高效液相色谱法测定丁座草中松脂素单葡萄糖苷的含量

目的 建立HPLC方法测定丁座草中松脂素单葡萄糖苷的含量。方法 采用反相高效液相色谱法，Kromasil C18柱（250mm×4．6mm，5μm），流动相为甲醇-水（35：65），流速为1．0mL·min^-1，检测波长为230nm，柱温为25℃。结果 松脂素单葡萄糖苷在0．28～2．8μg与峰面积呈良好的线性关系（r=0．9992），平均回收率为100．6%，RSD为2．29％（n=9）。结论 本方法简便、准确，重现性好，适用于丁座草中松脂素单葡萄糖苷含量的测定。

近红外光谱技术结合化学计量学快速测定杜仲中松脂素二葡萄糖苷和京尼平苷酸的含量

应用近红外光谱技术并结合化学计量学建立杜仲中松脂素二葡萄糖苷(PDG)和京尼平苷酸(GPA)含量测定模型。以积分球漫反射方式采集近红外光谱数据,应用一阶微分、多元散射校正(MSC)等优选光谱数据预处理方法和竞争自适应加权采样(CARS)筛选最优波长变量,采用偏最小二乘法(PLS)和交叉验证法建立PDG和GPA的定标模型。PDG和GPA的定标模型显示出良好的预测效果,其校正集的相关系数分别为0.961 5和0.958 3,交互验证均方差分别为0.001 5和0.006 4。表明此快速预测模型准确可靠,适合快速测定杜仲中的PDG和GPA,为杜仲质量控制在线化提供了新思路。

HPLC法测定千草脑脉通片中(+)-松脂素单葡萄糖苷的含量

目的:建立高效液相色谱法测定千草脑脉通片中(+)-松脂素单葡萄糖苷含量。方法:采用Hedera ODS-2C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相乙腈-水(20:80),流速1.0ml·min^(-1),检测波长230 nm。结果:(+)-松脂素单葡萄糖苷在18.49～184.91μg·ml^(-1)浓度范围内,呈良好的线性关系(r=0.999 5);平均回收率为98.9%,RSD为1.1%(n=6)。结论:该方法简便、快速,可用于千草脑脉通片中(+)-松脂素单葡萄糖苷的含量测定。

斜率校正“一测多评法”同时测定杜仲中京尼平苷酸、绿原酸、京尼平苷和松脂素二葡萄糖苷的含量

目的:建立斜率校正"一测多评法"同时测定杜仲中京尼平苷酸(GPA)、绿原酸(CHA)、京尼平苷(GP)、松脂素二葡萄糖苷(PDG)含量的方法。方法:以HPLC法含量测定为基础,CHA为对照,计算GPA、GP、PDG的斜率相对校正因子,并比较斜率校正"一测多评法"与外标法两种结果相关性,从而验证斜率校正"一测多评法"的准确性,最终建立测定杜仲多种活性成分的斜率校正"一测多评法"。结果:在一定的线性范围内,GPA、GP、PDG的斜率相对校正因子分别为:0.762 8,0.478 6,0.711 2,重复性良好。斜率校正"一测多评法"计算的含量值与外标法实测值相关性较好,56批杜仲样本中GPA、GP、PDG含量结果的相关系数均大于0.99。结论:建立的斜率校正"一测多评法"准确性高,可用于杜仲中GPA、CHA、GP、PDG活性成分的含量测定。

杜仲中松脂素二葡萄糖苷和松脂素对成骨细胞中OPG和RANKL表达的影响

目的：观察杜仲中松脂素二葡萄糖苷及其苷元松脂素对体外培养的小鼠胚胎成骨细胞前体细胞MC3T3-E1的影响。方法：采用质量浓度为1×10^-7-1×10^3μg·L^-1的松脂素二葡萄糖苷与松脂素体外干预MC3T3-E1成骨细胞48,72 h,采用噻唑蓝法检测细胞增殖情况,碱性磷酸酶（ALP）试剂盒检测细胞分化情况,酶联免疫吸附测定法（ELISA）和蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测细胞骨保护素（OPG）与核转录因子-κB受体活化因子配体（RANKL）蛋白表达的水平。结果：与空白组相比,培养48 h,1×10^-4-100μg·L^-1松脂素二葡萄糖苷及1×10^-4-1μg·L^-1松脂素均能促进成骨细胞增殖（P〈0.05,P〈0.01）;培养72 h,1×10^-3-100μg·L^-1松脂素二葡萄糖苷及0.1μg·L^-1松脂素能促进成骨细胞增殖（P〈0.05,P〈0.01）。与空白组相比,培养48 h时,质量浓度为1×10^-4-1×10^3μg·L^-1的松脂素二葡萄糖苷、松脂素均能够显著促进成骨细胞ALP分泌（P〈0.01）;培养72 h时,质量浓度为0.1-1×10^3μg·L^-1的松脂素二葡萄糖苷和1×10^-4-1×10^3μg·L^-1松脂素均能显著促进成骨细胞ALP分泌（P〈0.05,P〈0.01）。与空白组相比,培养48 h,1×10^-5-10μg·L^-1的松脂素二葡萄糖苷和松脂素均能促进细OPG蛋白分泌（P〈0.05,P〈0.01）;只有松脂素在1×10^-5,1×10^-3μg·L^-1时能明显抑制RANKL蛋白的分泌（P〈0.01）,在1×10^-5-0.1μg·L^-1时提高OPG/RANKL（P〈0.01）。结论：松脂素二葡萄糖苷与松脂素均能通过促进成骨细胞的增殖和分化达到抗骨质疏松作用,但其作用机制不同,松脂素二葡萄糖苷主要通过促进OPG分泌来发挥,而松脂素则既能通过促进OPG分泌又能通过抑制RANKL表达来发挥作用。

荔枝核的五个苷类成分

通过溶剂分部和多种色谱分离,从荔枝(Litchi chinensis Sonn.)核中得到5个苷类成分。经光谱分析及与文献数据对照,分别鉴定为(-)-松脂素4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)、苯乙基β-D-吡喃葡萄糖苷(2)、乙基β-D-吡喃葡萄糖苷(3)、乙基α-D-吡喃葡萄糖苷(4)和胞苷(5)。它们均为首次从荔枝核中分离得到。

杜仲不同药用部位及制剂中4种木脂素成分含量差异比较

目的比较杜仲不同药用部位及制剂中松脂醇二葡萄糖苷、松脂素单葡萄糖苷、丁香素、松脂素含量的差异。方法采用HPLC法测定指标成分含量,以乙腈(A)-水(B)为流动相,梯度洗脱(0~40 min,A:12%~30%;40~50 min,A:30%~40%),流速0.8 mL/min,检测波长205 nm。结果不同药用部位(杜仲板皮和枝皮)中4种木脂素总量相近;不同产地杜仲样品中4种木脂素总量存在一定差异;不同杜仲制剂中4种木脂素总量存在较大差异。结论杜仲板皮和枝皮中木脂素含量相近,可以一同作为杜仲药材入药用;吉安地区(井冈山)产杜仲药材质量较佳;不同杜仲制剂物质基础存在一定差异,与产品的生产工艺有较大关系。

UPLC-QAMS法同时测定连翘花中5种成分的含量

目的 建立同时测定连翘花中芦丁、连翘酯苷A、(+)-松脂素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、连翘苷、连翘脂素5种成分的方法。方法 采用超高效液相色谱(UPLC)法进行检测。色谱柱为ACQUITY UPLC HSS T3 C_(18);流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(梯度洗脱);流速为0.3 mL/min;检测波长为275 nm(0~8 min)、330 nm(8~10.5 min)、275 nm(10.5~32 min);柱温为25℃;进样量为1μL。以芦丁为参照物,采用一测多评(QAMS)法计算各成分含量,并与外标法进行比较。结果 QAMS法所得连翘花中连翘酯苷A、(+)-松脂素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、连翘苷、连翘脂素的含量分别为7.472~7.671、2.919~2.986、1.439~1.486、1.523~1.566mg/g,外标法测定结果为7.454~7.664、2.913~2.996、1.444~1.484、1.519~1.562 mg/g,两种方法测定结果无明显差异,相对偏差<1.0%。结论 本研究成功建立了UPLC-QAMS法同时测定连翘花中5种成分的含量,且该方法与外标法所得结果无明显差异,可用于连翘花的质量控制。

连翘不同部位活性成分含量分析

目的对连翘不同部位—花、叶、果实(青翘和老翘)中4种活性成分(+)-松脂素-β-D-葡萄糖苷、连翘酯苷A、芦丁和连翘苷进行含量测定及分析。方法采用HPLC方法同时测定连翘中4种不同的活性成分含量。结果连翘酯苷A在青翘中的含量最高(62.28 mg/g),其次为老翘(51.58 mg/g)和叶子(40.34 mg/g),在花中的含量(9.41 mg/g)最低。连翘苷和芦丁在叶中的含量最高,分别为45.57 mg/g和6.97 mg/g。叶中连翘苷是老翘(9.20 mg/g)的5倍,芦丁为老翘(0.64 mg/g)中的10倍之多。(+)-松脂素-β-D-葡萄糖苷在连翘花中的含量最高,可达到22.63 mg/g,在叶中的含量(8.99 mg/g)最低。结论这4种活性成分在连翘花、叶、果实(青翘和老翘)中的含量具有显著差异,建议药典中增加(+)-松脂素-β-D-葡萄糖苷和芦丁的含量测定作为连翘质量的评价指标,同时分别建立青翘和老翘的质量标准,以更好地控制中药连翘的质量。

区带毛细管电泳法同时测定连翘不同部位中5个木脂素类成分的含量

目的:建立同时测定连翘中连翘苷、连翘脂素、(+)-表松脂素-4′-O-葡萄糖苷、(+)-松脂素-β-D-葡萄糖苷和(+)-表松脂素5个木脂素类成分的区带毛细管电泳法,并测定连翘不同部位中5个成分的含量。方法:石英毛细管柱(75μm×60cm,有效长度30cm)作为分离通道,以50mmol·L-1硼砂(用0.1mol·L-1氢氧化钠溶液调pH至9.90)为电泳缓冲液,工作电压15kV,温度20℃,检测波长214nm。结果:5个成分在12.5min内实现良好分离,连翘苷、连翘脂素、(+)-表松脂素-4′-O-葡萄糖苷、(+)-松脂素-β-D-葡萄糖苷和(+)-表松脂素浓度分别在3.6～145μg·mL-1、0.5～20μg·mL-1、0.68～27.2μg·mL-1、6.8～272μg·mL-1和0.6～24.2μg·mL-1范围内呈良好的线性关系(r≥0.9985);平均回收率(n=5)分别为98.50%,101.2%,100.4%,97.36%,102.0%。结论:该方法简便、快速、准确,为科学评价与有效控制连翘药材质量提供新方法。连翘叶和花中连翘苷和(+)-松脂素-β-D-葡萄糖苷的含量均高于果实。

连翘(老翘)药材连翘苷含量多不达标的现状与建议

目的考察以连翘中三种木脂素类(松脂素-β-D-葡萄糖苷、连翘苷、连翘脂素)总和代替连翘苷评价连翘(老翘)药材质量的可行性。方法采用"一测多评"法同时测定老翘药材中三种木脂素类成分的含量,并与多指标含量测定结果进行比较。结果在不同色谱系统和不同色谱柱中各组分校正因子、保留时间的RSD均<3%,且三种木脂素类成分计算值与实测值之间无显著性差异。结论确证了连翘中三种木脂素类总和代替连翘苷评价连翘药材质量的可行性和科学性。

高效液相色谱法同时测定不同产地、不同炮制时间连翘和连翘叶中5种活性成分的含量

目的:采用HPLC法测定不同产地、不同炮制时间连翘和连翘叶中芦丁、连翘酯苷A、(+)松脂素-β-D-葡萄糖苷、(+)表松脂素-β-D-葡萄糖苷、连翘苷。方法:色谱柱:Waters Symmetry C18(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温25℃,流动相乙腈-0.4%冰醋酸溶液,梯度洗脱,流速1 mL.min-1,检测波长277 nm。结果:芦丁、连翘酯苷A、(+)松脂素-β-D-葡萄糖苷、(+)表松脂素-β-D-葡萄糖苷、连翘苷在检测的范围内线性关系良好,r2均大于0.999 7,方法回收率在97.69%～100.30%之间。结论:此方法简便、准确,快速,为全面评价连翘和连翘叶的质量提供可靠的分析方法。

基于神经网络分析的疏风解毒胶囊抗炎作用谱效关系研究

目的构建疏风解毒胶囊抗炎作用谱效关系网络模型,探究其发挥抗炎作用的潜在物质基础。方法在建立疏风解毒胶囊不同配比样品指纹图谱分析方法的基础上,采用均匀设计法对疏风解毒胶囊中8味中材随机采样得到不同配比组,测定各配比样品对脂多糖(LPS)诱导的RAW264. 7细胞释放肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL-6)的抑制率,将中效信息与各样品MS指纹图谱化学信息用BP人工神经网络分析得出各色谱峰对抗炎活性的影响程度,建立谱效关系。结果通过建立的最佳神经网络模型,计算得到14个特征峰与疏风解毒胶囊抗炎活性显著相关。结论通过谱效研究,推测疏风解毒胶囊发挥抗炎作用的中效物质基础可能为包括大黄酸、大黄素、马鞭中苷、毛蕊花糖苷、松脂素-β-D-葡萄糖苷、连翘酯苷A、虎杖苷等在内的14个化合物。

缬草的化学成分研究

目的研究败酱科缬草属植物缬草Valeriana officinalis根及根茎的化学成分。方法反复利用柱色谱方法进行分离纯化,通过理化性质及波谱数据鉴定化合物结构。结果从缬草氯仿和正丁醇部位分离得到11个化合物,分别鉴定为橄榄树脂素-4-O-β-D-葡萄糖苷(1)、落叶松脂醇-4,4′-O-β-D-双葡萄糖苷(2)、落叶松脂醇-4-O-β-D-葡萄糖苷(3)、落叶松脂醇(4)、8-羟基-松脂素-4′-O-β-D-葡萄糖苷(5)、松脂素-8-O-β-D-葡萄糖苷(6)、8,9′-二羟基-松脂素-4′-O-β-D-葡萄糖苷(7)、松脂素(8)、缬草苷A(9)、香草醛(10)、β-谷甾醇(11)。结论化合物1～3、6、7、10为首次从该植物中分离得到。

福寿草的化学成分研究

目的研究福寿草Adonis amurensis带根全草的化学成分。方法运用硅胶、凝胶、小孔树脂及PR-HPLC等多种色谱技术对福寿草带根全草的化学成分进行分离纯化,并根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。结果从福寿草带根全草95%乙醇提取物的醋酸乙酯和正丁醇萃取部位分离鉴定了15个化合物,其中强心苷类化合物7个,分别为毒毛旋花子苷元（1）、铃兰毒苷（2）、铃兰毒原苷（3）、索马林（4）、洋地黄毒苷元（5）、罗布麻苷（6）、叶含杠柳鼠李糖苷（7）;黄酮类化合物5个,分别为木犀草素（8）、芹菜素（9）、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸（10）、荭草苷（11）、异槲皮苷（12）;木脂素类化合物3个,分别为松脂素（13）、松脂素-8-O-β-D-葡萄糖苷（14）、9′-脱羧迷迭香酸-4′-O-（1→4）-半乳糖鼠李糖苷（15）。结论化合物10、13~15是首次从该属植物中分离得到,化合物3、10、13~15为首次从该植物中分离得到。

蜘蛛香化学成分研究

目的研究蜘蛛香Valeriana jatamansi根的化学成分。方法药材采用乙醇渗漉提取,利用ODS反相柱、硅胶柱、Sephadex LH-20等色谱技术进行提取分离,根据波谱分析鉴定化合物结构。结果从蜘蛛香根75%乙醇提取物中分离得到13个化合物,分别鉴定为prinsepoil(1)、8-羟基松脂醇(2)、松脂醇(3)、2,5-methanocyclopenta-1,3-dioxin-7-ol(4)、松柏醛(5)、vibutinal(6)、缬草醛(7)、11-ethoxyviburtinal(8)、5-羟甲基糠醛(9)、松脂素-4′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(10)、(7S,8R)-dehydroconiferyl alcohol-8,5′-dehydroconiferyl aldehyde-4-O-β-D-glucopyranoside(11)、厚朴酚(12)、胡萝卜苷(13)。结论化合物11、12为首次从败酱科植物中分离得到,5、6为首次从缬草属植物中分离得到,9、10为首次从该植物中分离得到。

荔枝核的化学成分及生物活性研究

目的研究荔枝Litchchinensis核正丁醇部位的化学成分及生物活性。方法利用硅胶、D101大孔树脂、MCI、ODS、Sephadex LH-20及半制备型高效液相等色谱技术进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构;采用Griess法测定化合物对脂多糖诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7产生一氧化氮(NO)的抑制活性;采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-trinitrophenylhydrazine,DPPH)方法测定化合物的体外抗氧化活性。结果从荔枝核正丁醇部位分离得到15个化合物,分别鉴定为柚皮素-7-O-(2’’,6’’-二-O-α-L-鼠李糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)、litchioside D(2)、异鼠李素-3-O-(2’’,6’’-二-O-α-L-鼠李糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷(3)、山柰酚-3-O-(6-O-啡酰基)-β-葡萄糖基-(1→3)-α-鼠李糖-7-O-α-鼠李糖苷(4)、5’-O-β-D-葡萄糖苷茉莉酮酸甲酯(5)、5’-O-β-D-葡萄糖苷茉莉酮酸丁酯(6)、5’-O-β-D-葡萄糖苷茉莉酮酸(7)、松脂素-4-O-β-D-葡萄糖苷(8)、表松脂素-4-O-β-D-葡萄糖苷(9)、pyrafortunoside A(10)、苯乙基芸香苷(11)、苯甲醇-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(12)、methyl-1-(β-D-ribofuranosyl)-imidazolin-2-one-4-carboxylate(13)、莽草酸甲酯(14)和莽草酸(15)。体外抗炎活性结果表明,化合物13能明显抑制脂多糖诱导的RAW264.7细胞NO释放,其半数抑制浓度(median inhibition concentration,IC50)为(27.9±2.8)μmol/L;化合物15具有一定的抑制活性,其IC50为(62.4±9.7)μmol/L。体外抗氧化活性结果表明,化合物4对DPPH自由基具有一定的清除活性,其IC50为(109.8±1.5)μmol/L。结论化合物1、3~6、9~15为首次从荔枝核中分离得到。化合物13有较强体外抗炎活性,化合物15有一定的体外抗炎活性。化合物4具有一定的体外抗氧化活性。