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条斑紫菜多糖的分离纯化与抗肿瘤活性 被引量:13
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作者 顾佳雯 张陆曦 +2 位作者 徐红丽 郭婷婷 何培民 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期50-54,共5页
目的:应用生化提纯技术从条斑紫菜(Porphyra yezoensis)中提取不同纯度的多糖,并观察各多糖组分对人乳腺癌细胞MCF-7生长的影响。方法:通过DEAE-52柱层析和Sephadex G-200柱层析,对条斑紫菜粗多糖热水提取物进行纯化;经HPLC,紫外和红外... 目的:应用生化提纯技术从条斑紫菜(Porphyra yezoensis)中提取不同纯度的多糖,并观察各多糖组分对人乳腺癌细胞MCF-7生长的影响。方法:通过DEAE-52柱层析和Sephadex G-200柱层析,对条斑紫菜粗多糖热水提取物进行纯化;经HPLC,紫外和红外光谱对多糖各组分的纯度及结构进行初步鉴定;并用MTT法和流式细胞仪检测多糖对人乳腺癌细胞MCF-7生长的影响。结果:分离纯化出的各组分条斑紫菜粗多糖对人乳腺癌细胞MCF-7生长均有不同程度的抑制作用,其中PY-D2可诱导MCF-7细胞凋亡。结论:条斑紫菜多糖具有杀伤肿瘤细胞MCF-7的作用。 展开更多
关键词 条斑紫菜多糖 分离纯化 MTT法 MCF-7
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超声降解条斑紫菜多糖的反应动力学 被引量:9
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作者 马海乐 周存山 +2 位作者 郑悦 骆琳 王振斌 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第3期660-664,共5页
Due to some deficiencies of the polysaccharides degradation by the methods of chemical,thermal or enzymatic treatment,sonication was introduced for the degradation of Porphyra yezoensis polysaccharide(PYPS).The Mark-H... Due to some deficiencies of the polysaccharides degradation by the methods of chemical,thermal or enzymatic treatment,sonication was introduced for the degradation of Porphyra yezoensis polysaccharide(PYPS).The Mark-Houwink equation,showing the relationship between molecular weight and intrinsic viscosity,was set up.It was found from the results of the degradation dynamics that there was an exponential relation between the rate constant and treatment time of sonication,different from the traditional chemical,thermal or enzymatic treatment.The activation energy of the degradation was 52.13 kJ·mol-1,and it could be preliminarily concluded that ultrasonic degradation was better than the enzymatic ones. 展开更多
关键词 条斑紫菜多糖 超声降解 反应动力学方程 活化能
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条斑紫菜多糖PY-D2对小鼠脾淋巴细胞生长的影响 被引量:5
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作者 张陆曦 徐红丽 +2 位作者 顾佳雯 郭婷婷 何培民 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1093-1096,共4页
目的:研究条斑紫菜多糖体外提高机体免疫力的作用。方法:应用生化技术分离和纯化条斑紫菜多糖,获得条斑紫菜多糖2个组分,分别为PY-D1和PY-D2。体外培养条件下分别用不同浓度的PY-D2以及PY-D2与ConA或LPS协同处理小鼠脾淋巴细胞,通过MTT... 目的:研究条斑紫菜多糖体外提高机体免疫力的作用。方法:应用生化技术分离和纯化条斑紫菜多糖,获得条斑紫菜多糖2个组分,分别为PY-D1和PY-D2。体外培养条件下分别用不同浓度的PY-D2以及PY-D2与ConA或LPS协同处理小鼠脾淋巴细胞,通过MTT法观察条斑紫菜多糖对小鼠脾淋巴细胞生长的影响。采用流式细胞仪检测小鼠脾淋巴细胞的细胞周期变化。结果:PY-D2处理小鼠脾淋巴细胞72小时后对其生长有明显促进作用,且呈剂量依赖效应,0.25,0.5和1mg/ml条斑紫菜多糖处理小鼠脾淋巴细胞后,小鼠脾淋巴细胞的存活率分别为157.5%,162.1%和173.4%(P<0.01)。PY-D2与ConA或LPS共同处理小鼠脾淋巴细胞时,小鼠脾淋巴细胞的存活率高于ConA和LPS单独的作用,表现出明显的协同效应。流式细胞仪检测表明PY-D2可以促进小鼠脾淋巴细胞从G1期进入S期。结论:PY-D2可以促进小鼠脾淋巴细胞生长,为今后研究多糖提高机体免疫力的作用机理奠定了坚实的基础。 展开更多
关键词 条斑紫菜多糖PY-D2 脾淋巴细胞 MTT法 CONA LPS 流式细胞检测
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条斑紫菜多糖的含量测定及其部分理化性质研究 被引量:17
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作者 周存山 马海乐 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第2期38-42,共5页
条斑紫菜经脱脂,浸提,除蛋白,醇沉,超滤和脱色得精制多糖,Molish反应和Fehling反应定性鉴定,依次稀释法测定特性粘度,Dodgson法测定硫酸基含量,苯酚–硫酸法测定多糖含量,并用精制多糖测得对半乳糖的换算因子。结果表明,此测定方法简便... 条斑紫菜经脱脂,浸提,除蛋白,醇沉,超滤和脱色得精制多糖,Molish反应和Fehling反应定性鉴定,依次稀释法测定特性粘度,Dodgson法测定硫酸基含量,苯酚–硫酸法测定多糖含量,并用精制多糖测得对半乳糖的换算因子。结果表明,此测定方法简便灵敏,供试液在3h内显色稳定,重现性好,平均回收率为98.26%,RSD=4.77%(n=5),换算因子f=1.35,在18.32~54.96μg范围内呈良好的线性关系,r=0.99945。特性粘度适中[η]=34.26×10-3ml/g,硫酸基含量较高为21.63±0.11%(n=2)。 展开更多
关键词 条斑紫菜多糖 苯酚-硫酸浊 特性粘度 硫酸基 含量测定
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条斑紫菜多糖对糖尿病大鼠脑组织的保护作用 被引量:4
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作者 杨旭东 张杰 林峰 《中国康复理论与实践》 CSCD 2011年第8期739-741,共3页
目的观察条斑紫菜多糖(PYP)对糖尿病大鼠脑组织的保护作用及对细胞凋亡的影响。方法将60只Wistar大鼠随机分为:正常对照组、模型组、PYP高、中、低剂量组。HE染色观察脑组织病理变化,琼脂糖凝胶电泳法检测细胞凋亡的情况,RT-PCR观察p53... 目的观察条斑紫菜多糖(PYP)对糖尿病大鼠脑组织的保护作用及对细胞凋亡的影响。方法将60只Wistar大鼠随机分为:正常对照组、模型组、PYP高、中、低剂量组。HE染色观察脑组织病理变化,琼脂糖凝胶电泳法检测细胞凋亡的情况,RT-PCR观察p53、bcl-2基因mRNA的表达。结果 PYP可以明显改善糖尿病大鼠脑组织病理形态改变。与模型组相比,PYP组大鼠脑组织凋亡细胞显著减少,p53基因表达明显减少,bcl-2基因表达明显增加。结论 PYP可以抑制糖尿病大鼠脑组织的p53基因表达,促进bcl-2基因表达,降低脑损伤。 展开更多
关键词 糖尿病 条斑紫菜多糖 神经病变 细胞凋亡 P53基因 BCL-2基因
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条斑紫菜多糖的分离纯化及Mark-Houwink方程参数测定 被引量:2
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作者 周存山 马海乐 曾慧琴 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第9期41-44,共4页
目的:获得均一性的条斑紫菜多糖,测定相应的Mark-Houwink方程参数。方法:条斑紫菜经超临界CO2脱脂、水提、醇沉、脱蛋白和DEAE-52柱层析分级分离,获得条斑紫菜多糖,凝胶渗透色谱法鉴定多糖的均一性并同时测定分子量,利用均一性的条斑紫... 目的:获得均一性的条斑紫菜多糖,测定相应的Mark-Houwink方程参数。方法:条斑紫菜经超临界CO2脱脂、水提、醇沉、脱蛋白和DEAE-52柱层析分级分离,获得条斑紫菜多糖,凝胶渗透色谱法鉴定多糖的均一性并同时测定分子量,利用均一性的条斑紫菜多糖测定其Mark-Houwink方程参数,非均一性的条斑紫菜多糖进行验证。结果:分离到分子量分别为2.2×105、3.8×105和6.1×105的均一性条斑紫菜多糖的组分,确定了条斑紫菜多糖在水溶液中25℃下的Mark-Houwink方程的参数为:K=7.86×10-3,α=0.626。结论:经检验,测定的K和α的值可靠,可用于条斑紫菜多糖分子量的研究。 展开更多
关键词 条斑紫菜多糖 分离纯化 Mark—Houwink方程
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条斑紫菜多糖PY-D2对4种人肿瘤细胞株生长的影响 被引量:3
7
作者 张陆曦 徐红丽 +3 位作者 周贇 顾佳雯 郭婷婷 何培民 《生物技术通讯》 CAS 2007年第4期608-611,共4页
目的:研究条斑紫菜多糖体外抗肿瘤的生物学活性。方法:应用生化技术分离和纯化条斑紫菜多糖,获得条斑紫菜多糖的2个组分,分别为PY-D1和PY-D2;在体外培养条件下分别用不同浓度的条斑紫菜多糖PY-D2处理4种人肿瘤细胞,通过MTT法观察条斑紫... 目的:研究条斑紫菜多糖体外抗肿瘤的生物学活性。方法:应用生化技术分离和纯化条斑紫菜多糖,获得条斑紫菜多糖的2个组分,分别为PY-D1和PY-D2;在体外培养条件下分别用不同浓度的条斑紫菜多糖PY-D2处理4种人肿瘤细胞,通过MTT法观察条斑紫菜多糖PY-D2对4种人肿瘤细胞生长的影响;采用流式细胞仪检测肿瘤细胞的细胞周期变化。结果:条斑紫菜多糖PY-D2诱导HO-8910、MCF-7、K562和7721肿瘤细胞72h后,对其生长有明显的抑制作用,呈剂量依赖效应,500mg/LPY-D2的抑制率分别为21.2%、23.6%、19.8%和21%(P<0.001)。流式细胞仪检测表明PY-D2可以阻滞肿瘤细胞的细胞周期于G0/G1期或G2/M期。结论:条斑紫菜多糖PY-D2具有抑制肿瘤细胞HO-8910、MCF-7、K562和7721生长的作用,其有关的分子生物学作用机理值得进一步研究。 展开更多
关键词 条斑紫菜多糖 抗肿瘤 MIT法 流式细胞检测
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条斑紫菜多糖对人肝癌Bel7402抗肿瘤作用的初步研究 被引量:9
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作者 张杰 杨旭东 王崴 《中国食物与营养》 2010年第8期82-84,共3页
目的:研究条斑紫菜多糖对人肝癌Bel7402体外抗肿瘤作用。方法:采用MTT法观察条斑紫菜多糖体外对肝癌Bel7402的增殖抑制作用;荧光显微镜观察不同浓度条斑紫菜多糖诱导Bel7402细胞凋亡作用情况,RT-PCR检测Survivin、Bax基因表达量的变化... 目的:研究条斑紫菜多糖对人肝癌Bel7402体外抗肿瘤作用。方法:采用MTT法观察条斑紫菜多糖体外对肝癌Bel7402的增殖抑制作用;荧光显微镜观察不同浓度条斑紫菜多糖诱导Bel7402细胞凋亡作用情况,RT-PCR检测Survivin、Bax基因表达量的变化。结果:条斑紫菜多糖对人肝癌Bel7402细胞有显著地增殖抑制作用,能诱导Bel7402细胞凋亡,并且能上调Bax、降低Survivin表达。结论:条斑紫菜多糖体外有一定的抗肿瘤作用,并能促进Bel7402细胞凋亡,其机制可能与激活Bax、抑制Survivin表达有关。 展开更多
关键词 条斑紫菜多糖 肝癌 BAX基因 SURVIVIN基因
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Bcl-xl和p53基因在条斑紫菜多糖抑制胃癌BGC-823细胞增殖中的作用 被引量:2
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作者 张杰 杨旭东 申梅淑 《中国食物与营养》 2011年第9期74-76,共3页
目的:探讨Bcl-xl、p53基因在条斑紫菜多糖抑制BGC-823细胞增殖和诱导凋亡中的作用。方法:将不同浓度条斑紫菜多糖作用于BGC-823细胞,利用MTT法检测细胞增殖抑制率,RT-PCR法检测Bcl-xl、p53基因表达量的变化、流式细胞仪检测细胞周期和... 目的:探讨Bcl-xl、p53基因在条斑紫菜多糖抑制BGC-823细胞增殖和诱导凋亡中的作用。方法:将不同浓度条斑紫菜多糖作用于BGC-823细胞,利用MTT法检测细胞增殖抑制率,RT-PCR法检测Bcl-xl、p53基因表达量的变化、流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡情况。结果:条斑紫菜多糖能抑制BGC-823细胞增殖及诱导细胞凋亡,并上调p53和降低Bcl-xl表达。结论:条斑紫菜多糖抑制人胃癌细胞增殖、促进凋亡,其机制可能与激活p53、抑制Bcl-xl表达有关。 展开更多
关键词 条斑紫菜多糖 BGC-823细胞 BCL-XL基因 P53基因
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条斑紫菜多糖对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响
10
作者 张杰 杨旭东 申梅淑 《中国食物与营养》 2010年第3期68-70,共3页
目的:探讨Fas、Bcl-2基因在条斑紫菜多糖诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡中的作用。方法:不同浓度条斑紫菜多糖作用于MCF-7细胞48h后,荧光显微镜观察人乳腺癌细胞MCF-7细胞凋亡情况,RT-PCR法检测Bcl-2、Fas基因表达量的变化。结果条斑紫菜多... 目的:探讨Fas、Bcl-2基因在条斑紫菜多糖诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡中的作用。方法:不同浓度条斑紫菜多糖作用于MCF-7细胞48h后,荧光显微镜观察人乳腺癌细胞MCF-7细胞凋亡情况,RT-PCR法检测Bcl-2、Fas基因表达量的变化。结果条斑紫菜多糖能诱导MCF-7细胞凋亡,并且上调Fas和降低Bcl-2表达。结论:条斑紫菜多糖促进人乳腺癌MCF-7细胞凋亡,其机制可能与激活Fas、抑制Bcl-2表达有关。 展开更多
关键词 条斑紫菜多糖 乳腺癌 FAS BCL-2
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条斑紫菜多糖的降解条件优化及其生物活性 被引量:14
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作者 姜慧 孔立敏 +3 位作者 王翀 王彦波 傅玲琳 周涛 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第3期38-47,共10页
本实验采用水提醇沉法提取条斑紫菜多糖(Porphyra yezoensis polysaccharide,PSPY),用H2O2和VC结合法降解PSPY,以对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基的清除率为指标,经单因素试验和响应面法优化得到最佳降解条件:H2O2-VC浓度4.1 mmol/L、... 本实验采用水提醇沉法提取条斑紫菜多糖(Porphyra yezoensis polysaccharide,PSPY),用H2O2和VC结合法降解PSPY,以对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基的清除率为指标,经单因素试验和响应面法优化得到最佳降解条件:H2O2-VC浓度4.1 mmol/L、温度52.4℃、降解时间2.1 h;该条件下降解PSPY后得到的降解斑紫菜多糖(degraded Porphyra yezoensis polysaccharide,DPSPY)的分子质量为17 ku,而PSPY的分子质量为452 ku,PSPY降解后总糖和硫酸根质量分数增加,蛋白质量分数减少,傅里叶变换红外光谱扫描结果发现PSPY降解前后的结构未有明显变化。体外抗氧化实验、胆酸盐结合实验和细胞免疫活性实验结果证明,DPSPY的生物活性优于PSPY,实验结果为PSPY深加工和产品开发提供了理论依据。 展开更多
关键词 条斑紫菜多糖 降解 胆酸盐 抗氧化活性 免疫活性
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基于体外HUVECs细胞模型的条斑紫菜多糖促血管生成活性 被引量:1
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作者 冯丰珍 郑明静 +5 位作者 洪涛 李志朋 杜希萍 朱艳冰 倪辉 姜泽东 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1-9,共9页
从条斑紫菜中提取条斑紫菜多糖,对其总糖质量分数、蛋白质量分数、3,6-内醚半乳糖质量分数、硫酸基质量分数、分子质量和单糖组成进行分析,并基于人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)的体外血管生成模型,... 从条斑紫菜中提取条斑紫菜多糖,对其总糖质量分数、蛋白质量分数、3,6-内醚半乳糖质量分数、硫酸基质量分数、分子质量和单糖组成进行分析,并基于人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)的体外血管生成模型,研究条斑紫菜多糖对HUVECs的血管生成活性以及作用机制。采用噻唑蓝法测定条斑紫菜多糖对HUVECs细胞活力的影响,黏附实验和细胞划痕实验测定其细胞黏附和细胞迁移能力,体外血管形成实验检测HUVECs的管腔形成数目,Western Blotting检测经多糖处理的HUVECs中E-钙黏蛋白和N-钙黏蛋白的表达水平,并通过丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)特异性抑制剂和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)受体酪氨酸激酶抑制剂探究其细胞迁移的作用机制。结果表明,条斑紫菜多糖的总糖质量分数为(77.48±2.62)%,蛋白质量分数为(3.24±0.58)%,3,6-内醚半乳糖质量分数为(20.30±1.06)%,硫酸基质量分数为(20.78±3.31)%。多糖的分子质量为39.81 kDa,主要由半乳糖、3,6-内醚半乳糖和硫酸基组成,是一种硫酸化半乳聚糖。条斑紫菜多糖在0~200μg/mL质量浓度范围内对HUVECs无直接毒性且能够促进HUVECs模型中细胞增殖、黏附、迁移和血管网络的形成;进一步研究表明,条斑紫菜多糖主要通过c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)MAPK和VEGF受体信号通路介导E-钙黏蛋白表达下调、N-钙黏蛋白表达上调,促进细胞血管生成。综上所述,条斑紫菜多糖能够促进HUVECs血管生成,为其开发新型的促血管生成营养因子和以精准营养为导向的条斑紫菜精深加工和高值利用奠定科学理论基础。 展开更多
关键词 条斑紫菜多糖 人脐静脉内皮细胞 细胞迁移 促血管生成活性
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条斑紫菜粗多糖对淋巴细胞和支持细胞的增殖作用 被引量:11
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作者 郭婷婷 张陆曦 +2 位作者 顾佳雯 刘凤 何培民 《生物技术通讯》 CAS 2006年第3期359-361,共3页
目的:探讨条斑紫菜粗多糖的一些生物学功能,包括促进淋巴细胞增殖以及促进支持细胞生长的功能。方法:将原代培养的大鼠和小鼠脾淋巴细胞以及大鼠睾丸支持细胞分别接种于96孔板中,将不同浓度的条斑紫菜粗多糖(0.05、0.5、5、10mg/mL)加... 目的:探讨条斑紫菜粗多糖的一些生物学功能,包括促进淋巴细胞增殖以及促进支持细胞生长的功能。方法:将原代培养的大鼠和小鼠脾淋巴细胞以及大鼠睾丸支持细胞分别接种于96孔板中,将不同浓度的条斑紫菜粗多糖(0.05、0.5、5、10mg/mL)加入培养,每种浓度设6个复孔,并设对照组孔。采用四氮甲唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖率。结果:条斑紫菜粗多糖能够显著地促进大鼠、小鼠脾淋巴细胞和大鼠睾丸支持细胞的增殖,增殖率随多糖浓度的提高而升高;当多糖浓度为10mg/mL时,增殖率分别为137.3%、149%和454.5%。结论:条斑紫菜粗多糖具有提高免疫力及促进生殖功能的作用,其对睾丸支持细胞的增殖作用目前还未见报道。 展开更多
关键词 条斑紫菜多糖 脾淋巴细胞 睾丸支持细胞 MTT法 原代培养
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