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诱导型成骨细胞特异Stat3基因敲除小鼠的构建及验证
1
作者
龚心仪
黄湘如
+5 位作者
周巳入
杨屹羚
徐弘远
金安婷
代庆刚
江凌勇
《上海口腔医学》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第4期337-342,共6页
目的:运用Cre-Loxp基因敲除系统,构建诱导型条件性Stat3基因敲除小鼠并验证其敲除效率。方法:通过Stat3fl/fl与Col1 creERT2基因型的C57小鼠多代杂交,构建诱导型成骨细胞特异Stat3敲除小鼠Stat3Col1ERT2。取其骨髓间充质干细胞(bone mes...
目的:运用Cre-Loxp基因敲除系统,构建诱导型条件性Stat3基因敲除小鼠并验证其敲除效率。方法:通过Stat3fl/fl与Col1 creERT2基因型的C57小鼠多代杂交,构建诱导型成骨细胞特异Stat3敲除小鼠Stat3Col1ERT2。取其骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs),加入4-羟基他莫西芬(4-OTH)后,采用实时定量PCR技术和免疫印迹技术在m RNA与蛋白水平分别体外验证Stat3敲除效果。于小鼠腹腔注射他莫昔芬,采用免疫荧光染色技术,观察小鼠上颌牙槽骨区域STAT3的表达,以体内验证敲除效果。采用SPSS 24.0软件包对数据进行统计学分析。结果:实时定量PCR和免疫印迹结果显示,Stat3Col1ERT2小鼠BMSCs体外加药诱导敲除后,STAT3的m RNA水平显著下调(P<0.05)、蛋白表达降低(P<0.05)。免疫荧光染色结果显示,Stat3Col1ERT2小鼠体内上颌牙槽骨区域成骨细胞的STAT3表达显著降低(P<0.05)。结论:本研究成功构建了诱导型成骨细胞特异Stat3基因敲除小鼠,使基因敲除可受观察者时空调控,为今后正畸牙移动、颌骨牵引成骨、颌骨骨折等牙槽骨改建机制的研究提供了新的思路及依据。
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关键词
STAT3
成骨细胞
诱导
型
条件性
基因
敲除小
鼠
他莫西芬
下载PDF
职称材料
敲除Wdr1抑制小鼠原代血管平滑肌细胞的迁移和增殖
2
作者
袁白银
胡继盛
+1 位作者
刘钟颖
黄霞
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第12期179-185,共7页
细胞骨架肌动蛋白在细胞增殖、迁移等生物学过程中发挥重要作用,然而WDR1作为肌动蛋白解聚的主要辅助因子,其在平滑肌细胞中的作用尚无报道。构建Wdr1条件性诱导敲除小鼠模型,进而分离小鼠原代主动脉平滑肌细胞,诱导敲除Wdr1,检测平滑...
细胞骨架肌动蛋白在细胞增殖、迁移等生物学过程中发挥重要作用,然而WDR1作为肌动蛋白解聚的主要辅助因子,其在平滑肌细胞中的作用尚无报道。构建Wdr1条件性诱导敲除小鼠模型,进而分离小鼠原代主动脉平滑肌细胞,诱导敲除Wdr1,检测平滑肌细胞的形态、增殖和迁移情况。PCR结果显示,Wdr1f/f;ERT2Cre小鼠模型构建成功。免疫荧光结果表明:在前人基础上改进的分离方法能够高效分离原代平滑肌细胞。细胞形态观察结果显示:Wdr1敲除后对细胞的形态有显著性影响。同时,划痕实验以及CCK8检测结果也表明:Wdr1的条件性诱导性敲除可明显抑制平滑肌细胞的迁移和增殖。Wdr1敲除后平滑肌细胞的形态以及细胞生物学过程的改变提示其与血管疾病的发生和发展有紧密联系,这对揭示血管病理生理过程有重要意义。
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关键词
条件性诱导敲除小鼠
WDR1
平滑肌细胞
增殖
迁移
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职称材料
题名
诱导型成骨细胞特异Stat3基因敲除小鼠的构建及验证
1
作者
龚心仪
黄湘如
周巳入
杨屹羚
徐弘远
金安婷
代庆刚
江凌勇
机构
上海交通大学医学院附属第九人民医院·口腔医学院口腔颅颌面科
上海交通大学医学院附属第九人民医院·口腔医学院口腔第二门诊部
出处
《上海口腔医学》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第4期337-342,共6页
基金
国家自然科学基金(81570950,81870740,81800949)
上海交通大学医学院附属第九人民医院“交叉”研究基金-重点项目(JYJC201902)
+4 种基金
上海交通大学医学院附属第九人民医院临床研究助推计划(临+计划)
上海市“医苑新星”青年医学人才培养资助计划-杰出青年医学人才(HWJRS2019-72)
上海市教委高水平地方高校协同创新团队
上海交通大学医学院附属上海交通大学医学院附属第九人民医院生物样本库项目(YBKB201919)
上海市口腔医学研究所院基金“育苗项目”(KY科2018-07)。
文摘
目的:运用Cre-Loxp基因敲除系统,构建诱导型条件性Stat3基因敲除小鼠并验证其敲除效率。方法:通过Stat3fl/fl与Col1 creERT2基因型的C57小鼠多代杂交,构建诱导型成骨细胞特异Stat3敲除小鼠Stat3Col1ERT2。取其骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs),加入4-羟基他莫西芬(4-OTH)后,采用实时定量PCR技术和免疫印迹技术在m RNA与蛋白水平分别体外验证Stat3敲除效果。于小鼠腹腔注射他莫昔芬,采用免疫荧光染色技术,观察小鼠上颌牙槽骨区域STAT3的表达,以体内验证敲除效果。采用SPSS 24.0软件包对数据进行统计学分析。结果:实时定量PCR和免疫印迹结果显示,Stat3Col1ERT2小鼠BMSCs体外加药诱导敲除后,STAT3的m RNA水平显著下调(P<0.05)、蛋白表达降低(P<0.05)。免疫荧光染色结果显示,Stat3Col1ERT2小鼠体内上颌牙槽骨区域成骨细胞的STAT3表达显著降低(P<0.05)。结论:本研究成功构建了诱导型成骨细胞特异Stat3基因敲除小鼠,使基因敲除可受观察者时空调控,为今后正畸牙移动、颌骨牵引成骨、颌骨骨折等牙槽骨改建机制的研究提供了新的思路及依据。
关键词
STAT3
成骨细胞
诱导
型
条件性
基因
敲除小
鼠
他莫西芬
Keywords
STAT3
Osteoblasts
Inducible conditional gene knockout mice
Tamoxifen
分类号
R783.5 [医药卫生—口腔医学]
下载PDF
职称材料
题名
敲除Wdr1抑制小鼠原代血管平滑肌细胞的迁移和增殖
2
作者
袁白银
胡继盛
刘钟颖
黄霞
机构
武汉科技大学生命科学与健康学院
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第12期179-185,共7页
基金
国家自然科学基金青年基金项目(31701266)
文摘
细胞骨架肌动蛋白在细胞增殖、迁移等生物学过程中发挥重要作用,然而WDR1作为肌动蛋白解聚的主要辅助因子,其在平滑肌细胞中的作用尚无报道。构建Wdr1条件性诱导敲除小鼠模型,进而分离小鼠原代主动脉平滑肌细胞,诱导敲除Wdr1,检测平滑肌细胞的形态、增殖和迁移情况。PCR结果显示,Wdr1f/f;ERT2Cre小鼠模型构建成功。免疫荧光结果表明:在前人基础上改进的分离方法能够高效分离原代平滑肌细胞。细胞形态观察结果显示:Wdr1敲除后对细胞的形态有显著性影响。同时,划痕实验以及CCK8检测结果也表明:Wdr1的条件性诱导性敲除可明显抑制平滑肌细胞的迁移和增殖。Wdr1敲除后平滑肌细胞的形态以及细胞生物学过程的改变提示其与血管疾病的发生和发展有紧密联系,这对揭示血管病理生理过程有重要意义。
关键词
条件性诱导敲除小鼠
WDR1
平滑肌细胞
增殖
迁移
Keywords
conditional induced knockout mouse
WDR1
smooth muscle cells
proliferation
migration
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
诱导型成骨细胞特异Stat3基因敲除小鼠的构建及验证
龚心仪
黄湘如
周巳入
杨屹羚
徐弘远
金安婷
代庆刚
江凌勇
《上海口腔医学》
CAS
CSCD
北大核心
2020
0
下载PDF
职称材料
2
敲除Wdr1抑制小鼠原代血管平滑肌细胞的迁移和增殖
袁白银
胡继盛
刘钟颖
黄霞
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
0
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职称材料
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