金属颗粒对MG63细胞骨保护素/核因子-κB受体活化因子配体表达影响的研究

目的:探讨金属钴、铬颗粒对人成骨细胞系MG63细胞骨保护素(OPG)及核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)表达水平的影响。方法:将金属钴、铬颗粒与人成骨细胞系MG63细胞共培养,ELISA法检测细胞培养上清中OPG、RANKL水平,采用荧光定量PCR法检测OPG、RANKLmRNA表达水平。结果:培养后24、48h实验组RANKL蛋白与mRNA水平显著增加,与对照组相比差异有统计学意义;但OPG蛋白与mRNA水平虽然增加,但与对照组相比差异没有统计学意义;RANKL/OPG比值显著增加,与正常对照组相比差异有统计学意义。结论:金属钴、铬颗粒可以促进RANKL蛋白及RANKL mRNA表达,使RANKL/OPG比率增高,促进破骨细胞分化,从而使骨吸收增强。

超说明书使用重组活化因子Ⅶ需警惕安全性

重组活化因子Ⅶ(rfⅦa)将血友病的治疗带入了一个新的历史阶段.最初,rfⅦa获批用于存在凝血因子Ⅷ和Ⅸ抑制物的血友病患者的止血治疗.对于体内产生抑制物的患者,rfⅦa既可以直接产生治疗效果,也可以通过免疫机制发挥作用,因此,该药已成为血友病的一种重要辅助治疗药物.

升板合剂提升血小板作用的实验研究

目的:观察升板合剂的提升血小板作用,探讨升板合剂治疗原发性血小板减少性紫癜的作用机制。方法:用升板合剂每日1次给健康及60Co照射小鼠和家兔灌胃,检测动物外周血小板计数,出、凝血时间,骨髓巨核细胞分化及骨髓细胞增殖情况。结果:升板合剂可刺激骨髓细胞增殖,促进骨髓巨核细胞的分化与成熟,明显提升正常家兔和小鼠以及60Co照射所致血小板减少症动物模型的血小板计数,缩短小鼠出、凝血时间。结论:升板合剂对60Co照射所致血小板减少症动物模型有良好的保护作用。

炒紫苏子醇提物对血小板聚集活性的影响

目的:探讨炒紫苏子醇提取物对腺苷二磷酸(ADP)、花生四烯酸(AA)和血小板活化因子(PAF)诱导血小板聚集功能的影响。方法:用诱导剂ADP(终浓度3μmol/L)、PAF(终浓度7.2 nmol/L)、AA(终浓度0.35 mmol/L)分别激发血小板聚集,观察炒紫苏子醇提取物对血小板聚集的抑制作用。结果:炒紫苏子醇提取物体外能抑制由ADP、PAF和AA激发的兔血小板聚集,并表现明显的剂量依赖关系。其中,对PAF诱发的血小板聚集作用有更强的抑制作用,80mg/L就表现出明显的抑制作用(P<0.05);而对于ADP和AA激发的兔血小板聚集,640 mg/L炒紫苏子醇提取物表现出明显的抑制作用。结论:炒紫苏子醇提取物具有明显的抗血小板聚集作用。

药用植物扛板归抗菌活性研究

目的研究扛板归提取物的体外抗菌活性,确定其抗菌谱及最低抑菌浓度(MIC)。方法扛板归采用几种有机溶剂提取,研究其不同溶剂提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草杆菌、绿脓杆菌和变形杆菌的抗菌活性。结果扛板归75%乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、绿脓杆菌和变形杆菌均有较强的抑制作用,其MIC分别为5.0×10-2、10.0×10-2、10.0×10-2、5.0×10-2mg/mL。此外,扛板归乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物对枯草杆菌和绿脓杆菌均有较强的抑制作用。结论扛板归具有较强的抗菌活性,可以作为新的抗菌中药进行更深入地研究。

丹参酮对大鼠睑板腺上皮细胞增生、分化及脂质合成的影响

目的观察不同剂量丹参酮的2种主要单体成分隐丹参酮和丹参酮ⅡA对体外原代培养的SD大鼠睑板腺上皮细胞增生、分化及其脂质合成的影响。方法取清洁级2月龄SD大鼠,分离取出双眼睑板腺组织并与3T3滋养细胞共培养5d。隐丹参酮和丹参酮ⅡA用二甲基亚砜(DMSO)配制成不同浓度,按照培养液中添加的隐丹参酮和丹参酮ⅡA浓度不同将混合培养的细胞分为0.125μmol/L药物组、0.250μmol/L药物组、0.500μmol/L药物组、1.250μmol/L药物组和2.500μmol/L药物组,分别加入相应浓度的隐丹参酮或丹参酮ⅡA处理细胞48h,溶剂对照组仅加入相应体积的DMSO溶剂。采用免疫荧光染色法测定睑板腺组织冰冻切片和睑板腺细胞克隆细胞中角蛋白14(K14)和p63的定位和表达;采用实时荧光定量PCR法检测睑板腺细胞克隆中K16、细胞增生相关抗原(Ki67)及CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)的基因表达情况;采用结晶紫染色和油红O染色法分别评估睑板腺上皮细胞的克隆形成率和脂质合成情况。结果睑板腺细胞体外原代培养至第4~5天可见克隆形成,至培养第7天克隆面积明显增大,克隆细胞中p63和K14蛋白表达阳性。与溶剂对照组比较,0.500μmol/L隐丹参酮组、1.250μmol/L隐丹参酮组和2.500μmol/L隐丹参酮组Ki67mRNA相对表达量明显升高,0.500μmol/L丹参酮ⅡA组和1.250μmol/L丹参酮ⅡA组细胞中Ki67mRNA相对表达量明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.05);不同浓度隐丹参酮或丹参酮ⅡA组细胞中K16和C/EBPαmRNA相对表达量总体比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。睑板腺细胞克隆内未见油红O染色,克隆边缘交界处细胞团出现堆积状油红O阳性染色。1.250μmol/L隐丹参酮组睑板腺细胞平均克隆形成率为(2.55±0.20)%,高于溶剂对照组的(2.05±0.13)%,差异有统计学意义(t=4.379,P<0.05);1.250μmol/L丹参酮ⅡA组睑板腺细胞的平均克隆形成率为(2.25±0.20)%,与溶剂对照组比较差异无统计学意义(t=1.616,P>0.05)。结论隐丹参酮和丹参酮ⅡA可以促进睑板腺细胞增生,但不影响睑板腺上皮细胞的分化及脂质合成。隐丹参酮可促进睑板腺细胞体外克隆的形成。

丘脑网状核内一氧化氮能神经元对大鼠睡眠-觉醒周期的影响

目的研究丘脑网状核(RT)一氧化氮能神经元对大鼠睡眠-觉醒周期的影响。方法采用脑立体定位、核团埋管及微量注射和多导睡眠描记技术(PSG)。结果RT双侧分别微量注射一氧化氮合酶抑制剂左旋硝基精氨酸2·0μg后引起睡眠增多;注射一氧化氮的前体左旋精氨酸0·5μg后对睡眠有改变,但无显著性意义,其促觉醒作用未能被左旋硝基精氨酸所阻断;注射一氧化氮的供体硝普钠0·2μg后可明显增加觉醒时间,缩短睡眠时间,并且可以阻断左旋硝基精氨酸的促睡眠作用。结论RT参与大鼠睡眠-觉醒周期的调节,RT中的一氧化氮能神经元可能有促觉醒作用。

硫磺素T微孔板检测法筛选β-折叠蛋白聚集体亲和配体

目的采用硫磺素T微孔板检测法筛选亲和β-折叠蛋白聚集体的配体。方法将硫磺素T、β-折叠蛋白聚集体、配体混合后,置室温下孵育。在酶标仪96孔板内测定荧光强度,激发和发射波长分别为440、480 nm。计算实验组与对照组荧光强度的比率(I),筛选亲和配体。结果完成60个配体的检测。其中,有38个配体对Tau聚集体的I值小于1,有12个配体对Aβ_(1-42)聚集体的值小于1。结论硫磺素T微孔板检测法简便快捷,为相关蛋白聚集体亲和配体的初步筛选提供了有效工具。

高糖对系膜细胞产生纤维联接蛋白、Ⅳ型胶原及PAF的影响

目的探讨高浓度葡萄糖条件下，系膜细胞产生纤维联接蛋白、IV型胶原、血小板活化因子（PAF）的变化。方法人系膜细胞单独培养，分为对照组、甘露醇组、高糖组、BN52021组，ELISA法检测各组细胞上清液中纤维联接蛋白（Fn）、Ⅳ型胶原（Col Ⅳ）、PAF含量，实时荧光定量检测系膜细胞血小板活化因子受体（PAF-RmRNA）表达。结果高糖刺激下，系膜细胞培养上清液Fn和colⅣ含量升高（P均〈0．05），BN52021可抑制高糖刺激的Fn和colⅣ含量升高（P〈0．05）。高糖可引起系膜细胞培养上清液PAF含量升高（P均〈0．05）。高糖可上调系膜细胞PAF-R mRNA表达（P均〈0．05）。结论（1）高糖刺激系膜细胞Fn、ColⅣ、PAF产生，高糖刺激的Fn、Col Ⅳ分泌增加部分与PAF有关。（2）高糖可促进系膜细胞PAF-R基因表达，放大PAF的生物效应。

药靶分析利器——高容量筛选技术

支持者们相信高容量筛选技术的好处将会节省用以预测毒性或优化先导化合物的时间。