固定化磷脂酶Lecitase~ Ultra催化合成果糖月桂酸单酯的研究

利用固定化磷脂酶Lecitase Ultra在脱水叔戊醇中催化合成果糖月桂酸单酯。对该酶法合成果糖单酯反应体系进行了优化,考察了加酶量、酸糖摩尔比、分子筛添加量、糖浓度和时间等几个影响酯化反应的因素。结果表明:在4 mL反应体系中,固定化磷脂酶Lecitase Ultra添加量25 g/L、酸糖摩尔比4:1、果糖250 mmol/L、分子筛添加量100 g/L、43℃下反应48 h果糖月桂酸单酯的转化率达到69.45%。

果糖月桂酸单酯的分离纯化及其表面性质研究

利用毕赤酵母展示的南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarctica lipase B,CALB)催化合成了果糖月桂酸单酯,研究了两步法萃取分离纯化的影响因素,优化条件下果糖月桂酸单酯萃取率接近90%,产品纯度超过95%。研究考察了果糖月桂酸单酯的理化性质,其亲水亲油平衡值(HLB值)为5.775,临界胶束浓度(CMC值)为0.25 mmol/L,临界表面张力γ为24.22 mN/m,表明其在较低浓度下能较好地改变溶液的表面性质。比较了制备的果糖月桂酸单酯与商购的蔗糖月桂酸单酯的起泡性与乳化性,结果表明:在低浓度下,果糖月桂酸单酯起泡能力和泡沫稳定性优于蔗糖月桂酸单酯,乳化能力和乳化稳定性与蔗糖月桂酸单酯相近。

果糖月桂酸单酯的分离纯化及鉴定

采用硅胶柱层析色谱对叔戊醇中固定化磷脂酶Lecitase Ultra催化合成的果糖月桂酸单酯进行分离纯化。确定了薄层层析(TLC)条件,并通过反相-高效液相色谱-蒸发光散射检测(RP-HPLC-ELSD)测定柱层析纯化产物的纯度。利用液质联用(HPLC-ESI-MS)、红外光谱(FT-IR)和13C核磁共振(13CNMR)对目标产物进行确认,鉴定目标产物为酯化位点在1位和6位的果糖月桂酸单酯,四种异构体如下:1-月桂酸-β-D-吡喃果糖单酯、1-月桂酸-α-D-吡喃果糖单酯、1-月桂酸-β-D-呋喃果糖单酯和6-月桂酸-β-D-呋喃果糖单酯,且1-月桂酸-β-D-吡喃果糖单酯的比例最高。