松茸粗多糖的提取工艺优化、单糖组成及体外抗氧化活性

【目的】提高松茸粗多糖提取率,探究松茸多糖纯化组分及抗氧化作用。【方法】采用超声波辅助水提醇沉法提取松茸粗多糖,优化提取工艺,使用DEAE-Sepharose Fast Flow离子柱分离纯化粗多糖,采用离子色谱法分析单糖成分,并测定体外抗氧化活性。【结果】最优提取工艺参数为:浸提时间2.25 h,料液比1∶31(g∶mL),浸提温度83.50℃,该条件下多糖提取率为8.67%。松茸粗多糖经分离纯化后收集到3种多糖组分(TMP-1、TMP-2、TMP-3),主要由岩藻糖、盐酸氨基葡萄糖、半乳糖、葡萄糖和甘露糖组成,其中TMP-1存在鼠李糖,TMP-2和TMP-3存在葡萄糖醛酸。松茸粗多糖和3种纯化多糖组分均具有一定的抗氧化活性且存在量效关系,抗氧化能力强弱为:松茸粗多糖>TMP-2>TMP-3>TMP-1。【结论】松茸多糖有一定的抗氧化活性,且松茸粗多糖效果最好,分离纯化后的多糖组分抗氧化活性有所降低。本研究为松茸多糖的开发利用提供了理论基础,对其功能食品研发具有重要意义。

松茸多糖对1-甲基-4-苯基-吡啶离子诱导PC12细胞损伤的影响

目的探讨松茸多糖(TMP)对1-甲基-4-苯基-吡啶离子(MPP^(+))诱导PC12细胞损伤的保护作用机制。方法选用MPP+体外构建PC12细胞帕金森病(PD)模型,将PC12细胞随机分为5组:对照组(Ctrl)、模型组(MDL)、TMP高浓度(250μg/L)组(TMP-H)、TMP中浓度(50μg/L)组(TMP-M)和TMP低浓度(10μg/L)组(TMP-L),每组3个复孔。TMP处理PC12细胞24 h后,250μmol/L MPP+诱导PC12细胞24 h制备PD细胞模型。用CCK-8法检测各组PC12细胞的细胞存活率,乳酸脱氢酶(LDH)法检测各组PC12细胞的LDH释放量,荧光显微镜摄片检测线粒体活性,Image J 1.53 r软件计算线粒体网络分支平均长度及网络分支数,JC-1法检测线粒体膜电位,Western blotting检测蛋白Bcl-2/Bax比值。结果与Ctrl组相比,MDL组PC12细胞存活率下降,LDH释放水平升高,线粒体膜电位(ΔΨm)及Bcl-2/Bax比值下降(均P<0.05);加入不同浓度的TMP后,与MDL组相比,TMP-H组和TMP-M组细胞存活率均上升,LDH释放水平降低,ΔΨm及Bcl-2/Bax比值增高(P<0.05),线粒体活性增加,线粒体网络分支平均长度及网络分支数量增多,拮抗膜电位降低(P<0.05),其中TMP-H组在拮抗膜电位的降低作用中更为明显。结论TMP对MPP+所致的PC12细胞损伤具有保护作用,可能是通过提高细胞存活率,降低LDH释放量,拮抗线粒体膜电位的降低,修复线粒体网络形态,从而减少细胞凋亡而实现的。

等离子体对松茸多糖抗疲劳作用的影响

为探究等离子体技术对松茸多糖抗疲劳作用的影响。以小鼠为对象,比较了等离子体处理与未处理松茸多糖的抗疲劳作用,通过力竭跑步实验评价小鼠抗疲劳能力相关指标。结果表明:等离子体处理后松茸多糖溶液的pH显著降低,Zeta电位值显著升高(P<0.05)。与对照组相比,灌胃150 mg/g等离子体处理的松茸多糖显著延长了小鼠力竭跑步时间(P<0.05),并显著提高了运动后小鼠机体的肌糖原和肝糖原含量(P<0.05),同时显著增加了乳酸脱氢酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性(P<0.05),显著降低了肌酸激酶活性和丙二醛含量(P<0.05)。研究表明,等离子体技术能够对松茸多糖进行适度改性,增强其抗疲劳作用。

松茸多糖的提取及生物活性研究综述

松茸作为一种名贵的食用真菌,因其味道鲜美而深受大家喜爱。松茸中含有许多活性成分,水溶性β-葡聚糖为其中的主要活性成分之一。鉴于目前对松茸研究的广泛性,综述松茸多糖的多种提取、分离纯化方法,并对其生物活性进行归纳与总结,旨在为后续松茸多糖的进一步深化研究提供参考。

松茸豆奶的配方优化及其稳定性研究

以大豆、奶粉、松茸多糖、葡萄籽提取物原花青素为主要原料,研制一款口感醇香细腻、具有抗氧化功效的新型植物豆奶饮料。采用单因素试验和正交试验确定松茸豆奶的最佳配方;采用响应面法对松茸豆奶稳定剂的复配进行优化。结果显示:在100 mL豆奶的基准上,最佳配方为松茸多糖溶液25 mL、葡萄籽提取物0.35%、全脂奶粉2.5%、白砂糖4%;最优稳定剂组合为复合增稠剂(黄原胶∶瓜尔豆胶∶羧甲基纤维素钠为4∶2∶3)0.05%、蔗糖脂肪酸酯0.10%、山梨醇酐单硬脂酸酯0.04%;其总固形物含量为10.5 g/100 g,蛋白质含量为1.703 g/100 g,脂肪含量为1.632 g/100 g。在该配方下研制出的松茸豆奶色泽均匀、口感醇香细腻、兼具抗氧化功效。

松茸多糖的结构与药理作用研究进展

松茸是一种珍稀的药食两用真菌,富含各种活性成分,具有多种药理功能,其中多糖作为其主要的活性物质,越来越受到研究者的关注,尤其是松茸多糖的结构和功能研究。高效凝胶渗透色谱、气相色谱-质谱联用、柱前衍生法、红外光谱、核磁共振和甲基化分析等技术的应用,使松茸多糖的相对分子质量、单糖组成和比例、糖残基构型、糖苷键的链接方式等结构得到解析,体内体外实验证实了松茸多糖的抗氧化、抗肿瘤、免疫调节、抗辐射、降血糖、美白等药理作用,作用机制也得到初步阐明。针对松茸多糖的研究现状,本文对松茸多糖结构和功能的近期研究进展进行了综述,并对松茸多糖的后续研究提出展望,为松茸多糖的开发利用和研究方向提供理论依据和新思路。

松茸多糖对乳酸菌发酵及酸奶品质的影响

以松茸多糖为研究对象,通过测定酸奶的滴定酸度、持水力、质构、乳酸菌活菌数、感官等指标,研究松茸多糖对保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌两种乳酸菌的发酵及酸奶品质的影响。结果表明:松茸多糖对乳酸菌的影响呈倒"U"型,松茸多糖添加量低于0.06%时,对乳酸菌有极明显的促生长作用(p<0.01),添加量为0.04%时促生长作用达到最佳;同时松茸多糖对乳酸菌产酸有一定的抑制作用,显著延长酸奶的后酸化过程;随着多糖浓度的增加,酸奶的持水力、质构以及感官均呈倒"U"型变化,在多糖添加量为0.04%时酸奶的品质达到最佳。结论:当松茸多糖添加量为0.04%时,松茸多糖对乳酸菌的促生长作用以及对酸奶品质的影响最佳。

响应面法优化松茸多糖酶法提取工艺及其体外抗氧化性分析

为确定复合酶(纤维素酶、果胶酶、中性蛋白酶)提取松茸多糖的最佳工艺,并对其体外抗氧化活性进行初步研究,在单因素试验的基础上,以料液比、pH值、酶解时间和酶解温度为影响因素,利用Box-Behnken方法进行四因素三水平试验设计,以多糖提取率为响应值,进行响应面分析;分别用邻苯三酚自氧化法和对DPPH自由基的清除作用测定松茸多糖的体外抗氧化性。结果表明:多糖提取的最佳工艺为料液比1∶40(g/mL)、pH 5、酶解温度35℃、酶解时间71 min,松茸多糖的提取率预测值为7.06%,验证值为6.95%,与预测值相对误差为1.56%;松茸多糖对超氧阴离子自由基和DPPH自由基具有较强的清除作用,其IC50值分别为0.565 mg/mL和0.454 mg/mL。因此,复合酶法提取松茸多糖高效、简单,可用作松茸多糖的提取工艺;松茸多糖具有明显的体外抗氧化活性。

松茸多糖对辐射损伤小鼠免疫功能的保护作用

目的探讨松茸多糖(PTM)对辐射损伤小鼠免疫功能的保护作用。方法90只健康雄性ICR小鼠随机分为正常对照组(NC)、照射对照组(IC)和PTM组,每组30只。PTM组小鼠给予1200 mg/kg剂量PTM灌胃,每天1次,连续7 d;第8天给予IC组和PTM组动物全身一次性照射,总剂量2.0 Gy。检测小鼠照射后第1、5、14天的脾指数、脾细胞对ConA诱导的增殖反应、巨噬细胞吞噬功能和抗体生成能力。结果与IC组比较,PTM组小鼠的脾指数、脾细胞对ConA的增殖反应、巨噬细胞吞噬功能和抗体生成能力均明显增强(P<0.01),且照射后第14天PTM组小鼠脾指数、脾细胞对ConA的增殖反应能力、巨噬细胞吞噬率和抗体生成能力与NC组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论松茸多糖对辐射所致的小鼠免疫功能损伤有明显的保护作用。

松茸多糖对X射线照射小鼠造血功能的保护作用

目的:探讨松茸多糖(PTM)对辐射损伤小鼠造血功能的保护作用。方法:将50只ICR小鼠随机分成5组,每组10只。正常对照组(NC)和辐射对照组(IC)给予生理盐水灌胃,3个剂量PTM组分别给予400、800和1200mg.kg-1剂量PTM灌胃,每天1次,连续7d。第8天给予IC组和PTM组动物进行全身一次性照射,总剂量2.0Gy,检测小鼠造血干细胞集落形成单位(CFU-S)数、骨髓基质细胞-成纤维祖细胞集落形成单位(CFU-F)数、骨髓细胞周期和骨髓微核率。结果:与IC组比较,预防给予PTM各组小鼠CFU-S数量明显减少(P<0.05或P<0.01)、骨髓CFU-F数显著升高(P<0.05或P<0.01),中、高剂量PTM组PCE微核的数量明显降低(P<0.05或P<0.01),G1期细胞数明显减少(P<0.05或P<0.01),S期细胞数明显增加(P<0.05或P<0.01)。结论:松茸多糖对辐射所致的造血损伤有明显的保护作用。

松茸多糖抗辐射功能的初步研究

预防给予小鼠松茸多糖(PTM),测定小鼠在受到2 Gy X线照射后,脾和胸腺重量、T淋巴细胞转化能力、外周血中白细胞数和肝组织中SOD、CAT、GSH-Px活性及MDA含量的变化,结果显示PTM处理组小鼠的各项指标与辐射对照组比较均有显著性差别,提示PTM可促进机体自由基的清除,增加机体抗氧化能力,对辐射所致的免疫损伤有明显的保护作用。

松茸多糖的分离纯化和美白功效研究

通过采用水提醇沉、三氯乙酸脱蛋白、分级醇沉等方法对松茸多糖提取物进行初步分离纯化,获得9个组分。用凝胶渗透色谱-十八角度激光散射联用系统和酪氨酸酶抑制法对9个组分的分子质量、多糖纯度和美白活性进行测定。通过纯度和美白功效选择最优的组分通过凝胶层析法分离纯化。结果表明,松茸多糖中分离得到TMSP-6Ⅱ,重均分子质量Mw=7.251×103D,纯度不小于95%,其具有良好的抑制酪氨酸酶活性,IC50值为136.4 mg·L-1。

Box-Behnken响应面分析法优化松茸多糖提取工艺

目的:优化松茸多糖的最佳提取工艺。方法:在单因素实验基础上,采用Box-Behnken设计方法,研究水提温度、水提时间、液料比及其交互作用对松茸多糖得率的影响,应用Design Expert软件和响应面分析相结合的方法,模拟得到回归方程的预测模型和可信度。结果:在试验范围内各因素对松茸多糖得率的影响程度从大到小依次是提取温度>提取时间>料液比,分析得到最佳的提取条件为:水提温度95.11℃,水提时间3.50h,液料比35.19∶1,多糖得率的预测值为12.65%,根据上述最佳提取条件微调后进行验证试验,测得松茸多糖平均得率为12.49%。结论:经过响应面法优化提取工艺,提高了提取效率,简单可靠,适用于松茸多糖的提取。

松茸多糖体外抗肿瘤活性研究

目的:研究松茸多糖的体外抗肿瘤活性。方法:采用MTT法结合显微镜下细胞形态学观察的方法,实验考察了不同浓度的松茸多糖作用不同时间对人舌癌细胞Tca8113、人肝癌细胞HepG-2、人胰腺癌细胞HS766T、人宫颈癌细胞Hela、人乳腺癌细胞MCF-7的增殖抑制作用及细胞形态的改变。结果:松茸多糖在低浓度时对HepG-2、HS766T的生长影响较小,但对Tca8113、Hela和MCF-7的抑制作用明显,随着浓度升高对5种肿瘤细胞的抑制作用都随之增强,并呈现出一定的量效关系及时间依赖性,在100μg.mL-1作用72 h对上述5种肿瘤细胞最大抑制率分别为67.71%,74.89%,83.83%,75.57%,76.15%。从细胞形态改变上观察,松茸多糖对上述5种肿瘤细胞均能引起不同程度的细胞凋亡。结论:松茸多糖具有较广的抗瘤谱,对体外培养的细胞有直接的细胞毒作用,其作用机理有待进一步深入研究。

松茸多糖提取方法、结构分析及生物活性研究进展

松茸是一种珍贵的食药用菌,营养丰富。含多糖、蒽醌类、酚类、三萜、甾醇等多种生物活性物质,具有抗氧化、抗肿瘤、抗衰老、抗辐射等多种生物活性。多糖是松茸重要的生物活性物质,具有广泛的药理活性,本文综述了松茸多糖的提取工艺、纯化、结构分析及生物活性,为松茸多糖保健品及药品的开发提供参考。

松茸多糖的提取纯化工艺研究

对松茸多糖提取工艺及纯化工艺进行了研究,通过正交试验得出当料水比1:12,温度95℃,提取时间3.5h时松茸多糖提取率最高,平均为3.05%。对Sevag试剂脱蛋白进行考察,以Sevag试剂脱蛋白6次能除去核酸和蛋白质。对粗多糖采用DEAE-SephadexG-25柱层析法进行了精制,得到单一洗脱峰,占总加样多糖(69μg)的41.71%,对该成份进行了红外扫描,显示有多糖吸收峰。

松茸多糖的分离与纯化

目的:研究松茸多糖的分离与纯化方法,筛选出松茸多糖脱蛋白、脱色的最佳方案。方法:以多糖损失率和脱蛋白率为考察指标,优化了脱蛋白工艺;以脱色前后溶液颜色的改变和多糖损失率为考察指标,优化了脱色工艺;通过D101大孔吸附树脂和Sephadex G-100凝胶滤过色谱对松茸多糖进行了分离纯化。结果:采用Sevag法脱蛋白和活性炭脱色效果较为理想,最终得到3个松茸多糖组分MTS-1、MTS-2、MTS-3。结论:该研究可为今后更深入地研究松茸多糖的结构特征和生物活性等提供依据。

松茸多糖成分分析

为研究松茸多糖中单糖成分,将松茸多糖水解产物进行甲基化反应,以气相色谱仪检测多糖水解产物.结果确定松茸多糖水解产物中的5种单糖:D-木糖,D-甘露糖,D-葡萄糖,D-半乳糖,D-葡萄糖醛酸,单糖摩尔比为1∶1.8∶326.5∶52.53∶28.83,可能含有D-阿拉伯糖.为深入研究松茸多糖提供了理论依据.

正交试验法优选松茸多糖的提取工艺

目的：筛选松茸多糖的最佳提取条件。方法：用水提取松茸多糖，以浸提温度、浸提时间、料水比和浸提次数为主要因素，采用L9（3^4）正交试验进行提取工艺的优化；用苯酚一硫酸法测定多糖含量后计算多糖得率。结果：影响松茸多糖提取的主要因素由大到小依次为浸提时间〉浸提次数〉浸提温度〉料水比。结论：通过正交试验及其验证试验确定的松茸多搪的最佳提取条件为：浸提时间3h，浸提温度90℃，浸提次数2次，料水比1：30，在此条件下，松茸多糖得率可达12．24％。

响应面法优化松茸菌丝体多糖超声波提取工艺及其抗氧化研究

采用响应面法优化超声波提取松茸菌丝体多糖的条件。在单因素试验的基础上,选取超声波时间、水料比和超声波功率为影响因子,应用Box-Behnken中心组合进行3因素3水平的试验设计,以菌丝体多糖得率作为响应值,进行响应面分析(RSM)。结果表明,超声波提取松茸菌丝体多糖的最佳提取条件为:菌丝体干粉0.1 g,提取时间223 s,超声波功率427 W,水料比69.7∶1(mL∶g),得率预测值14.52%,验证值为14.33%,与预测值的相对误差为1.29%,提取2次,得率为16.29%。对超声波提取松茸菌丝体多糖进行抗氧化性研究,结果表明,松茸菌丝体多糖对.O2-清除作用较好,最大清除率为19.32%;对.OH清除作用显著,最大清除率为88.24%。