林荫银莲花组培苗生根培养基的优化

以药用植物林荫银莲花不定芽组培苗为试验材料,研究培养基添加不同植物激素、不同质量浓度蔗糖和活性炭对组培苗生根的影响。结果表明:以1/2 MS为基本培养基,添加0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA,30 g/L蔗糖作为碳源,另加入1.0 g/L活性炭,培养55 d后,林荫银莲花组培苗的生根率为93.9%,平均根条数为10.5,根长最长达1.73 cm,根较粗且褐化轻微。

珍稀中药材林荫银莲花花粉粒形态观察及核型分析

目的观察林荫银莲花花粉形态特征并确定其染色体数目和倍性,为揭示其不同地域的居群差别提供资料,为药物的孢粉学鉴定和细胞学鉴定提供依据。方法应用扫描电子显微镜观察花粉的形态,采用常规压片法观察根尖的染色体。结果林荫银莲花的花粉粒形态为扁球形,具有6-7个萌发沟,表面有小刺状纹饰,还有一些微小的小孔;花粉大小:极轴长度为17.96-22.95μm,赤道轴长度为21.75-28.05μm。染色体基数为7,核型公式为2n=2x=12m+2 t(sat)。结论林荫银莲花是银莲花属系统演化中处于中间地位的一个物种,偏向于原始类群。

覆盖栽培和苗期施氮对林荫银莲花生长、根茎产量和药用成分的影响

目的:探究覆盖栽培和苗期施氮对林荫银莲花生长、根茎产量和药用成分的影响,为建立林荫银莲花适宜人工栽培技术提供试验依据。方法:以2~3 cm长的林荫银莲花根茎切段为播种材料,设置露地栽培、单层遮阳网覆盖栽培2种栽培模式与苗期施氮和不施氮组合,共4个处理。在花期测定株高、叶长、叶宽和叶片SPAD值,倒苗期测定根茎产量,并采用紫外分光光度法测定人工栽培和野生植株根茎总皂苷含量,采用高效液相色谱法分析根茎W3单体含量和化学指纹图谱。结果:单层遮阳网覆盖栽培和苗期施氮均可促进林荫银莲花植株生长,提高收获期根茎产量以及根茎总皂苷和W3单体含量。在覆盖栽培和苗期施氮下林荫银莲花根茎药用成分组成与野生品无明显差异。结论:以根茎切段为播种材料,采用单层遮阳网覆盖栽培并在苗期追施氮肥的种植模式适宜于林荫银莲花大规模人工种植。

林荫银莲花总皂苷中W_3在大鼠体内的药代动力学研究

目的:测定蜈蚣三七总皂苷中有效成分W3在大鼠体内的药代动力学参数。方法:采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法,大鼠ig给药后,以蜈蚣三七提取物中主要有效成分W3为指标进行测定。结果:W3血药浓度在1.56～50mg/L范围内线性关系良好,回归方程为Y=5.85X+11.69,r=0.9987(n=3);W3三种浓度的平均回收率及相对标准偏差分别为86.44%(4.22%),92.48%(5.84%),81.97%(9.32%);W3在大鼠体内的药代动力学过程符合一室吸收模型,主要药动学参数为t1/2=(2.99±0.35)h,T(peak)=(2.14±0.27)h。结论:建立了蜈蚣三七有效成分W3血药浓度的HPLC测定方法,阐明了蜈蚣三七提取物的药动学参数,方法的专属性强,结果可靠。

林荫银莲花不定芽增殖培养基的优化

为提高林荫银莲花(Anemone flaccida Fr.Schmidt)不定芽繁殖系数,对其组培快繁体系进行优化。以林荫银莲花无菌苗为外植体,研究了培养基中激素、碳源、添加物和矿质元素钙等组分对其不定芽增殖和生长状况的影响,得出最佳的不定芽增殖培养基配方。以1/2 Ca浓度MS为固体培养基,激素为1.0 mg/L 6-BA和1.0 mg/L NAA,蔗糖或食用白糖30 g/L,水解酪蛋白为添加物,浓度为750 mg/L,培养30 d后繁殖系数可达4.01,大幅提高了不定芽的增殖速度和质量,为工厂化生产林荫银莲花种苗奠定了基础。

林荫银莲花组织培养研究

目的研究林荫银莲花Anemone flaccida组织培养技术,为保护与合理利用这一珍稀中药资源提供新的方法和技术途径。方法筛选适合组织培养的最佳外植体,并研究不同植物生长调节物质对林荫银莲花愈伤组织诱导和芽分化的影响。结果在MS培养基中添加2.0 mg/L 6-BA和1.0 mg/L NAA,在温度17℃条件下培养有利于愈伤组织诱导和芽的分化;生长健壮的芽为最佳外植体,其愈伤组织诱导率可达85.7%,且易分化形成不定芽和拟球茎;在1/2 MS+0.2 mg/L NAA培养基上,5℃条件下培养,再生拟球茎和不定芽生根良好。结论本研究为林荫银莲花种苗繁殖提供了有效途径,为其人工扩大栽培奠定了良好基础。

蜈蚣三七的化学成分及免疫抑制活性

目的:研究毛茛科银莲花属植物林荫银莲花(Anemone flaccida Fr.Schmidt)的根茎蜈蚣三七的化学成分。方法:利用硅胶柱和C18色谱柱进行分离纯化,根据理化性质和光谱数据鉴定化合物的结构。MTT法评价各化合物的免疫抑制活性。结果:分离并鉴定了5个化合物:St-G0-2(Ⅰ),hemsgiganosides B(Ⅱ),anhuienosides E(Ⅲ),hederasaponin B(Ⅳ)和flaccidoside Ⅱ(Ⅴ)。化合物Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ对体外淋巴细胞增殖有抑制作用。结论:化合物Ⅰ,Ⅱ,Ⅳ为首次从银莲花属植物中分离得到,化合物Ⅲ为首次从林荫银莲花中分离得到。化合物Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ具备免疫抑制活性。

蜈蚣三七总皂苷对胶原性关节炎小鼠炎症细胞因子的影响

目的观察蜈蚣三七总皂苷对胶原性关节炎(CIA)小鼠炎症细胞因子的影响,探讨其免疫作用机制。方法建立Ⅱ型胶原诱导的CIA小鼠模型,随机分为蜈蚣三七总皂苷组(104 mg/kg)、阳性对照组(雷公藤甲素66μg/kg)、模型组、正常组,致炎7 d后各组均开始灌胃给药,连续4周,光镜下观察各组动物足趾关节的病理变化,ELISA法检测CIA小鼠血清中白介素(IL)-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-12及γ-干扰素(IFN-γ)的水平。结果蜈蚣三七总皂苷可明显减轻关节软骨细胞和滑膜增生,抑制炎性细胞浸润。与模型组比较,蜈蚣三七总皂苷可明显提高IL-4、IL-10及IL-12的分泌水平(P<0.01),降低IL-6和IFN-γ的分泌水平(P<0.01),对IL-2的表达无明显影响。结论蜈蚣三七总皂苷通过调节细胞因子含量,纠正Th1/Th2的失衡状态,在防治CIA中发挥免疫调节的作用。