外源ACC对龙须菜(Gracilariopsis lemaneiformis)果孢子放散的生理影响及转录组分析

龙须菜(Gracilariopsis lemaneiformis)是我国产量第二大的养殖海藻,以龙须菜为材料,分别添加5种浓度的1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC),探究了其对龙须菜果孢子放散的作用,结果发现250μmol/L的ACC促进果孢子放散效果最佳。外源添加250μmol/L的ACC后,第2天和第5天龙须菜光合作用进一步下降,第5天后超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、谷胱甘肽还原酶(GR)活性以及还原型抗坏血酸(AsA)含量显著上升,表明龙须菜果孢子的放散还和抗氧化系统密切相关。转录组结果显示ACC处理后第5天光合作用相关基因表达量下调,糖酵解通量增加,TCA循环和氮代谢途径的基因表达量显著上调;外源ACC显著上调了茉莉酸合成途径相关基因的表达,但对乙烯合成途径相关基因无显著影响。研究结果验证了ACC促进龙须菜果孢子放散的作用,为龙须菜的快速繁育提供了新的技术支撑。

不同光质对坛紫菜果孢子和壳孢子萌发的影响

本研究探究了白、蓝、红、绿光4种光质对坛紫菜(Pyropia haitanensis)果孢子和壳孢子萌发的影响。结果表明,与白光相比,用绿光培养时,果孢子萌发管分枝形成速度、萌发管生长速度,以及壳孢子的细胞分裂速度均相对较快,用红光与蓝光培养时则相对较慢。不同光质对坛紫菜果孢子和壳孢子的存活率无显著影响,但能造成萌发体色泽呈现明显差异。刚从孢子囊释放出来的两种孢子均呈黄褐色,经白光培养的两种孢子以及蓝光培养的果孢子,其萌发体颜色加深至鲜红色,蓝光培养的壳孢子萌发体颜色加深尤为明显,最终呈深紫红色,而红光和绿光培养的两种孢子颜色变浅,最终呈浅黄褐色。研究表明,绿光培养可能不利于坛紫菜孢子萌发过程的色素积累,但有利于孢子萌发及萌发体的生长。

水流和光照条件对舌状蜈蚣藻Grateloupia livida(Harv)Yamad果孢子萌发生长的影响

在不同水流和不同光照条件下,分别对舌状蜈蚣藻Grateloupia livida(Harv)Yamad果孢子萌发情况展开研究,以期为其苗种生产奠定基础。舌状蜈蚣藻果孢子在附着1 d、15 d后,置于不同水流速度(0、1、1.5、4、7、10、14 cm/s;1.5 cm/s流速由充气控制,其他流速由流水装置控制)培养20 d;舌状蜈蚣藻果孢子附着1 d后,在不同光照周期(6L∶18D、8L∶16D、10L∶14D、12L∶12D、14L∶10D、16L∶8D)和不同光照强度(35、85、135μmol photons/m^2·s)交叉条件下培养70 d。结果显示,附着1 d的果孢子萌发体在静止条件下的萌发生长明显优于其他水流速度下的(P<0.05);附着15 d的果孢子萌发体在1.5 cm/s流速下的萌发生长最好(P<0.05),在静止条件下的萌发生长明显慢于其他流速下的各组(P<0.05)。光照周期和光照强度对果孢子萌发生长的影响显著(P<0.05),这二者对盘状体和孢苗生长的影响具有交互作用(P<0.05),对盘状体萌发出直立体的影响没有交互作用(P>0.05)。光照时间为8–10 h,盘状体萌发直立体的百分率以及孢苗的高度明显高于其他光照时间下的各组。光照强度为35μmol photons/m^2·s时,盘状体萌发直立体的百分率以及孢苗的高度明显比其他光照强度下的高。研究表明,在舌状蜈蚣藻育苗生产中,可采取孢子刚附着时静水培养,附苗后15 d充气培养,并控制光照时间为8–10 h和光照强度为35μmol photons/m^2·s。

温度、光照强度和盐度对海柏果孢子放散与附着的影响

在实验室条件下,研究了不同温度、光照强度和盐度对海柏（Polyopes polyideoides）果孢子的放散及附着的影响。结果表明：温度10~26℃的条件下,海柏果孢子均能够完成放散附着;18℃时,海柏果孢子放散附着速度最快且总量最大,而当温度低于5℃或者高于30℃时,海柏果孢子的放散附着受到抑制,几乎不放散附着;海柏果孢子放散附着的适宜光照条件为80？mol/（m2·s）,光照强度过高时海柏果孢子的放散附着明显受到抑制;盐度为22~36之间利于果孢子的放散附着,当盐度低于8,高于40的时候,海柏果孢子由于受到了盐胁迫,几乎不放散及附着。

条斑紫菜果孢子的液氮保存

随着生物工程学的发展,在超低温下(-196℃)保存生命有机体变得越来越重要。在超低温下生命活动几乎停止,变异的频率降到很低的程度,可以提供稳定的种质。超低温保存生物体不需大量人力和物力,也不需要巨大的空间,是种质保存的一种好形式。Finkle,B.J.等报道,到1985年止,至少有40多种高等植物的组织、器官或细胞培养物在-196℃冷冻保存而不失去活力。

温度及光照强度对日本角叉菜(Chondrus nipponicus Yendo)果孢子放散与附着的影响

以日本角叉菜(Chondrus nipponicus Yendo)成熟雌配子体为材料,在实验室条件下,研究了不同温度和光照强度对其果孢子放散与附着的影响.结果表明:温度和光照强度对果孢子的放散附着均有显著影响,温度为15℃、光照强度为50μmol/(m2·s)时,果孢子放散附着量最大,温度低于8℃或高于22℃、光照强度低于30μmol/(m2·s)或高于80μmol/(m2·s)时,果孢子的放散附着受到明显抑制.

两种江蓠果孢子的融合研究

本研究以真江蓠(Gracilaria asiatica Zhang et Xia)和龙须菜(Gracilaria sjoes-tedtii Kylin)两个不同物种为材料,探索了果孢子的融合方法和条件。由成熟囊果的藻体经阴干刺激后,放散出大量果孢子。两个物种的果孢子在大小和颜色上都有差异。对这两个物种的果孢子用PEG—高Ca^(++)高pH法诱导融合,首次获得成功,融合细胞能再生成杂种植株。

影响龙须菜果孢子体形成内外因素的初步研究

龙须菜是中国重要的人工栽培海藻,主要用途是琼胶生产原料和鲍鱼饵料。目前龙须菜大规模栽培采用的是人工夹苗的方式,而其孢子采苗的生产方式也得到越来越多的关注。本文将人工培育的由四分孢子萌发长成的一对龙须菜雌、雄配子体进行受精,测试了雌雄配子体藻枝部位、温度、硝酸盐浓度等因素对果孢子体形成过程的影响,结果表明:龙须菜雌配子体藻枝的不同等级分枝表现出不同的生殖力,一级分枝最尖端新生细胞的成熟速度快于其它等级;温度对果孢子体形成有极显著影响(P<0.01),20℃为最适温度;硝酸盐浓度没有显著影响。

越南紫菜果孢子放散规律及壳斑藻的培育初步研究

报导了越南紫菜果孢子的放散规律及其壳斑藻的培育情况,并对该种紫菜的人工移植进行了初步探讨。

温度、光强和盐度对舌状蜈蚣藻果孢子放散与附着的影响

舌状蜈蚣藻(Grateloupia livida)是一种具有较高食用和药用价值的经济红藻。本文比较了不同温度(10,15,20,25,30℃)、光照强度(0,20,60,120,200μmol.m-2.s-1)及盐度(8,16,24,32,40)条件对舌状蜈蚣藻果孢子的放散及附着的影响。实验结果表明,舌状蜈蚣藻果孢子放散的最适宜温度为20℃,光照强度为120μmol.m-2.s-1,适宜盐度24～40;果孢子附着的最适宜温度为20℃,光照强度为60μmol.m-2.s-1,适宜盐度为24～40。温度及光照条件对果孢子的放散具有显著影响,在20℃、120μmol.m-2.s-1条件下放散量最大,低温(10℃)以及黑暗条件下可以显著抑制果孢子的放散;中、高盐度(24,32,40)条件下,果孢子放散没有显著差异,而在低盐度(8,16)条件下,果孢子的放散量显著减少。温度和光照对舌状蜈蚣藻果孢子的附着均存在显著影响,在20℃和60μmol.m-2.s-1下果孢子附着数量最多,在10℃,30℃和黑暗条件下附着数量最少;在低盐度(8,16)海水中果孢子的附着受到抑制,在中、高盐度(24,32,40)海水中果孢子的附着没有明显差异。

满江红孢子果空间诱变效应的研究 Ⅰ.高空条件对不同品系满江红孢子果生长发育的影响

研究了高空条件对不同品系满江红孢子果诱变的效应 ,结果表明 :高空处理对不同品系满江红孢子果的萌发率有明显的影响 ,但未出现遗传变异的突变体。经生育期观察 ,高空处理的 19号满江红品系生长速率明显提高 ,且表现出一定的耐荫性。

满江红孢子果空间诱变效应的研究 Ⅱ空间条件对不同品系满江红耐荫性的影响

研究了高空条件对不同品系满江红孢子果诱变的效应 ,结果表明 ,高空处理对不同品系满江红孢子果的生长发育有明显的影响[1] ,在生物学观察测定的基础上引入生化测定方法 ,探讨不同光照条件下经高空处理与留地对照满江红 3个品系体内多酚氧化酶 (PPO)活性变化趋势。其结果再次表明 ,光照影响各满江红品系的生长速率 ,随着光照强度的减弱 ,各品系的生长速率都下降 ,但在低光照下 ,经高空处理的 19H品系其体内PPO活性明显高于其它品系 ,同样的也比留地对照的同一品系 19CK高 13.8% ,充分说明经高空处理后的 19H品系耐荫性得到明显提高 。

满江红大孢子果萌发与成苗期间蕨-藻共生关系的电镜观察

用电镜揭示了小叶满江红(Azolla microphylla)的大孢子果萌发与成苗期间满江红鱼腥藻(Anabaena azollae)孢子与宿主建立共生关系的过程。发现大部分藻孢子首先与幼孢子苗发生的多细胞腺毛结合,之后进入第一片真叶叶腔,并继续按照同样的方式被转移到相继形成的真叶叶腔或分支茎尖。萌发的鱼腥藻孢子只在孢子苗的茎尖区域或叶腔中观察到,其萌发模式与自生鱼腥藻相似。92％萌发的满江红鱼腥藻孢子附着或靠近腺毛。这些腺毛呈现出分泌型传递细胞的结构特征。由此推测藻孢子从腺毛获得某种刺激萌发的化学信息或促进细胞增殖的营养物质。藻孢子萌发形成的营养细胞在叶腔中分化出固氮的异形胞,从而开始了新的共生世代。

满江红鱼腥藻在羽叶满江红大孢子果内的去向及其超微结构的变化(英文)

用激光共聚焦扫描图象系统（ＬＣＳＩＳ）和透射电镜追踪和表征满江红鱼腥藻在发育中的满江红孢子果内的去向及其超微结构的变化。进入满江红孢子果的鱼腥藻营养细胞连锁体与孢子果的长轴大体呈平行状态，并活跃排列，最后形成鱼腥藻营养细胞群体。该群体占据了整个孢子果果腔（由囊群盖围合而成）和大孢子囊（或小孢子囊）周围一切可用的间隙。当果腔开口闭合时，部分营养细胞开始了向厚垣孢子分化的进程。在孢子果发育中期，果腔内的营养细胞连锁体都变成了外部形态类似于厚垣孢子的细胞链。从营养细胞向厚垣孢子的分化经历了细胞质重组和膜系统重排等一系列超微结构的变化。诸如多角体（Ｃａｒｂｏｘｙｓｏｍｅ）、藻蓝素颗粒、核糖体和类囊体之类的细胞内含物在数量、大小、形状和分布等方面随着厚垣孢子本身及其宿主孢子果发育进程而改变。文章还讨论了共生藻与自生蓝藻在厚垣孢子分化模式与超微结构特征的异同及其意义。

满江红结孢期间鱼腥藻侵染孢子果的新观察

用扫描电镜观察了小叶满江红、蕨状满江红和墨西哥满江红的内生藻对宿主孢子果的侵染及动向。发现有两种形态与大小不相同的鱼腥藻细胞链紧靠着孢子囊原基周围的表皮毛。大部分的藻丝借助于表皮毛，从发育中的孢子果顶端小孔进入孢子果。但藻丝从孢子果基部小孔入果的可能性也不能排除。正在发育的孢子果内外可见到仍在活跃分裂的鱼腥藻营养细胞。甚至在接近成熟的大孢子果的囊群盖内层细胞中偶尔也能见到营养细胞。尚未取得营养细胞在进入孢子果前即已分化为厚垣孢子的证据。

萍藻重组研究Ⅱ、应用孢子果技术获得萍藻重组成功

应用去除藻体细胞的老熟或萌动的大孢子果直接加入同种或异种红萍大孢子果的鱼腥藻,取得了重新组合,其成功率达10％。重新组合的萍藻,第一步经显微镜观察、固氮酶活性测定,结果表明,重新组合的大孢子果萌发出来的红萍体内具有鱼腥藻;第二步采用单克隆抗体检测验证,确认为萍藻重组成功,其组合为细绿无萍藻×小叶萍鱼腥藻、细绿无藻萍×墨西哥萍鱼腥藻、小叶无藻萍×细绿萍鱼腥藻、细绿无藻萍×细绿萍鱼腥藻。小叶无藻萍×小叶萍鱼腥藻。

红毛菜大面积立体采果孢子苗技术

红毛菜(Bangia fusco-purpurea)属经济海藻,福建省莆田市自80年代采用平面采苗方式育苗,曾获得每串贝壳(20壳)丝状体日放散壳孢子516.2万粒效果。但该方法费工又费时,占池面积大.采苗时间长,育苗成本高。90年代初进行小规模(27 m2)的立体采苗试验,每串日放散壳孢子206万粒,试验效果一般,且规模小。满足不了日益发展的生产需求。为此,笔者于1999年进行了大规模(540 m2)室内立体采苗技术研究,获得预期效果。现将该技术总结如下:

坛紫菜（Porphyra haitanensis）果孢子在液氮中保存的初步研究

初步研究了坛紫菜(Porphyra haitaneusis)果孢子在液氮(-196℃)保存后的存活率及萌发率。试验表明，甘油和脯氮酸在冷藏中作为低温保护剂是不适用的，二甲基亚砜(DMSO)有效，且以10％浓度为最佳。加入该种浓度DMSO，采用快速降温法，短期冷藏(一小时到五天)，孢子的存活率在25～30％。进行培养试验表明，生存下来的孢子萌发率为50％左右，接近未经冷藏的正常孢子的萌发率，而且幼苗生长健壮。

满江红孢子果形成期蕨-藻共生关系的电镜观察

前文提及,有关鱼腥藻如何进入宿主孢子果这一涉及蕨-藻共生关系的重要问题目前还不清楚。作者用扫描电子显微镜对满江红孢子果形成期,鱼腥藻与宿主相互关系的全过程进行了观察,试图从形态学、解剖学上揭示这一发育过程中,满江红-满江红鱼腥藻的共生关系。