林麝白介素-2在毕赤酵母中的表达

克隆林麝(Moschus.berezovskii)白介素-2(interleukin-2,IL-2)到酵母表达载体pPIC9K,SalⅠ酶切后转化毕赤酵母GS115,G418抗性筛选高拷贝克隆,再由酵母菌落PCR鉴定;阳性克隆用甲醇诱导表达,SDS-PAGE分析,结果在诱导至第6d的酵母上清浓缩液中,检测到与预测林麝IL-2分子量相接近的,分子量约为18Ku的诱导表达带;TRIzol提取表达期间的酵母总RNA,并通过RT-PCR扩增IL-2mRNA,发现表达期的重组酵母细胞中存在IL-2mRNA,而对照没有检出,表明林麝IL-2存在低水平的表达。