极大螺旋藻胞内多糖对体外肿瘤细胞抑制作用的实验研究

研究了极大螺旋藻(Spirulina maxima)胞内多糖对SMMC7721等肿瘤细胞系的生长及凋亡的影响。在体外培养条件下,用半抑制浓度(80,5 mg/L)的极大螺旋藻胞内多糖(IPSⅠ,IPSⅡ)处理肿瘤细胞,并用MTT,SRB,DNA ladder,AnnexinⅤ等方法测定。结果表明,IPSⅠ(80 mg/L)对SMMC7721,A549,HeLa,U251等肿瘤细胞系抑制率分别为64.97%、46.1%、43.3%、27.02%;IPSⅡ(5 mg/L)能诱导SMMC7721细胞凋亡。

Te(IV)对钝顶螺旋藻和极大螺旋藻的生物效应

研究了Te(IV)对Spirulinaplatensis和Spirulinamaxima两种螺旋藻的生物效应.结果表明,Te(IV)质量浓度在0 01～2mg/mL范围内对钝顶螺旋藻的生长有促进作用,且1mg/mL的Te(IV)促进作用最大,在此浓度范围内Te(IV)对极大螺旋藻生长影响则不明显;Te(IV)质量浓度大于32mg/mL时对两种螺旋藻均有抑制作用,其对钝顶和极大螺旋藻的半数有效质量浓度(96hEC50)分别为36 1mg/L和87 9mg/L.显微观察结果表明,当ρ[Te(IV)]≥100mg/L时,两种螺旋藻均出现严重的断裂和变形.

极大螺旋藻铁型超氧物歧化酶的纯化及性质

极大螺旋藻 Ｓｐｉｒｕｌｉｎａｍａｘｉｍａ藻体ＳＯＤ聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳呈现４条同工 酶带， Ｈ_ ２Ｏ_２明显抑制该酶活性， ＫＣＮ对酶活性无影响，确认为 Ｆｅ－ＳＯＤ经硫酸铵分部盐析、离子交 换柱层析及凝胶过滤，纯化到电泳单斑点均－程度．纯化的Ｆｅ－ＳＯＤ分子量为３９．３ＫＤ，亚基分子 量为２０ＫＤ金属元素分析表明，每个亚基含０ ５５个Ｆｅ原子，该酶在紫外区最大吸收峰值为 ２７５．８nｍ、该酶氨基酸组成与蓝、绿藻和高等植物的Ｆｅ－ＳＯＤ相似，但它含有较高的丙氨酸，酸性氨 基酸和碱性氨基酸比值与低等植物及原核生物相近而明显高于高等植物．

极大螺旋藻胞内多糖对人血癌细胞生长的影响

应用半固体琼脂培养法和ＭＴＴ法研究了极大螺旋藻胞内多糖对人血癌细胞Ｕ９３７和ＨＬ－６０的影响。实验结果显示，对体外生长的Ｕ９３７细胞有促进生长的作用，而对体外生长的ＨＬ－６０细胞有抑制生长的作用。提示极大螺旋藻胞内多糖对人的血癌细胞的生长有明显的影响。

天然和预处理的极大螺旋藻粉对铅的吸附

采用间歇批次实验的方法研究了极大螺旋藻作为吸附剂去除溶液中铅的可行性 ,以及天然及预处理的藻粉对铅离子的吸附作用和各种操作条件对铅离子吸附的影响。结果表明 ,pH值对吸附的影响较大 ,吸附量随 pH值的增高而增大 ,当 pH值为 5 5时吸附率最高。铅吸附的前 30min为快速吸附阶段 ,6 0min吸附即达平衡状态 ,吸附等温线符合Freundlich方程。单位藻重的铅吸附量随藻生物量的增加而降低 ,预处理生物量的吸附率明显高于天然生物量的吸附率。4种解吸液中 ,0 1mol·L-1的硝酸解吸率最高。

极大螺旋藻胞外多糖EPⅡ的分离、纯化及免疫学研究

极大螺旋藻培养液经浓缩，脱盐，醇沉得胞外粗多糖（ＥＰＩ）。ＥＰⅠ依次经ＤＥ－５２和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００纯化得纯品多糖（ＥＰⅡ）。经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００检测，ＥＰⅡ为均一组分，Ｍｒ６００００。薄层层析、气相层析、红外光谱分析表明，ＥＰⅡ是由Ｌ－岩藻糖，Ｄ－甘露糖，Ｄ－半乳糖，Ｄ－葡萄糖和葡萄糖醛酸组成的酸性杂多糖，糖苷键为β型。免疫调节活性试验表明，ＥＰⅡ有提高小鼠的ＮＫ细胞杀伤活力，促进ＩＬ－２产生及淋巴细胞和混合淋巴细胞转化功能。

极大螺旋藻藻蓝蛋白性质的研究

用凝胶电泳、吸收光谱、荧光光谱、示差扫描量热计（ＤＳＣ）和循环伏安法研究了极大螺旋藻（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａｍａｘｉｍａ）藻蓝蛋白的性质，结果表明：该蛋白由大小两个亚基组成，分子量分别为１９ＫＤ和１７ＫＤ。吸收光谱显示，该蛋白在３４８ｎｍ和６２０ｎｍ有吸收峰。其荧光发射峰位于６４６ｎｍ。该蛋白的热变性温度范围在４０℃～５４℃附近。该蛋白的循环伏安扫描曲线显示，当扫描速度为０．１Ｖ／ｓｅｃ时，有一个明显的氧化峰。当扫描速度大于０．２Ｖ／ｓｅｃ时。

极大螺旋藻富积重金属机理的研究

于1993年5月由南京大学藻类培养室提供极大螺旋藻藻种，用Zarrouk培养基培养后，用活藻体和甲醛杀死的藻体分别进行吸附实验；过滤出的藻体置于6×10－3g／L左右浓度的Co2+，Ni2+，Cu2+，Zn2+离子混合液中。结果显示，死、活藻体都具有相似的吸附能力，对Co2+，Ni2+，Zn2+的富积大于203倍，对Cu2+的富积大于185倍；用热水提取、DEAE-纤维素D-23柱和SephadexG－200柱纯化后，获得了纯细胞外壁多糖，其分子量为52kD。将该糖溶液盛在透析袋内，并置于4种离子混合液中进行吸附实验，结果显示，核糖对Co2+，Ni2+，Cu2+，Zn2+的富积倍数分别达1744，1644，1340，1750。藻体和多糖对Co2+，Ni2+，Zn2+的吸附都高于对Cu2+的吸附。比较藻体与多糖对4种离子的吸附结果可见，藻体对离子的吸附主要是多糖的作用；多糖的红外光谱显示，金属离子改变OH和CO－NH的吸收峰，表明这两种基团与金属离子发生了络合作用；对Cu2+的络合滴定测定表明，Cu2+与多糖的结合度为0．40。

极大螺旋藻多糖对5种人肿瘤细胞株生长的影响

目的 :观察极大螺旋藻多糖对人回盲肠癌HCT 8、神经胶质瘤U2 5 1、宫颈癌HeLa、肝癌SMMC772 1、肺癌A5 49细胞株生长的影响。方法 :体外培养条件下用不同浓度的极大螺旋藻胞内、胞外多糖处理这 5种癌细胞 ,同时处理人正常胚肝LO 2细胞 ,并用SRB检测法测定。结果 :极大螺旋藻胞内、胞外多糖对离体培养的宫颈癌HeLa、肝癌SMMC772 1、肺癌A5 49等肿瘤细胞均有明显的生长抑制作用 ,并存在浓度剂量效应 ,高浓度抑制作用强 ;而对离体培养的人正常胚肝LO 2细胞的生长影响较弱。结论 :极大螺旋藻多糖能选择性地识别并杀伤癌细胞 ,值得进一步研究。

Se(Ⅳ)对钝顶和极大螺旋藻生长的影响

采用藻类生长动力学函数和藻类测试化学品毒性的标准方法,分别研究了高、低质量 浓度Se(Ⅳ)对钝顶(S．platensis)和极大(S．maxima)螺旋藻生长的影响,结果表明:低质量浓度组 中,Se(Ⅳ)的质最浓度低于16 mg/L时对钝顶螺旋藻前4 d的生长影响差异无显著性意义,但当质 量浓度为32 mg/L时出现明显的抑制作用;而低质量浓度范围内,即质量浓度低于32 mg／L的Se (Ⅳ)在前4 d对极大螺旋藻的生长的影响不明显．高质量浓度组中,当质量浓度高于560 mg/L时, 钝顶螺旋藻的生长被完全抑制;硒对极大螺旋藻的最低完全抑制质量浓度为600mg／L．

极大螺旋藻(Spirulina maxima)对六种重金属离子的生物吸附作用

研究了极大螺旋藻(Spirulinamaxima)对Ag+、Cu2+、Mn2+、Ni2+、Pb2+和Zn2+等六种重金属离子的吸附作用.结果表明在pH5.5,吸附时间2h,重金属离子浓度为50mg/l的条件下,极大螺旋藻对六种重金属离子均有较强的吸附作用,其中对Ag+的吸附作用最强,吸附率为92.87%;对Ni2+的吸附作用最弱,吸附率为40.70%.极大螺旋藻对这6种离子的吸附能力依次为Ag+>Pb2+>Zn2+>Cu2+>Mn2+>Ni2+.

高浓度CO_2对极大螺旋藻生长和光合作用的影响

以极大螺旋藻作为实验材料 ,研究了高CO2 浓度对极大螺旋藻的生长和光合作用效应 ,结果表明在高光强下 (40 0 μmolm- 2 s- 1 ) ,高浓度CO2 对其生长和光合作用有明显的影响 ,高浓度CO2 培养下 ,螺旋藻的比生长速率是低浓度CO2 培养的 1 2倍 ;而在低光强下 ,高浓度CO2 对其生长和光合作用无明显影响。两种不同CO2 浓度和光强下培养的极大螺旋藻 ,在不同的生长时期 ,分别测定其P -I曲线 ,结果表明低光强下培养的极大螺旋藻 ,在 5d、8d、1 1d ,两者的Ik、α值均无显著差异 ,Pmax在第 5d、1 1d差异不显著 ,但在第 8d有显著差异。而在高光强培养条件下 ,第 8、1 1d通高浓度CO2 培养的极大螺旋藻 ,其Pmax、α值明显大于通低浓度CO2 培养的极大螺旋藻 ,但两者在第 5d无明显差异。

极大螺旋藻多糖IPⅡA、IPⅡB的理化特性及抗肿瘤活性研究

极大螺旋藻（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａｍａｘｉｍａ）经碱性热水抽提，酶解和Ｓｅｖａｇ法结合脱蛋白，醇沉淀得胞内多糖ＩＰⅠ．ＩＰⅠ经ＤＥ－５２和ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－２５柱层析得到组分多糖ＩＰⅡＡ和ＩＰⅡＢ，糖含量分别为７４．９％和６８．４％，ＩＰⅡＡ分子量为１．３×１０６，ＩＰⅡＢ分子量为５．０×１０５．以完全酸水解、薄层层析、气相层析、红外光谱、核磁共振氢谱对二者进行化学结构分析，证明均为酸性杂多糖；ＩＰⅡＡ糖苷键为α型，ＩＰⅡＢ中同时存在α和β型糖苷键．离体条件下，ＩＰⅠ与血癌细胞ＨＬ６０和Ｕ９３７分别共同培养，半固体琼脂培养法检测，结果表明，ＩＰⅠ对二者的作用具有选择性，同时ＩＰⅠ的促进和抑制作用均表现出一般药物所具有的剂量效应．

极大螺旋藻的硒富集化培养研究

为得到大量含有机硒的极大螺旋藻(Spirulina maxima),以生物量和藻体内硒富集量作为指标,研究不同硒添加量和硒添加方式对极大螺旋藻生长及富硒效果的影响。结果表明,分8d等量(100μL)多次添加100μg/mL Na2S eO3溶液,是最佳添加量和添加方式,可得到生物量为0.903g/L,单位干藻粉有机硒含量为1413.168μg/g的富硒极大螺旋藻。

在高强度光照胁迫下极大螺旋藻两种抗氧化酶活力变化的研究

作者研究了极大螺旋藻在20000lx,40000lx和100000lx光照下,分别经2h,4h,6h培养后,其超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性的变化,结果发现:SOD的活性在不同光照胁迫强度及不同胁迫时间下,总体上呈现出先增加,后下降的变化趋势,且在经2h胁迫后,SOD活性都大于正常光照所产生的变化.经同工酶电泳检测发现,经2h胁迫后不仅SOD的表达量增加,而且出现了一种新的同工酶带.过氧化氢酶则在和SOD酶的相同测定环境下,其活性呈现出先下降,后略微上升的变化过程,但光照胁迫条件下的CAT活性,都低于螺旋藻正常生理条件下的CAT的活性.

极大螺旋藻多糖的分离、纯化及其抗氧化特性的研究

对极大螺旋藻(Spirulina maxima)用热水抽提、脱蛋白、醇析得粗多糖,再经DEAE-Sephadex A-25柱层析纯化得到2个组分的多糖精品(SPSⅠ和SPSⅡ),分别经Sephadex G-150柱层析鉴定为单一组分,它的紫外可见光谱只出现195.00nm的单峰。在体外设计产生超氧阴自由基(O_2^+)、脂质自由基(R·)和羟自由基(OH·)等3个体系,分别加入2个组分不同浓度的多糖,结果表明:极大螺旋藻多糖具有显著的清除OH·的活性(P<0.05),但对O_2^+没有显著作用(P>0.1);在低浓度条件下(2.5×10^(-4)g/L),它们可以清除R·(P<0.05),SPSⅠ比SPSⅡ的活性显著;在较高浓度下清除R·的活性有所降低(P>0.2)。说明极大螺旋藻多糖的显著抗氧化作用主要表现在清除活性氧中最活泼的OH·方面。

培养条件对极大螺旋藻胞内和胞外多糖含量的影响

极大螺旋藻胞内和胞外多糖的含量与培养条件有关。在营养盐中 ,Na HCO3和 Na NO3浓度减少 ,胞内多糖含量也减少。硝酸钠浓度减少还使胞外多糖含量增加 ;K2 HPO4 和 Na Cl浓度变化对藻的胞内和胞外多糖含量也有影响。培养液的 p H维持在 8.0和培养 9d后的藻的胞内和胞外多糖含量均最高。

LD和YAG激光对极大螺旋藻生理特性的影响

采用Nd :YAG和LD激光辐射极大螺旋藻。Nd :YAG激光波长λ =5 32nm ,功率P =5 0 0mW ,功率密度S =16 0mW cm2 ,辐照 10min ,λ =10 6 0nm ,功率P =7W ,功率密度S =35 .84mW cm2 ,辐照 2 0s;Nd :YAG激光 (λ =5 32nm)辐照 10min ,再用LD激光 (波长λ=6 5 0nm ,功率P =40mW功率密度S =13mW cm2 )辐照 2 0min。实验结果表明 ,所设计的三种实验方案均能促进极大螺旋藻生长、β 胡萝卜素积累和胞外多糖含量的增加 ,且波长 5 32nm的Nd :YAG激光的促进作用最明显 ,它可使 β 胡萝卜素提高 14.31% ,胞外多糖含量增加 19.12 %。红外光谱分析表明 。

高浓度CO_2培养条件下极大螺旋藻光抑制研究

以极大螺旋藻作为实验材料 ,研究了不同 CO2 浓度培养对螺旋藻光抑制和恢复的影响 ,结果表明由光抑制导致的光合速率下降 ,高浓度 CO2 比低浓度 CO2 培养程度小 ,在高浓度 CO2 条件下培养的极大螺旋藻 ,虽然在强光下也表现出光抑制 ,但与低浓度 CO2 相比 ,光合速率下降得较慢。这种现象在强光与弱光培养均存在 ,但强光培养时更明显。光抑制后的恢复实验表明 ,不同 CO2 浓度培养的极大螺旋藻 ,光系统 光化学活性 (Fv/Fm)在弱光下恢复较好 ,高光强、高浓度 CO2 培养的藻 ,恢复速度稍快 ;而在黑暗中 ,几乎没有恢复 ;在弱光和含氯霉素的条件下 Fv/Fm均下降。由此可见 ,高 CO2 浓度可减轻极大螺旋藻的光抑制 ,但对其光抑制后的恢复影响不大。