(MC)数量、脱颗粒率及黏膜SIg A、血清Ig A水平。结果:与对照组比较,模型组大鼠食管下段黏膜肉眼观察及病理表现积分均增加,MC数量[(14.25±1.26)个]及脱颗粒率[(31.07±7.53)%]均升高,黏膜SIg A[(44.86±8.13)mg/L]、血清Ig A[(13.64±4.19)×10-2g/L]水平均下降(P<0.01);与模型组相比,应激模型组食管下段黏膜肉眼观察及病理表现积分升高(P<0.05),MC数量[(24.91±1.93)个]及脱颗粒率[(48.60±5.22)%]升高,黏膜SIg A[(31.61±7.29]mg/L)、血清Ig A[(5.73±4.04)×10-2g/L]水平下降(P<0.01)。结论:应激加重RE模型大鼠食管黏膜损伤,其机制可能包括影响机体免疫功能。

砂仁复方制剂对水浸应激致胃肠动力障碍的改善作用研究

目的考察砂仁复方制剂对胃肠动力障碍的改善作用并初步探究其作用机制。方法将SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性药组、砂仁复方制剂高、中、低剂量组。除正常组外,其他组采用慢性束缚水浸应激法复制大鼠胃肠动力障碍模型,以多潘利酮为阳性对照,观察砂仁复方制剂对大鼠胃肠动力障碍的影响:测定大鼠胃排空率及小肠推进率,ELISA法检测血浆胃泌素(Gastrin,GAS)、胃动素(Motilin,MTL)、血管活性肠肽(Vasoactive intestinal peptide,VIP)及生长抑素(Somatostatin,SS)水平;western blot检测大鼠结肠组织L型钙离子通道α2亚基的表达;Q-PCR检测大电导钙激活钾离子通道蛋白、电压门控钠离子通道β2亚基表达情况。结果砂仁复方制剂能改善水浸应激导致的胃肠动力障碍,包括促进胃排空,降低胃残留率;在激素水平提高GAS、MTL的含量,降低SS含量;上调L型钙离子通道α2亚基蛋白表达量。结论砂仁复方制剂对慢性束缚水浸应激法诱导的胃肠动力障碍有明显改善作用,这一改善作用与升高GAS、MTL含量,降低SS含量,上调L型钙离子通道蛋白表达量有关。