响应面法优化水酶法提取松子蛋白的研究

主要研究了水酶法提取松子蛋白的酶解工艺。选用Alcalase碱性蛋白酶作为水解酶,以总蛋白提取率为指标。通过单因素实验和响应面实验,得到影响实验的因素依次为加酶量>酶解温度>料液比>酶解pH>酶解时间。确定最佳的酶解参数为:加酶量1.9%,温度55℃,酶解时间2.2h,料液比1∶5,pH8.8,此时总蛋白提取率为87.92%。

响应面法优化水酶法提取松子蛋白的研究

主要研究了水酶法提取松子蛋白的酶解工艺。选用Alcalase碱性蛋白酶作为水解酶,以总蛋白提取率为指标。通过单因素实验和响应面实验,得到影响实验的因素依次为加酶量>酶解温度>料液比>酶解pH>酶解时间。确定最佳的酶解参数为:加酶量1.9%,温度55℃,酶解时间2.2 h,料液比1∶5,pH 8.8,此时总蛋白提取率为87.92%。

松子蛋白改善脑缺血再灌注损伤小鼠的认知学习能力作用研究

目的观察松子蛋白对脑缺血再灌注损伤小鼠学习记忆功能障碍的改善作用。方法60只小鼠随机分为6组:空白组,模型组,阳性对照组,松子蛋白低、中、高剂量组。连续灌胃给药14 d。通过Morris水迷宫和跳台实验,测试小鼠的学习记忆能力。通过生化检测法测定谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、活性及丙二醛(MDA)含量。结果水迷宫实验结果表明,与Model组相比,阳性对照组及松子蛋白低、中、高剂量组小鼠逃避潜伏期和总路程明显缩短(P<0.05);跳台实验结果表明,与Model组相比,阳性对照组及松子蛋白低、中、高剂量组小鼠潜伏期明显增加,错误次数明显减少(P<0.05)。给予松子蛋白后,能够降低MDA水平,升高GSH、SOD水平(P<0.05)。结论松子蛋白具有改善脑缺血再灌注损伤小鼠学习记忆功能障碍的作用。

松子蛋白对过氧化氢致SH-SY5Y细胞氧化损伤的保护作用及其机制

目的:观察松子蛋白(PE)对过氧化氢(H_2O_2)致SH-SY5Y细胞损伤的影响及其机制。方法:取对数生长期细胞,分为对照组,模型组,PE低、中、高剂量组(0.1、1、10μg/mL),对照组加入等体积细胞1640培养液,然后加入H_2O_2(终浓度400μmol/L)且孵育4h造成细胞氧化应激损伤模型,采用MTT比色法检测细胞活力,利用流式细胞技术检测PE对氧化损伤SH-SY5Y细胞凋亡程度的影响,Western blot检测Bcl-2、Nrf-2、HO-1蛋白表达的情况。结果:与对照组比较,模型组SH-SY5Y细胞存活率显著降低(P<0.05),凋亡率显著升高(P<0.05),SH-SY5Y中Nrf-2、Bcl-2、HO-1蛋白水平显著降低(P<0.05);与模型组比较,PE低、中、高剂量组细胞存活率均显著升高(P<0.05),凋亡率显著降低(P<0.05),SH-SY5Y中Nrf-2、Bcl-2、HO-1蛋白水平均显著升高(P<0.05)。结论:PE对H_2O_2致SH-SY5Y细胞损伤具有保护作用,其机制可能与通过激活神经细胞内Nrf-2通路抑制其氧化应激,降低凋亡发生有关。

长白山松子抗氧化肽制备及活性研究

以长白山松子分离蛋白为原料,采用碱性蛋白酶制备抗氧化肽,通过Box-Behnken中心组合试验确定最佳水解工艺条件为:酶解温度56.5℃、加酶量7822U/g、底物质量浓度0.021g/mL、pH9.0、酶解时间240min。对该条件制备的抗氧化肽进行活性研究,结果显示随着浓度的升高,松子抗氧化肽在4mg/mL时对ABTS自由基的清除率和Fe2+螯合率达到100%,16mg/mL时对DPPH自由基清除率达到80.95%,24mg/mL时,对羟基自由基清除率达到100%。