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基于CRISPR/Cas9联合Cre-LoxP方法的Ddx3x肝脏条件性敲除小鼠模型的构建与鉴定
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作者 潘桢桢 徐玲 +5 位作者 张向颖 高耀 田原 范子豪 曹亚玲 任锋 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2024年第10期1275-1280,共6页
目的采用CRISPR/Cas9联合Cre-LoxP方法构建DEAD-box RNA解旋酶3X连锁(DEAD-box RNA helicase 3X-linked,Ddx3x)肝脏条件性敲除小鼠。方法设计特异的sgRNA序列,在Ddx3x基因外显子4~10两端插入LoxP序列,构建Ddx3x-flox小鼠。采用PCR方法... 目的采用CRISPR/Cas9联合Cre-LoxP方法构建DEAD-box RNA解旋酶3X连锁(DEAD-box RNA helicase 3X-linked,Ddx3x)肝脏条件性敲除小鼠。方法设计特异的sgRNA序列,在Ddx3x基因外显子4~10两端插入LoxP序列,构建Ddx3x-flox小鼠。采用PCR方法对F0代和F1代小鼠进行基因鉴定。将Ddx3x-flox F1代小鼠与特异性表达Alb-Cre的工具鼠交配,获得肝脏条件性敲除Ddx3x基因小鼠(Ddx3x^(Δhep))。采用PCR方法和Western blotting方法分别检测Ddx3x^(Δhep)基因小鼠目的基因与蛋白的表达。选取8周龄雄性野生型C57/6J小鼠、Ddx3x^(Δhep)小鼠、Ddx3x^(fl/fl)小鼠,测定血清ALT、AST水平评价肝脏肝损伤情况。结果对F1代小鼠基因PCR鉴定的结果表明,基因型符合Ddx3x^(fl/fl);F1代小鼠与Alb-Cre小鼠杂交,子代与Ddx3x^(fl/fl)小鼠杂交,即获得Ddx3x^(Δhep)小鼠;PCR与Western blotting结果显示,目的小鼠肝组织中Ddx3x基因和蛋白表达显著降低。此外,Ddx3x^(Δhep)小鼠无胚胎致死现象,出生后生理状况良好。正常饲养条件下,Ddx3x^(Δhep)小鼠与Ddx3x^(fl/fl)小鼠及野生型小鼠相比,血清ALT、AST指标及体质量差异均无统计学意义(P>0.05)。结论基于CRISPR/Cas9联合Cre-LoxP方法成功构建了Ddx3x^(Δhep)小鼠动物模型,为后续研究Ddx3x在肝脏中的生物学功能及作用机制奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 CRISPR/cas9技术 Cre-LoxP系统 Ddx3x 肝脏条件性敲除小鼠
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CRISPR/Cas9联合Cre-Loxp系统建立VASN条件敲除的小鼠肝细胞系
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作者 甘暨 杨丽超 +3 位作者 张起 孙俊铭 张俊 何敏 《广西医科大学学报》 CAS 2023年第2期173-181,共9页
目的:利用CRISPR/Cas9技术联合Cre-Loxp系统的条件性敲除策略构建VASN基因敲除的AML12小鼠肝细胞株。方法:在VASN基因第二外显子上下游设计靶点并合成gRNA序列,构建2个CRISPR/Cas9重组载体;设计构建VASN上下游分别带有Loxp序列和旁侧同... 目的:利用CRISPR/Cas9技术联合Cre-Loxp系统的条件性敲除策略构建VASN基因敲除的AML12小鼠肝细胞株。方法:在VASN基因第二外显子上下游设计靶点并合成gRNA序列,构建2个CRISPR/Cas9重组载体;设计构建VASN上下游分别带有Loxp序列和旁侧同源序列的供体载体donor DNA质粒;将3个质粒共转染至小鼠肝细胞AML12中,分离单克隆,提取基因组DNA,经PCR及测序鉴定获得稳定敲入Loxp序列的单克隆细胞株AML12-Loxp;将pALB-Cre质粒转染至AML12-Loxp,筛选建立敲除VASN基因的细胞系。结果:成功构建2个靶向敲除VASN基因的pX459-gRNA-VASN-1和pX459-gRNAVASN-2重组载体及一个供体载体;转染药筛后获得12个单细胞克隆,经测序,5个单克隆细胞实现VASN基因上下游精确敲入Loxp序列;同源重组敲入效率为41.6%;pALB-Cre质粒转染后获得20个单细胞克隆,经PCR和测序获得12个VASN基因敲除的单克隆细胞,敲除效率为60%。结论:利用CRISPR/Cas9技术联合Cre-Loxp系统成功构建了VASN基因敲除的AML12细胞,为后续体外研究VASN在肝细胞中的功能及在动物体内实现VASN的条件性敲除奠定了分子基础。 展开更多
关键词 VASN CRISPR/cas9 Cre-Loxp系统 条件性敲除 AML12细胞
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条件接收系统(CAS)技术讲座 第五讲 数字信号传输系统中的CA处理技术
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作者 周师亮 《中国有线电视》 2008年第3期291-294,共4页
关键词 条件接收系统 信号传输系统 技术讲座 ca处理 MPEG-2标准 数字信号传输 国际标准 视频压缩编码
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条件接收系统(CAS)技术讲座 第三讲 广播电视系统中密码学的应用——机密密钥体制
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作者 周师亮 《中国有线电视》 2008年第1期64-72,共9页
关键词 广播电视系统 条件接收系统 技术讲座 密钥体制 密码学 应用 条件接收技术 数字信号传输
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条件接收系统(CAS)技术讲座 第九讲 水印技术和数字指纹
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作者 周师亮 《中国有线电视》 2008年第7期733-737,共5页
关键词 技术讲座 水印技术 数字指纹 条件接收系统 条件接收技术 加密算法 数字电影 技术委员会
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条件接收系统(CAS)技术讲座 第十三讲 一体机及机卡软硬分离技术
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作者 周师亮 《中国有线电视》 2008年第11期1212-1214,共3页
关键词 分离技术 条件接收系统 一体机 技术讲座 电视机 机顶盒 数字接收 增值服务
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条件接收系统(CAS)技术讲座 第十讲 机顶盒
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作者 周师亮 《中国有线电视》 2008年第8期875-878,共4页
关键词 数字电视机顶盒 条件接收系统 技术讲座 模拟电视 数/模转换 电视发展 经济实力 数字接收
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条件接收系统(CAS)技术讲座 第十四讲 现代数字影视系统的条件接收技术
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作者 周师亮 《中国有线电视》 2008年第12期1322-1326,共5页
关键词 条件接收技术 影视系统 数字电视系统 手机电视 数字电影 影视技术 增值服务
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条件接收系统(CAS)技术讲座 第七讲 数字版权管理和双向认证
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作者 周师亮 《中国有线电视》 2008年第5期517-519,共3页
关键词 条件接收系统 技术讲座 双向认证 数字版权管理 安全认证 保护措施 DRM系统 密码技术
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条件接收系统(CAS)技术讲座 第十一讲 智能卡
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作者 周师亮 《中国有线电视》 2008年第9期981-985,共5页
关键词 条件接收系统 智能卡 技术讲座 付费电视系统 有偿服务 加扰方式 广播电视 加密方式
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条件接收系统(CAS)技术讲座第二讲 伪随机序列
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作者 周师亮 《中国有线电视》 2007年第24期2331-2337,共7页
(上接第22期) 条件接收系统(Conditional AccessSystem,CAS)的核心是密码术。人们有时候会认为把明文(plain.text——这里是指透明的图像、声音、数据等信息)通过算法加扰(scrambling)后变成密文(ciphertext),其安全性主... (上接第22期) 条件接收系统(Conditional AccessSystem,CAS)的核心是密码术。人们有时候会认为把明文(plain.text——这里是指透明的图像、声音、数据等信息)通过算法加扰(scrambling)后变成密文(ciphertext),其安全性主要是依靠加密算法来保证的,这是一种误解。基于保持算法秘密的算法称为受限制的算法,是一种低密级应用,它的保密性是很差的。 展开更多
关键词 条件接收系统 伪随机序列 技术讲座 加密算法 TEXT 密码术 安全性 保密性
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条件接收系统(CAS)技术讲座 第十二讲 机卡分离的机顶盒方案
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作者 周师亮 《中国有线电视》 2008年第10期1091-1095,共5页
关键词 数字电视机顶盒 机卡分离 条件接收系统 技术讲座 市场销售 国内外 消费品
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条件接收系统(CAS)技术讲座 第四讲 广播电视系统中密码学的应用——公开密钥体制
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作者 周师亮 《中国有线电视》 2008年第2期189-194,共6页
关键词 公开密钥体制 条件接收系统 广播电视系统 技术讲座 密码学 应用 不可否认性 加密密钥
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条件接收系统(CAS)技术讲座 第八讲 数字签名
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作者 周师亮 《中国有线电视》 2008年第6期642-644,共3页
关键词 数字签名 条件接收系统 技术讲座 信息完整性 不可否认性 加密技术
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有条件接收系统CAS的研究 被引量:6
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作者 张小溪 《中国有线电视》 北大核心 2001年第5期30-33,共4页
全数字CAS是一个集多项高新技术于一体的综合系统。从加解扰技术的基本要求出发 ,全面分析了CA技术的发展过程与思路 ,介绍了我国第一套拥有自主知识产权的 ,已成功实现与国外著名IRDETO公司CA系统同密运行测试的清华同方CA系统的技术原... 全数字CAS是一个集多项高新技术于一体的综合系统。从加解扰技术的基本要求出发 ,全面分析了CA技术的发展过程与思路 ,介绍了我国第一套拥有自主知识产权的 ,已成功实现与国外著名IRDETO公司CA系统同密运行测试的清华同方CA系统的技术原理 。 展开更多
关键词 有线电视 条件接收系统 加解扰技术
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SOPCA条件接收系统的设计与应用 被引量:1
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作者 袁春 钟玉琢 杨士强 《计算机工程与设计》 CSCD 2002年第11期63-66,70,共5页
数字电视条件接收系统是广播电视信息安全的关键环节,目前国内实用的系统均为国外公司的产品,不利于国家信息安全的管理。在现有DVB(Digital Video Broadcasting)标准的基础上,提出了SOPCA(SoftwarePlatform of Connecting Applianc... 数字电视条件接收系统是广播电视信息安全的关键环节,目前国内实用的系统均为国外公司的产品,不利于国家信息安全的管理。在现有DVB(Digital Video Broadcasting)标准的基础上,提出了SOPCA(SoftwarePlatform of Connecting Appliance)条件接收系统,实现了节目传输流加扰、节目管理、用户管理、分层加密机制和IC卡控制等关键技术,完成了在自主知识产权的SOPCA嵌入式操作系统和硬件平台上的原型机应用。经过总体结构和具体性能的综合分析比较,在功能上优于其它同类系统,最后对系统功能的进一步完善进行了探讨。 展开更多
关键词 SOPca 条件接收系统 设计 数字电视 加扰
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数码视讯条件接收系统(CAS)获国家广电总局认证证书
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《广播电视信息》 2004年第9期89-89,共1页
关键词 数码视讯条件 接收系统 cas 国家广电总局认证
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金亚数字电视条件接收系统(CAS)V1.0
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《卫星与网络》 2008年第3期59-59,共1页
在金亚数字电视条件接收系统V1.0的发展过程当中,充分考虑了新业务的需求,支持PPC、PPV、NVOD、数据服务等数字广播电视业务。向数字电视运营商提供包括IC卡寻址、4级地域分组寻址、8种逻辑分组寻址、64种业务组合分组寻址、设备型号分... 在金亚数字电视条件接收系统V1.0的发展过程当中,充分考虑了新业务的需求,支持PPC、PPV、NVOD、数据服务等数字广播电视业务。向数字电视运营商提供包括IC卡寻址、4级地域分组寻址、8种逻辑分组寻址、64种业务组合分组寻址、设备型号分组寻址等灵活多样的操作。可以实现针对指定IC卡用户、分组用户的授权、OSD、电子邮件等操作,可以实现IC卡用户的在线充值业务。同时,还也可以实现针对指定IC卡用户、分组用户的条件禁播和条件准播。在金亚数字电视条件接收系统V1.0的开发设计过程当中,充分考虑到数字电视运营的现状。能够支持多种加扰器和多个数字电视用户管理系统,满足同密标准,完成了和国内多家厂商的同密测试和认证。 展开更多
关键词 条件接收系统 数字电视 用户管理系统 广播电视业务 同密标准 IC卡 NVOD
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天柏:主打双向条件接收系统BiCAS
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《中国传媒科技》 2007年第4期42-42,共1页
随着网络双向化改造进程的加快,双向互动业务越来越受到人们的重视,数字电视的发展方向(后平移时代)也必然是糅合了多种业务形态的以互动为主要特征的双向化时代。而在一个双向的广电网络中,我们如何为节目加密?何种加密方式才是... 随着网络双向化改造进程的加快,双向互动业务越来越受到人们的重视,数字电视的发展方向(后平移时代)也必然是糅合了多种业务形态的以互动为主要特征的双向化时代。而在一个双向的广电网络中,我们如何为节目加密?何种加密方式才是更经济和更安全的?天柏公司作为国内数字电视广播系统的集成和终端产品供应商,在CCBN2007上展出的BiCAS双向条件接收系统将会解决这些疑问。 展开更多
关键词 条件接收系统 双向 数字电视 广电网络 产品供应商 广播系统 天柏公司 业务
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天柏有条件接收系统(CAS)获国家广电总局认证证书
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《有线电视技术》 2004年第4期106-106,共1页
2004年2月6日,国家广电总局向天柏宽带网络科技有限公司颁发了数字电视条件接收系统(CAS)A级认证证书(编号:C006),A级为超过200万用户以上级别,实测300万用户,是CAS的最高等级。至此,天柏的SMS和CA已经全部通过总局认证。
关键词 天柏宽带网络科技有限公司 条件接收系统 数字电视 认证证书 Jetcas
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