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应用果蝇胚胎细胞表达系统分泌表达猪干扰素α的试验
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作者 周玉岩 梁剑平 张志清 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2012年第9期29-33,I0001,共6页
干扰素作为一类具有多种生物学功能的细胞因子,已经在人类疾病的防治中得到广泛应用。在兽药行业,大量的临床试验证明了干扰素激活免疫系统快速、广谱的有效性,但干扰素蛋白的活性和使用成本一直是制约其在兽药中应用的重要因素。为了... 干扰素作为一类具有多种生物学功能的细胞因子,已经在人类疾病的防治中得到广泛应用。在兽药行业,大量的临床试验证明了干扰素激活免疫系统快速、广谱的有效性,但干扰素蛋白的活性和使用成本一直是制约其在兽药中应用的重要因素。为了探索人工重组的干扰素在兽医临床上应用的可行性,本文应用果蝇胚胎细胞表达系统筛选出了稳定表达猪干扰素α(rPIFNα)的细胞系,利用Western blot分析了细胞筛选前后的分泌蛋白的表达情况.结果显示,稳定表达细胞系的rPIFNα表达量较高,通过细胞试验证实,分泌表达的rPIFNα具有较强的抗病毒作用。本研究首次利用果蝇胚胎表达系统稳定表达猪干扰素,对干扰素在临床上应用是一个有益的尝试。 展开更多
关键词 猪干扰素α 果蝇胚胎细胞表达系统 分泌表达 抗病毒
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以果蝇表达载体系统构建可稳定表达抗菌性多肽Trappin-2的S2细胞株
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作者 赵秀玲 何金生 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第5期576-576,共1页
目的采用果蝇S2表达系统,构建可与S2细胞基因组整合的分别含有Trappin-2和EGFP的重组质粒,筛选出两种抗性稳定可表达Trappin-2和EGFP的多克隆S2细胞株,为后期研究Trappin-2黏膜佐剂等生物学活性奠定基础。方法首先对pMT/Bip/V5-His A果... 目的采用果蝇S2表达系统,构建可与S2细胞基因组整合的分别含有Trappin-2和EGFP的重组质粒,筛选出两种抗性稳定可表达Trappin-2和EGFP的多克隆S2细胞株,为后期研究Trappin-2黏膜佐剂等生物学活性奠定基础。方法首先对pMT/Bip/V5-His A果蝇表达载体进行改造,去掉pMT/Bip/V5-His A的Bip信号肽,改造成为pMT/V5-His A,采用RT-PCR方法从A549细胞中得到含信号肽的、完整的Trappin-2基因,在引物的5'端引入NotⅠ酶切位点及Kozak序列;引物的3'端引入XhoⅠ酶切位点和双终止密码子。利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pMT/V5-His A中,得到重组表达质粒pMT-Trappin-2(简称pMT-T2)真核表达载体。为了观察、比较转染效率和表达水平,同时构建了带有增强型绿色荧光蛋白(EG-FP)的载体pMT/V5-His A-EGFP(简称pMT/EG-FP)。采用脂质体介导的转染技术将鉴定正确的两种质粒pMT-T2和pMT-EGFP分别与抗性筛选质粒pCoHygro(简称pro)共转入果蝇S2细胞中,用含有300 mg/ml潮霉素B的完全培养基进行筛选,经过3~4周,筛选出两种抗性稳定多克隆S2细胞株,用终浓度为500μmol/L的CuSO4诱导表达48 h后,分别通过荧光显微镜、RT-PCR和Western blot分析目的蛋白在S2细胞中的表达水平。结果采用RT-PCR方法从A549细胞中得到Trappin-2基因,通过NotⅠ和XhoⅠ双酶切位点将Trappin-2克隆入改造好的pMT/V5-His A载体上,构建了pMT-T2和pMT-EGFP质粒,应用脂质体转染技术将真核表达载体和抗性筛选质粒pro共转染果蝇S2细胞,通过潮霉素B反复筛选,3~4周后,成功筛选到两种稳定的抗性多克隆细胞株,分别命名为S2-Trappin-2和S2-EGFP,用CuSO4分别诱导两个细胞株,在荧光显微镜下可观察到S2-EGFP主要表现为胞浆绿色荧光,RT-PCR结果证实Trappin-2在S2细胞中可稳定表达,Western blot分析S2-Trappin-2细胞培养上清可见分子量约10 ku的特异性条带,成功建立可稳定高表达Trappin-2和EGFP蛋白的果蝇S2细胞系。结论成功克隆了Trappin-2基因,并利用果蝇表达系统筛选到可分别稳定表达Trappin-2和EGFP的S2细胞株。S2-Trappin-2稳定表达细胞株的建立为进一步研究Trappin-2生物学特性、黏膜佐剂作用及在肺部感染等疾病中的应用奠定了基础。 展开更多
关键词 真核表达载体 果蝇表达系统 Trappin-2 蛋白 增强型绿色荧光蛋白 S2细胞
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f3b基因表达下调斑马鱼胚胎中枢神经系统olig-2、Huc的表达观察
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作者 周瑞芳 陈宜刚 +2 位作者 李晓洁 刁爱芹 于敏 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第35期42-44,共3页
目的观察f3b基因表达下调斑马鱼胚胎中枢神经系统少突胶质细胞转录因子2(olig-2)、神经系统特异表达RNA结合蛋白(Huc)的表达情况。方法将单细胞阶段的斑马鱼胚胎随机分为两组(胚胎数量分别为90枚和85枚),分别注射针对f3b起始密码区域序... 目的观察f3b基因表达下调斑马鱼胚胎中枢神经系统少突胶质细胞转录因子2(olig-2)、神经系统特异表达RNA结合蛋白(Huc)的表达情况。方法将单细胞阶段的斑马鱼胚胎随机分为两组(胚胎数量分别为90枚和85枚),分别注射针对f3b起始密码区域序列的吗啡啉反义核苷酸(ATG-MO)和作为标准对照的随机序列吗啡啉反义核苷酸(CON-MO)。在CON-MO注射后的斑马鱼胚胎中随机挑选20枚受精后24 h的胚胎作为对照组,在ATG-MO注射后出现特异表型的斑马鱼胚胎中随机挑选20枚受精后24 h的胚胎作为实验组,通过原位杂交的方法检测两组斑马鱼胚胎中枢神经系统olig-2、Huc。结果实验组、对照组斑马鱼胚胎中枢神经系统olig-2表达评分分别为(1.9±0.4)、(5.6±0.5)分,两组比较,P<0.01。实验组、对照组斑马鱼胚胎中枢神经系统Huc表达评分分别为(6.3±0.6)、(6.5±0.3)分,两组比较差异无统计学意义。结论 f3b基因表达下调斑马鱼胚胎中枢神经系统olig-2表达减弱、Huc表达无明显变化。 展开更多
关键词 f3b基因 斑马鱼胚胎 少突胶质细胞转录因子2 神经系统特异表达RNA结合蛋白
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人干扰素IFNα-2b在果蝇细胞中的稳定表达 被引量:3
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作者 孙浩 梁布锋 《生命科学研究》 CAS CSCD 2007年第2期143-146,共4页
以人干扰素IFNα-2b全长基因的质粒为模板,PCR扩增,PCR产物克隆到表达载体获得重组质粒,经转染和筛选,得到稳定表达的果蝇S2细胞株.经CuSO4诱导表达并对表达产物进行检测,结果显示,在果蝇S2细胞中成功地进行了人干扰素IFNα-2b的蛋白表... 以人干扰素IFNα-2b全长基因的质粒为模板,PCR扩增,PCR产物克隆到表达载体获得重组质粒,经转染和筛选,得到稳定表达的果蝇S2细胞株.经CuSO4诱导表达并对表达产物进行检测,结果显示,在果蝇S2细胞中成功地进行了人干扰素IFNα-2b的蛋白表达,表达产物的大小约为26kD.并且,通过体外的抗病毒活性测定,证明所表达蛋白具有抗病毒活性.该研究为进一步利用该系统表达真核细胞蛋白,研究其结构和功能提供了重要的基础. 展开更多
关键词 人干扰素IFNα-2b 果蝇S2细胞 果蝇表达系统 稳定表达
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人分泌性白细胞蛋白酶抑制剂在果蝇细胞中的稳定表达及鉴定 被引量:1
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作者 阚学通 何金生 《广西医学》 CAS 2014年第1期10-12,共3页
目的:在果蝇S2细胞中表达人分泌性白细胞蛋白酶抑制剂( SLPI )并对其生物学性质进行初步测定。方法以A549细胞RNA为模板,利用反转录PCR方法扩增得到SLPI蛋白的编码序列,并将其克隆到表达载体pMT/V5-His A中,构建pMT/V5-SLPI 表达... 目的:在果蝇S2细胞中表达人分泌性白细胞蛋白酶抑制剂( SLPI )并对其生物学性质进行初步测定。方法以A549细胞RNA为模板,利用反转录PCR方法扩增得到SLPI蛋白的编码序列,并将其克隆到表达载体pMT/V5-His A中,构建pMT/V5-SLPI 表达质粒,通过与抗性筛选质粒pCoHygro 共转染S2细胞,经潮霉素B筛选3~4周,得到能够稳定表达SLPI蛋白的多克隆细胞系。经CuSO 4诱导表达后,用RT-PCR及Western blot分析SLPI基因的转录和表达。结果获得了抗性稳定的多克隆S2细胞株S2/SLPI,CuSO4诱导后,RT-PCR证明SLPI在S2/SLPI细胞中能高效转录,Western blot 在细胞培养上清中检测到表达的重组SLPI蛋白。结论在果蝇S2细胞中成功表达了人SLPI,SLPI的成功表达为进一步开展SLPI促进免疫应答及其在抗病毒感染等方面的作用研究提供了重要基础。 展开更多
关键词 分泌性白细胞蛋白酶抑制剂 果蝇表达系统 稳定表达
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猪圆环病毒2型结构蛋白Cap在果蝇S2细胞中稳定表达与鉴定的研究
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作者 马凯凯 张琦 +4 位作者 胡高维 常兴妮 杨建设 丁艳平 李志勇 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第11期164-167,共4页
为了表达猪圆环病毒2型(PCV-2)结构蛋白Cap并检测其表达情况,试验采用果蝇S2细胞真核表达的方法,通过扩增PCV-2 Cap蛋白的编码基因,与昆虫细胞表达载体pMT/Bip/V5-HisA连接构建重组表达载体pMT/Bip/V5-HisA-Cap,用重组表达载体与筛选质... 为了表达猪圆环病毒2型(PCV-2)结构蛋白Cap并检测其表达情况,试验采用果蝇S2细胞真核表达的方法,通过扩增PCV-2 Cap蛋白的编码基因,与昆虫细胞表达载体pMT/Bip/V5-HisA连接构建重组表达载体pMT/Bip/V5-HisA-Cap,用重组表达载体与筛选质粒pCoHygro共转染S2细胞,再使用选择性培养基加压筛选出稳定的细胞株,表达Cap融合蛋白后,利用SDS-PAGE及Western-bolt研究表达产物的抗原性。结果表明:融合蛋白的分子质量约为31 ku,该蛋白能够与带有V5标签的抗体结合,说明PCV-2 Cap蛋白能在S2细胞中正确表达,并具有良好的抗原性。 展开更多
关键词 真核表达系统 果蝇s2细胞 PCV-2 Cap基因 融合表达 亚基因工程疫苗
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嗜凤梨果蝇(Drosophila ananassae)细胞系的建立及其生物学特性初步观察 被引量:9
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作者 洪鹰 曾庆韬 《湖北大学学报(自然科学版)》 CAS 2003年第2期144-147,共4页
为建立真核基因表达受体系统,以嗜凤梨果蝇胚胎为材料,采用常规方法获取发育4~8h的果蝇胚胎细胞,以改良M3(BF)培养液体外培养,经40d左右的原代培养后行传代培养,以后每隔7d传代一次,传至10代时按照细胞系建立标准检测细胞系的一系列生... 为建立真核基因表达受体系统,以嗜凤梨果蝇胚胎为材料,采用常规方法获取发育4~8h的果蝇胚胎细胞,以改良M3(BF)培养液体外培养,经40d左右的原代培养后行传代培养,以后每隔7d传代一次,传至10代时按照细胞系建立标准检测细胞系的一系列生物学特性.结果显示:细胞维持体外生长将近1年,传至60代.细胞在接种的0~96h内呈指数生长,临界增殖浓度为1.0×106个(细胞) mL.部分细胞染色体呈现异倍化.经液氮冻存的细胞复苏后活性达90%以上.该细胞系是一株成功的细胞系,命名为HY-ANA. 展开更多
关键词 嗜凤梨果蝇 细胞 生物学特性 真核基因表达受体系统 细胞培养 原代培养 传代培养
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果蝇CYP6G1真核表达及其对新烟碱类杀虫剂的体外代谢 被引量:1
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作者 邵晨 施雨 +3 位作者 朱语彤 程家高 李忠 须志平 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期190-199,共10页
【目的】CYP6G1是黑腹果蝇Drosophila melanogaster体内重要的P450酶,其底物谱广泛,除了介导黑腹果蝇对DDT的抗性之外,还与其对新烟碱类和氨基甲酸酯类杀虫剂的抗性密切相关,但目前CYP6G1的代谢功能与黑腹果蝇抗药性之间的因果关系还缺... 【目的】CYP6G1是黑腹果蝇Drosophila melanogaster体内重要的P450酶,其底物谱广泛,除了介导黑腹果蝇对DDT的抗性之外,还与其对新烟碱类和氨基甲酸酯类杀虫剂的抗性密切相关,但目前CYP6G1的代谢功能与黑腹果蝇抗药性之间的因果关系还缺乏一些直接证据。【方法】本研究通过建立Bac-to-Bac昆虫杆状病毒真核表达系统,功能性地表达了果蝇细胞色素P450酶CYP6G1,以吡虫啉为阳性对照,利用超高效液相色谱(ultra-performance liquid chromatography,UPLC)和超高效液相色谱串联质谱(ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)分析CYP6G1对噻虫啉和噻虫嗪的体外代谢情况。【结果】孵育2 h后,重组CYP6G1能够羟基化吡虫啉和噻虫啉,使它们的含量分别减少17.6%±7.1%和4.2%±2.3%;重组CYP6G1可以促进噻虫嗪转化为噻虫胺,使噻虫嗪含量减少5.8%±2.1%。【结论】本研究结果为果蝇CYP6G1的结构功能研究提供一定理论依据。 展开更多
关键词 黑腹果蝇 细胞色素P450 CYP6G1 Bac-to-Bac昆虫杆状病毒表达系统 功能研究 杀虫剂 体外代谢
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制备诱导多能干细胞的分子系统
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作者 刘浏 马晴雯 《中国医药生物技术》 2013年第1期53-57,共5页
诱导多能干细胞(inducedpluripotentstemcells,iPSCs)在形态学特征、表面抗原、基因表达模式及表观遗传状态等方面与胚胎干细胞(embryonicstemcells,ESCs)类似,注射裸鼠后也同样可以在体内形成含有3个胚层的畸胎瘤,甚至能像ESC... 诱导多能干细胞(inducedpluripotentstemcells,iPSCs)在形态学特征、表面抗原、基因表达模式及表观遗传状态等方面与胚胎干细胞(embryonicstemcells,ESCs)类似,注射裸鼠后也同样可以在体内形成含有3个胚层的畸胎瘤,甚至能像ESCs一样通过四倍体补偿技术获得具有生殖能力的活体小鼠。 展开更多
关键词 多能干细胞 分子系统 制备 基因表达模式 形态学特征 胚胎细胞 表面抗原 表观遗传
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人RP2基因在果蝇胚胎细胞中的表达 被引量:2
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作者 葛广韬 邓可京 +2 位作者 王谨 陈伟丽 乔守怡 《复旦学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期497-499,503,共4页
将质粒pJLA503中的RP2编码cDNA用PCR的方法扩增,并与pIND-3myc质粒上的人c-myc编码 序列连接到果蝇转基因载体pUAST上,构建了UAS-RP2-3myc和UAS-RP2(del6)-3myc... 将质粒pJLA503中的RP2编码cDNA用PCR的方法扩增,并与pIND-3myc质粒上的人c-myc编码 序列连接到果蝇转基因载体pUAST上,构建了UAS-RP2-3myc和UAS-RP2(del6)-3myc融合 质粒.用脂质体转染的方法,将质粒导入果蝇培养细胞系Schneider line2(S2),并用PCR 加以证实,然后通过Western blot检测证明了RP2和RP2 del6的表达.证明了人的 RP2基因在果蝇细胞中表达的可能性,说明果蝇系统是可以用来分析人的RP2基因功能 的. 展开更多
关键词 人RP2基因 SCHNEIDER line2细胞 果蝇 WESTERN blot杂交 胚胎细胞 基因表达 人类基因组计划
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Tet-on基因表达系统转染胚胎干细胞和调控效应检测
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作者 王彦 丛笑倩 +4 位作者 刘德莉 张文杰 崔磊 刘伟 曹谊林 《中国科学(C辑)》 CSCD 北大核心 2005年第3期192-195,共4页
以荧光素酶基因为目的基因,应用Lipofectamine介导的瞬时转染方法,将pTet-on调控质粒和pTRE2hyg-luciferase表达质粒共转染小鼠胚胎干细胞,滴加系列浓度的DOX后,观察其诱导效应.结果显示,随DOX浓度升高,荧光素酶的活性也逐渐增强;而未... 以荧光素酶基因为目的基因,应用Lipofectamine介导的瞬时转染方法,将pTet-on调控质粒和pTRE2hyg-luciferase表达质粒共转染小鼠胚胎干细胞,滴加系列浓度的DOX后,观察其诱导效应.结果显示,随DOX浓度升高,荧光素酶的活性也逐渐增强;而未转染细胞与转染细胞未加诱导剂时,其RLU值均接近空白对照.表明转染Tet-on基因表达系统的胚胎干细胞对DOX诱导有较好的反应性,目的基因的表达与DOX具有严格的剂量依赖关系. 展开更多
关键词 基因表达系统 调控效应 小鼠胚胎细胞 检测 荧光素酶基因 目的基因 转染细胞 表达质粒 诱导效应 依赖关系 共转染 诱导剂 反应性 LU值 浓度
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P21基因参与早期诱导RUNX1b过表达抑制人类造血发生
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作者 常晶 滕嘉雯 +10 位作者 孙文翠 曾加辉 张勇刚 潘旭 周涯 赖默温 边国慧 周琼秀 刘嘉馨 陈波 马峰 《中国输血杂志》 CAS 2019年第3期222-227,共6页
目的探究细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1[CDKN1A(P21)]对造血发生过程的影响。方法对RUNX1b诱导过表达hES细胞系(RUNX1b/hESC)与小鼠主动脉-性腺-中肾区(AGM)基质细胞AGM-S3共培养4 d细胞,使用多西环素(DOX)(1μg/mL)与RepSox(0.33μmol... 目的探究细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1[CDKN1A(P21)]对造血发生过程的影响。方法对RUNX1b诱导过表达hES细胞系(RUNX1b/hESC)与小鼠主动脉-性腺-中肾区(AGM)基质细胞AGM-S3共培养4 d细胞,使用多西环素(DOX)(1μg/mL)与RepSox(0.33μmol/L)或不同浓度DOX(1、0.5、0.2、0.1μg/mL)诱导RUNX1b过表达时,以qRT-PCR技术检测P21与RUNX1b相对表达情况。利用基于转座子载体PiggyBac的PB-tet-on-OE真核诱导过表达系统,建立P21诱导过表达hES细胞系(CDKN1A/hESC)。分别在CDKN1A/hESC与AGM-S3共培养d0、d2、d4、d6添加DOX诱导P21过表达,培养8 d或14 d,通过流式细胞术(FACS)检测血细胞表面分子的变化情况,以判断诱导P21过表达对造血发生产生的影响。结果 qRT-PCR显示:P21表达量随着RUNX1b过表达上调,同时加入RepSox时表达基本处在正常水平,随着DOX浓度降低,RUNX1b与P21表达水平下降。在造血分化的早期,特别是共培养d0开始诱导P21过表达的共培养体系所产生的CD34^-CD43^+、CD34^-CD45^+与CD34^+CD45^+细胞群相较于对照分别降低了85%,94%和78%,当共培养d6后诱导P21过表达上述现象消失。结论 P21可能参与了由RUNX1b诱导过表达所引起的人类早期造血发生的抑制效应;早期诱导P21过表达明显抑制造血细胞产生。 展开更多
关键词 细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂[CDKN1A(P21)] 多西环素(DOX) 真核诱导过表达系统 胚胎细胞(hESC) 主动脉-性腺-中肾(AGM)基质细胞 造血发生
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人类胚胎干细胞特异表达新基因HPESCRG1的克隆和特性分析 被引量:4
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作者 杜娟 林戈 +1 位作者 乜照燕 卢光琇 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2004年第6期542-547,共6页
目的克隆一个人类胚胎干细胞特异表达的新基因并对其特性进行分析。方法从一个在人类胚胎干细胞(embryonicstem,ES)中特异表达的表达序列标签CF948547出发,应用生物信息学方法和分子生物学技术克隆一个新基因,采用逆转录-聚合酶链反应... 目的克隆一个人类胚胎干细胞特异表达的新基因并对其特性进行分析。方法从一个在人类胚胎干细胞(embryonicstem,ES)中特异表达的表达序列标签CF948547出发,应用生物信息学方法和分子生物学技术克隆一个新基因,采用逆转录-聚合酶链反应分析新基因的表达谱,并应用增强型绿色荧光蛋白真核表达系统分析新基因的亚细胞定位。结果成功克隆了一个新基因HPESCRG1,GenBank登录号为AY283672。该基因cDNA长1395bp,包含9个外显子和8个内含子,开放阅读框为250~1146bp,定位在3q13.13,预测编码297个氨基酸,预计分子量为33784,等电点为9.35。其编码蛋白有一个SAP功能域,该蛋白定位在细胞核内。该基因仅在人类ES细胞中表达,而在其分化细胞不表达,在人胚胎成纤维细胞、人间充质干细胞、成人和流产胚胎的多种正常组织中不表达。结论HPESCRG1基因是一个人类ES细胞中表达特异性新基因,很可能与人类ES细胞的自我更新和维持其未分化状态密切相关。 展开更多
关键词 新基因 特异表达 人类胚胎细胞 克隆 正常组织 类ES细胞 计分 分化细胞 内含子 真核表达系统
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Wnt信号通路与神经发生 被引量:14
14
作者 张建 胡远兵 +1 位作者 杨忠 蔡文琴 《解剖科学进展》 CAS 2005年第3期258-260,264,共4页
W nt通路是细胞增殖分化的关键调控环节,在胚胎发育和肿瘤发生中起着重要作用。W nt途径参与了基因表达调节、细胞迁移粘附、细胞极化等过程,同时还与其它信号通路存在交叉协同。W nt/β-caten in通路在进化过程中高度保守,此通路的主... W nt通路是细胞增殖分化的关键调控环节,在胚胎发育和肿瘤发生中起着重要作用。W nt途径参与了基因表达调节、细胞迁移粘附、细胞极化等过程,同时还与其它信号通路存在交叉协同。W nt/β-caten in通路在进化过程中高度保守,此通路的主要分子构成及相关调控机制已得到基本阐明。对神经系统而言,已有足够证据显示此通路参与了对神经前体细胞增殖,分化以及决定细胞命运的调控。近年更有研究显示,W nt/β-caten in途径对神经系统的发育包括皮层模式建立,突触形成等也是至关重要的。 展开更多
关键词 WNT信号通路 神经发生 β-catenin 细胞增殖分化 基因表达调节 胚胎发育 神经系统 WNT通路 WNT途径
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单细胞测序在血液系统疾病诊断和治疗中的研究进展 被引量:2
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作者 杨夏婉 孙恺 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期443-446,共4页
目前广泛应用的二代测序(NGS)技术,是基于整个细胞群体的分析,不能观察细胞的异质性.单细胞测序(single cell sequencing,SCS)则是在单个细胞水平上,对基因组或转录组进行扩增并测序,以检测单核苷酸位点变异(SNV)、基因拷贝数变异(CNV)... 目前广泛应用的二代测序(NGS)技术,是基于整个细胞群体的分析,不能观察细胞的异质性.单细胞测序(single cell sequencing,SCS)则是在单个细胞水平上,对基因组或转录组进行扩增并测序,以检测单核苷酸位点变异(SNV)、基因拷贝数变异(CNV)、单细胞基因组结构变异、基因表达水平、基因融合、单细胞转录组的选择性剪切、单细胞表观基因组的DNA甲基化状态等[1].SCS可实现在单细胞水平对疾病和生物学过程中的遗传学特征进行研究,包括早期胚胎发育、肿瘤发生和发展的分子学机制、肿瘤的异质性和进化过程、循环肿瘤细胞(CTC)和克隆演变等[2-4]. 展开更多
关键词 疾病诊断 细胞 测序 血液系统 治疗 结构变异 基因表达水平 早期胚胎发育
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In vitro assay system for primordial germ cell development
16
作者 Ikuma Maeda Yasuhisa Matsui 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2009年第10期1125-1126,共2页
In mammalian embryos, primordial germ cells (PGCs) are induced in proximal epiblast by BMP signals expressed in extraembryonic tissues , and one of the most important downstream key players is Blimpl . Blimpl is kno... In mammalian embryos, primordial germ cells (PGCs) are induced in proximal epiblast by BMP signals expressed in extraembryonic tissues , and one of the most important downstream key players is Blimpl . Blimpl is known to act as a sup- pressor of somatic genes' expression in PGC specification process. It is assumed that there are still many unidentified molecules involved in PGC development. However, to analyze gene functions in mammalian embryos by generating knockout animals is labor-intensive, and a more concise way to efficiently identify genes regulating PGC development is desirable. 展开更多
关键词 原始生殖细胞 检测系统 哺乳动物胚胎 基因敲除 发育 体外 劳动密集型 组织表达
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Expression of the neuronal nitric oxide synthase in neurons of the central nervous systems during mice embryogenesis
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作者 YipingXu MinjianKong ShucaiLing 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2004年第3期403-403,共1页
关键词 神经细胞一氧化氮合酶 神经原 表达 中枢神经系统 小鼠 胚胎发生
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免疫生物学
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《国外科技资料目录(医药卫生)》 1999年第5期17-19,共3页
9915733 母体免疫系统与循环中的胚胎细胞间的相互作用/Bonney E A∥J Im.munol.-1997,158(1).-40~47四军大 9915734 扁桃体的免疫学/Perry M∥Immunol Today.-1998,19(9).-414~421 北医图 9915735 淋巴器官内中枢神经系统和免疫系统... 9915733 母体免疫系统与循环中的胚胎细胞间的相互作用/Bonney E A∥J Im.munol.-1997,158(1).-40~47四军大 9915734 扁桃体的免疫学/Perry M∥Immunol Today.-1998,19(9).-414~421 北医图 9915735 淋巴器官内中枢神经系统和免疫系统间的相互作用/Straub R H∥Im-munol Today.-1998,19(9).-409~413 北医图 R392.11 免疫分子生物学(免疫化学)9915736 通过一种小G蛋白的过度表达提供的存在两条MHCⅡ类分子限制的抗原呈递途径的新证据/Briken V∥J Im-munol.-1997,159(10).-4653~4658 展开更多
关键词 相互作用 抗原呈递 中枢神经系统 过度表达 免疫化学 母体免疫系统 分子生物学 胚胎细胞 淋巴器官 免疫学
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干细胞分化的可控性在神经细胞移植中的研究进展 被引量:1
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作者 孙旭芳 项红兵 招伟贤 《中华器官移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期446-447,共2页
关键词 细胞分化 细胞移植 胚胎细胞 星形胶质细胞 永生化 传代扩增 定向诱导 基因表达系统 成体干细胞 多向分化能力
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巢蛋白与脑损伤 被引量:8
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作者 孙金峤 曹云涛 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 2005年第4期419-421,共3页
巢蛋白是第Ⅵ类中间丝蛋白,主要在胚胎期神经前体细胞和神经干细胞一过性表达。巢蛋白表达的时空顺序与前体细胞朝终末分化方向发育为成熟细胞的过程相匹配;脑缺血、创伤以及理化等因素造成的损伤可诱导其重新表达。巢蛋白可作为中枢神... 巢蛋白是第Ⅵ类中间丝蛋白,主要在胚胎期神经前体细胞和神经干细胞一过性表达。巢蛋白表达的时空顺序与前体细胞朝终末分化方向发育为成熟细胞的过程相匹配;脑缺血、创伤以及理化等因素造成的损伤可诱导其重新表达。巢蛋白可作为中枢神经系统损伤时最早、快速应答的敏感标志物,可能与神经细胞的修复有关。 展开更多
关键词 巢蛋白 脑损伤 中枢神经系统损伤 神经前体细胞 中间丝蛋白 神经干细胞 成熟细胞 分化方向 时空顺序 蛋白表达 神经细胞 一过性 胚胎 脑缺血 等因素 标志物
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