松口蘑菌丝体蛋白对HeLa细胞凋亡的影响

目的 : 研究松口蘑发酵菌丝体水提液中菌丝体蛋白质 (TMP- B)的体外抗癌作用。方法 : 体外培养 He La细胞 ,培养时添加不同浓度的 TMP- B,绘制细胞生长曲线。利用扫描电镜、流式细胞术及 DNA凝胶电泳等进行体外抗人子宫颈癌 He La细胞增殖和诱导细胞凋亡机制的研究。结果 : TMP- B在体外具有抑制肿瘤细胞增殖的作用。扫描电镜观察到 TMP- B处理细胞产生明显的凋亡小体 ;TMP- B对细胞周期的影响是通过抑制细胞从 S到 G2 /M期的转化来抑制He La细胞增殖 ,诱导细胞发生凋亡的 ;流式细胞仪分析图上出现凋亡峰 ;DNA电泳出现以 2 0 0 bp左右为单位的 DNA碎片。结论 : 采用液体培养方法生产的松口蘑菌丝体蛋白质 ,具有显著的抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡作用。

松口蘑与栎松口蘑RAPD反应体系的优化

以长白山松口蘑与栎松口蘑为材料,建立了松口蘑与栎松口蘑RAPD反应优化体系。即在20μl反应体积中,模板DNA 10ng,引物0.3μmol.L-1,dNTP 200μmol.L-1,MgCl22mmol.L-1,Taq DNA聚合酶1unit,1×Buffer;反应程序为预变性94℃5min,94℃45s、36.3℃60s、72℃90s共循环45次,最后72℃延伸7min。

松口蘑窝的适地选择及促成机理

松口蘑窝是松口蘑生长发育和产量形成的基础。松口蘑窝为多年生并具有自然繁衍能力。它的形成与松林的林龄、林型和土壤生态及其动态变化关系密切。松口蘑窝为多年生并具有自然繁衍能力,选择适宜林地,优化环境系统,营造、培育、医治和保护松口蘑窝可以增加松口蘑窝的数量,延长松口蘑窝的寿命,提高松口蘑窝的质量,促进松茸山的增殖丰产。

长白山区松口蘑与栎松口蘑菌丝在不同培养基上生长情况

研究了不同果汁培养基对长白山松口蘑与栎松口蘑菌丝生长影响,结果表明:4种培养基都不同程度地影响松口蘑与栎松口蘑菌丝生长。从菌丝生长速度、菌丝干重、菌落形态3个方面综合来考虑,松口蘑适宜培养基是Ⅰ培养基,栎松口蘑适宜培养基是Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ培养基。

松口蘑与栎松口蘑子实体营养成分比较

以长白山区松口蘑与栎松口蘑子实体作为材料,测定两种子实体中的水分、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、灰分、矿质元素、维生素等含量。结果表明:栎松口蘑除粗蛋白含量比松口蘑较高外,其他粗脂肪、粗纤维、灰分含量无明显差异;矿质元素中松口蘑与栎松口蘑子实体含有多种人体必需的K、Ca、Na、Mg、Cu、Fe、Zn、Mn等元素,栎松口蘑除铁含量比松口蘑低以外,其余含量均比松口蘑高;维生素B1和维生素B2含量在松口蘑与栎松口蘑之间差异不大。

长白山区松口蘑与栎松口蘑子实体解剖学研究

对松口蘑与栎松口蘑两种食用菌的子实体进行了显微解剖结构研究,结果表明:松口蘑与栎松口蘑的菌肉、菌柄组织都是由有隔膜的丝状菌丝组织组成,松口蘑菌褶的菌髓中菌丝排列属于两侧型,而栎松口蘑菌褶的菌髓中菌丝排列属于近规则至规则型,褶缘处都未见到囊状体。

松口蘑深层发酵工艺的研究

对松口蘑深层发酵工艺进行系统研究。通过正交试验初步确定松口蘑适宜的培养基组成 :玉米粉 30g,葡萄糖 1 0g ,豆饼粉 1 0g ,玉米浆 1 0g ,KH2 PO41g ,定容至 1L。适宜发酵条件 :最适生长温度为 2 5℃ ,摇瓶转速为 1 60r/min ,最适pH为 5 0 ,最适接种量为 1 0 % ,装液量 1 2 0mL/ 5 0 0mL摇瓶培养 1 0d ,菌体生物量达 1 2 94g/L。

松口蘑菌丝体的分离和RAPD-PCR分析

针对松口蘑 [Tricholomamatsutake(S .ItoetImai)Sing .]菌丝体分离培养困难和各种相关分离物目前难以用出菇试验鉴定的现实 ,采用 8种培养基配方 ,对 9个不同来源的松口蘑子实体的不同部位及菌根、菌土进行组织分离 ,计接种试管 81 0多支 ,结果从菌褶部位获得 94支慢生型的菌丝体分离菌株 ,从菌柄部位仅获得 1支快生型的菌丝体分离菌株。以马铃薯葡萄糖土壤滤液培养基 (PDAS)、马铃薯葡萄糖麦麸滤液培养基 (PDAW )、BM培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基 (PDA)对菌褶进行组织分离 ,获慢生型菌丝体的成功率依次为 74 4%、35 5%、1 5 6%和 8 9%。以各分离菌株的来源松口蘑子实体和中日两国松口蘑研究者提供的分离菌株作为DNA参照样品 ,对从供试子实体、菌根、菌土进行组织分离获得的各种相关纯培养物进行亲菌鉴定。采用筛选的 1 7个随机引物介导 2 5个供试松口蘑子实体及其分离菌体的RAPD(RandomAmplifiedPolymorphicDNA) PCR反应 ,全部获得了清晰而稳定的DNA指纹图谱 ,结果一致表明 :每个松口蘑子实体的菌盖 (含菌褶 )、菌柄与从自身菌褶分离的慢生型纯培养菌丝体都具有相同的DNA指纹图谱 ,其相似系数为 1 0 0 0 ,明确揭示松口蘑个体的DNA同质性 ,而不同来源的供试松口蘑之间的相似系数在 0 934～ 0

松口蘑与假松口蘑ITS序列测定和分析比较

对松口蘑和假松口蘑进行ITS序列测序,通过DNAStar软件比较分析,发现松口蘑与假松口蘑的5.8SrDNA序列完全一致,ITS1和ITS2呈现不同程度的多态性。松口蘑ITS序列长度为601bp,假松口蘑ITS序列长度为563bp。设计了扩增松口蘑和假松口蘑ITS1的特异性引物,能够快速地区别松口蘑与假松口蘑。

长白山松口蘑的驯化研究进展

对长白山区松口蘑的分布、生态、纯培养菌种、驯化栽培。

气相色谱/质谱/计算机法分析松口蘑子实体和菌丝体中的香成分

本文用顶空收集法和蒸馏-萃取法提取富集了松口蘑子实体和菌丝体中的香成分,经色谱/质谱联机分析,在子实体中测得64种香成分,并首次在菌丝体中测得36种香成分。菌丝体中有28种组分与子实体香成分相同。为深入研究和开发珍贵的松口蘑提供了科学依据。该提取方法充分有效,该分析方法简便,灵敏度高,可做为分析天然产物香成分时参考。

云南产松口蘑17种氨基酸的含量测定及评价

目的:测定云南松口蘑中17种氨基酸的含量,并对其进行营养评价。方法:采用氨基酸分析仪测定松口蘑中17种氨基酸的组成。结果:松口蘑样品经酸水解处理,含有苏氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸和赖氨酸等17种氨基酸,总氨基酸质量分数为24.73%,其中包含人体必需的8种氨基酸,配比合理:E/(E+N)=0.35,E/N=0.53,与WHO/FAO提出的E/(E+N)应为0.4左右,E/N应为0.6左右的参考蛋白质模式接近。结论:说明松口蘑在医学和营养学上都有很高的研究价值,值得大力开发利用。

松口蘑及其活性物质研究进展

详细论述了松口蘑的生物学特性、菌丝生长的营养需求、分离鉴定方法、栽培技术及深层发酵技术 ,同时综述了松口蘑的生物学特性及活性物质的研究进展 。

长白山区松口蘑分布及生态研究

本文调查了长白山区松口蘑的分布状况,发现了一些新的松口蘑产区,研究了植被土壤等生态特征,讨论了松口蘑的适应性和驯化潜能等前沿问题。

滇西北松口蘑菌塘的生态因子调查

以滇西北丽江市拉市乡松口蘑（Tricholoma matsutake）产地为例,进行了松口蘑菌塘生态因子的调查。结果发现：（1）松口蘑菌塘多集群分布于狭窄的山脊及西南坡,坡面坡度在30~60°之间,上层云南松荫蔽度0.4~0.6,下层高山栎、黄背栎等灌木丛荫蔽度达0.7~0.9,落叶层及腐质层1~6 cm;（2）出菇期间菌塘地表附近空气的平均温度14.1℃,平均相对湿度78.7%;（3）出菇期间菌塘的地下温度在15.0~20.5℃之间,西南坡的菌塘温度相对较高;（4）菌塘土壤的含水量比非菌塘土壤的含水量低,出菇期间平均低16.7%;（5）菌塘土pH约为5.5,比非菌塘土低7.9%;（6）菌塘土除全钾的含量比非菌塘土高之外,其余营养成分均比非菌塘的低。

松口蘑的镇咳、祛痰、平喘作用研究

用动物实验方法,研究松口蘑子实体水溶性提取液治疗支气管炎,咳、痰、喘三种症状的效果及其药理作用。给豚鼠腹腔注射松口蘑子实体水溶性提取液,能非常显著地增大方波刺激迷走神经的引咳阈值;给小白鼠灌胃,能非常显著增加其呼吸道的酚红排泌量;给豚鼠离体气管滴入提取液,对气管有非常显著的扩张效应;该提取液能非常显著地延长豚鼠的引喘潜伏期,对蛙口腔粘膜上皮的纤毛运动有一定的加快作用。松口蘑子实体水溶性提取液有明显的镇咳、祛痰和平喘作用。

中国三省松口蘑遗传多样性分析

采用ITS、mt SSU rDNA的V4和V9区对采自西藏、吉林和云南3个省份30个地区的59个样本进行物种鉴定,并运用IGS1-RFLP和RAPD进行遗传多样性分析。结果表明:所有样本均为松口蘑(Tricholoma matsutake),松口蘑ITS序列存在明显的地域性;IGS1-RFLP分析表明,吉林样本属于A型,西藏和云南样本是2种新类型;聚类分析表明,在相似系数为0.702水平时将供试样本分为3大类群;我国松口蘑具有丰富的遗传多样性,并且自然种群遗传多样性地域性明显。

不同培养基对松口蘑菌丝生长的影响

以PDA为基础 ,分别加入松口蘑土、松枝、松针、糙皮侧耳菌丝和麦麸浸汁 ,制备成琼脂培养基 ,对照PDA和浜田氏培养基培养松口蘑纯菌丝。结果表明 ,糙皮侧耳菌丝麦麸汁培养基的效果明显优于包括浜田氏培养基在内的其它配方 ,松口蘑土培养基也有良好表现。松口蘑菌丝在不同培养基上形成的菌落特征也不尽相同。进一步的试验结果表明 ,在采用几种不同真菌菌丝为原料制成的菌丝麦麸汁培养基上 。

松口蘑中微量元素的测定

采用火焰原子吸收法同时测定了松口蘑中K、Ca、Na、Mg、Fe、Pb、Cd、Co、Cr、Zn、Mn、Cu等12种元素的含量。方法的相对标准偏差在0.08％－2.32％范围，回收率在97.1%－108.3%范围。结果表明，在三种松口蘑样品中，除含有较高的K、Na、Ca、Mg和一定量的有害元素Cd、Pb外，其余6种对人体有益的微量元素较为丰富。