大鼠束缚-浸水应激模型体温降低与应激性胃溃疡的关系

为探讨"束缚刺激"和"冷水刺激"在束缚-浸水应激性胃溃疡形成中各自的作用及体温降低与应激性胃溃疡的关系,本研究检测了束缚-浸水应激和不同温度下单纯浸水应激对胃粘膜和腹腔温度的影响。相同水温下束缚-浸水应激和单纯浸水应激导致大鼠产生同等程度的胃溃疡,表明"冷水刺激"在束缚-浸水应激导致的胃溃疡中起重要作用,而"束缚刺激"不起重要作用。浸水的水温越低,腹腔温度就越低,胃溃疡也就越严重,说明大鼠束缚-浸水应激模型中冷水刺激引起体温降低是胃溃疡的诱发因素。

辣椒素对束缚-浸水应激大鼠DMV和NTS神经元c-fos蛋白表达和胃溃疡的影响

目的观察辣椒素对束缚-浸水应激大鼠脑干迷走运动背核(DMV)和孤束核(NTS)c-fos蛋白表达和胃溃疡的影响,并探讨c-fos蛋白在DMV和NTS表达与胃溃疡的关系.方法大鼠皮下注射辣椒素,束缚-浸水应激,免疫组织化学技术检测原癌基因c-fos在脑干的DMV和NTS的蛋白表达,计算胃溃疡的指数.结果与盐水对照组相比,注射辣椒素组DMV和NTS中c-fos阳性细胞数显著减少(P<0.01),胃溃疡指数明显降低(P<0.05).结论辣椒素抑制束缚-浸水应激大鼠DMV和NTS神经元c-fos蛋白表达和胃溃疡的,DMV,NTS及辣椒素敏感传入神经可能参与应激性胃溃疡的形成.

大鼠束缚-浸水应激不同时间段下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴c-Fos蛋白的表达

研究大鼠束缚-浸水应激过程中下丘脑-垂体-肾上腺皮质(HPA)轴c-Fos蛋白表达的时空模式.分别给予雄性大鼠束缚-浸水应激0、30、60、120、180min,0 min作为对照组,然后用免疫组化技术检测HPA轴中c-Fos蛋白的表达.与对照组相比,应激30、60、120、180min组下丘脑室旁核、腺垂体中的c-Fos阳性细胞数显著增多(P<0.05),但对每一部位来说,这4个不同时间段c-Fos舶蛋白的表达均无明显差异.5组大鼠的肾上腺皮质束状带中均未观察到c-Fos蛋白的表达.这些结果提示室旁核和腺垂体参与束缚-浸水应激反应.

束缚-浸水应激大鼠下丘脑前部、延髓内脏带突触可塑性的变化

目的:研究束缚-浸水应激不同时间段(0,1,2和4 h)雄性Wistar大鼠下丘脑前部(主要是室旁核和视上核)、延髓内脏带(主要是迷走复合体)中突触膨体素和突触蛋白I表达量的变化情况,以期探讨在束缚-浸水应激致胃粘膜损伤过程中上述部位的突触可塑性是否发生了改变。方法:随机将雄性Wistar大鼠分为4组:束缚-浸水应激0,1,2和4 h组,利用免疫组织化学和Western Blot两种方法统计各组下丘脑前部、延髓内脏带中突触膨体素和突触蛋白I的分布和含量变化情况。结果:在束缚-浸水应激0 h到4 h过程中,下丘脑前部中突触膨体素表达在不同应激时间段差异均无统计学意义,但突触蛋白I,尤其是突触蛋白I b的含量发生了显著性变化(P<0.05);迷走复合体中的突触膨体素和突触蛋白I的表达均发生了显著性变化(P<0.05)。结论:这些结果提示,下丘脑前部、延髓内脏带在束缚-浸水应激致胃粘膜损伤的中枢调控过程中均发生了突触可塑性的变化。

束缚-浸水应激致大鼠胃黏膜损伤的神经机制

应激性胃黏膜损伤(SGML)是创伤后最常见的内脏并发症之一,束缚-浸水应激(RWIS)能在数小时内诱发胃黏膜损伤。RWIS致胃功能紊乱主要是由迷走副交感神经活动加强所致,其中延髓迷走背核与孤束核、下丘脑视上核与室旁核、丘脑背内侧核、中央杏仁核以及内侧前额皮质等均不同程度地参与了SGML的形成。P物质、乙酰胆碱、催产素等神经递质/调质均参与应激调控。本文就RWIS致大鼠胃黏膜损伤的神经机制作一综述。

束缚-浸水应激对石榴皮多酚在大鼠主要器官内分布的影响

目的观察束缚-浸水应激(RWIS)对石榴皮多酚在大鼠主要器官内分布的影响。方法利用FeCl3与多酚反应显色、与梯度多酚构成色阶,比色法检测多酚在器官内的含量。Wistar雄性大鼠250～300 g,灌胃给药,随机分为对照Ⅰ组(2 ml去离子水+应激,n=5);对照Ⅱ组(500 mg/ml石榴皮水提物、未应激)和实验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ(分别为5,50,500 mg/ml石榴皮水提物+应激)3个剂量组。给药1 h后行RWIS 3 h。过量麻醉处死动物后,心脏灌流除血,取脑、心、胃、肺、肝、肾、回肠、结肠匀浆,离心,取上清液与FeCl3反应。结果检测石榴皮多酚的最佳FeCl3浓度为9%。呈色反应的石榴皮水提物浓度为0.2～0.5 mg/ml。在大鼠的脑、心、肺、肝、肾上清液中未观察到呈色反应。实验Ⅲ组胃、结肠上清液与FeCl3反应阳性;而对照Ⅱ组的回肠、结肠也呈阳性,且高于实验Ⅲ组。结论 9%FeCl3可检测出0.2～0.5 mg/ml石榴皮水提物中的多酚。石榴皮多酚在胃肠壁中分布多于其它器官组织。RWIS使大鼠胃壁中石榴皮多酚含量增多,回肠和结肠壁内含量减少。

束缚-浸水应激对大鼠几个内分泌腺Fos蛋白表达的影响

目的了解束缚-浸水应激对大鼠松果体、甲状腺、胰岛、肾上腺Fos蛋白表达的影响．方法Wistar雄性大鼠12只，随机分为实验组（给予束缚-浸水应激1h，n=6）和对照组（不予束缚-浸水，n=6），用免疫组化技术检测两组动物各内分泌腺体中Fos蛋白的表达．结果与对照组相比，实验组中甲状腺、肾上腺髓质及皮质球状带中的Fos蛋白阳性细胞个数及累计光密度值（IOD）明显增加（P〈0．05）；松果体的Fos蛋白在实验和对照组表达都很强，两组间差别不明显（P〉0．05）；在实验组和对照组，肾上腺皮质网状带、胰岛中均未发现有Fos蛋白的表达．结果提示大鼠的甲状腺、肾上腺球状带及髓质参与了束缚-浸水应激反应．

束缚-浸水应激对大鼠内侧前额叶皮质锥体神经元放电活动的影响

目的 探究大鼠在束缚-浸水应激不同时间段,其内侧前额叶皮质（MPFC）内锥体神经元的电活动情况.方法 利用多通道在体记录技术,记录大鼠在束缚-浸水应激前和应激4h过程中MPFC锥体神经元的单位放电活动,进一步分析其放电频率、放电间隔及爆发式放电活动等指标,研究束缚-浸水应激对MPFC锥体神经元电活动的影响.结果 共采集到了12只大鼠MPFC内的25个锥体神经元的电活动.锥体神经元的电活动表现出两种相反趋势：（1）A类神经元（72％）其放电活动随应激时间的延长而受到抑制,放电率由应激前的（3.57±0.63） Hz持续降低到应激后第4小时的（0.81±0.11） Hz （P＜0.01）;同时簇状波的发放率也由应激前的（10.29±3.04）个/min,持续降低到应激后第4小时的（1.02±0.50）个/min （P＜0.01）,爆发式放电所占比例也显著性减少,变化效应与应激时间成正相关.（2）B类神经元（28％）则表现出短时的兴奋效应,其放电率由应激前的（1.77±0.45） Hz,升高到应激后第2小时的（2.67±0.74） Hz （P＜0.05）,平均放电间隔也明显缩短;簇状波的发放率由应激前的（2.01 ±0.73）个/min,升高到应激后第1小时的（9.04±2.42）个/min（P＜0.05）,爆发式放电所占比例也显著性升高,但B类神经元的兴奋持续时间较短.结论 束缚-浸水应激可改变MPFC内锥体神经元的电活动,A类锥体神经元活动受到抑制,B类锥体神经元活动增强.

切断膈肌下迷走神经对应激大鼠延髓、下丘脑Fos表达的影响

目的:探讨在束缚-浸水应激状态下,情绪变化、体温降低、胃肠道的反馈信息三者中哪种因素是诱发延髓、下丘脑神经元Fos表达的主导因素。方法:将雄性Wistar大鼠随机分两组:手术组、对照组。手术组切断双侧膈肌下迷走神经,对照组同样暴露神经但不切断。术后6d进行实验,将大鼠束缚-浸水应激3h后处死,测腹腔温度;取胃,观察胃粘膜损伤程度;取脑,应用免疫组化染色方法观察两组动物延髓、下丘脑神经元的Fos表达。结果:手术组动物延髓迷走神经运动背核、孤束核、下丘脑室旁核Fos表达较对照组减弱(P<0.05),延髓最后区减弱最为显著(P<0.01);腹腔温度低于对照组(P<0.05);胃粘膜损伤程度较对照组减轻(P<0.05)。结论:研究表明,束缚-浸水应激过程中,诱发延髓迷走神经背核、孤束核、最后区、下丘脑室旁核神经元Fos表达的主要因素是胃肠的反馈信息。

p38丝裂原活化蛋白激酶在应激性溃疡发病中的作用

目的探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)在应激性溃疡发生中的作用。方法80只SD大鼠分成正常对照组(10只)、浸水-束缚(WIR)应激模型组(0.5、1、2、4和6h时间点各10只)和p38特异性抑制剂CNI1493处理组(低剂量和高剂量组各10只)。CNI1493处理组于应激前2h尾静脉注射1或10mg/kg的CNI1493。胃黏膜病变程度采用溃疡指数计分评价,磷酸化和总p38MAPK表达采用蛋白印迹法(Westernblot)检测,肿瘤坏死因子α(TNFα)和白细胞介素1β(IL1β)基因表达采用Northernblot方法检测。结果WIR应激后大鼠胃黏膜p38MAPK发生持续活化,其最大活化发生于应激后1h,为正常水平的(6.8±3.2)倍(P<0.01)。使用CNI1493阻断p38MAPK活化后,胃黏膜损伤程度显著减轻,同时促炎性细胞因子TNFα和IL1β基因表达也明显下调。结论p38MAPK活化在实验性应激性溃疡的发生中发挥了重要作用。