期刊导航
期刊开放获取
河南省图书馆
退出
期刊文献
+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
检索
高级检索
期刊导航
共找到
3
篇文章
<
1
>
每页显示
20
50
100
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
显示方式:
文摘
详细
列表
相关度排序
被引量排序
时效性排序
深色有隔内生真菌S12菌株遗传转化体系的建立及GFP标记菌株的获得
1
作者
赵楠
闫思远
+1 位作者
裴瑞瑞
顾沛雯
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2024年第4期127-135,145,共10页
【目的】建立深色有隔内生真菌(dark septate endophyte,DSE)的遗传转化体系,获得绿色荧光蛋白(GFP)标记的DSE转化子,为研究DSE在植物根系的侵染定殖行为和侵染定殖规律奠定基础。【方法】以前期从健康枸杞根系分离的1株DSE菌株枝状枝孢...
【目的】建立深色有隔内生真菌(dark septate endophyte,DSE)的遗传转化体系,获得绿色荧光蛋白(GFP)标记的DSE转化子,为研究DSE在植物根系的侵染定殖行为和侵染定殖规律奠定基础。【方法】以前期从健康枸杞根系分离的1株DSE菌株枝状枝孢菌(Cladosporium cladosporioides)S12菌株为供试材料,确定潮霉素B对其的最低抑制质量浓度,然后研究菌龄(13,15,17,19和21 h)、酶解时间(1.0,1.5,2.0,2.5,3.0和3.5 h)、崩溃酶质量浓度(10,15,20,25,30和35 mg/mL)和渗透压稳定剂种类(NaCl、KCl、CaCl_(2)和MgSO_(4))对S12菌株原生质体制备的影响。采用聚乙二醇(PEG)介导原生质体转化法将PDL2质粒(含hph和gfp基因)转入S12菌株,对所获转化子进行表型、GFP荧光、PCR及拮抗活性(以尖孢镰刀菌枸杞专化型Fusarium oxysporum f.sp.Lycium barbarum LR-1菌株为靶标菌)检测,筛选与野生型S12菌株无明显差异且带有GFP标记的转化子。【结果】S12菌株在YPD液体培养基中培养17 h,以0.7 mol/L NaCl为稳渗剂,用30 mg/mL的崩溃酶酶解2.5 h,原生质体制备数量最多,为4.53×10^(6)mL^(-1)。通过PEG介导,将PDL2质粒(含hph和gfp基因)转入S12菌株,可得47株转化子,转化效率2.35株/μg,从中筛选出10株生长速度和产孢量与野生型S12菌株无明显差异的转化子。荧光观察、PCR和拮抗活性检测结果表明,外源基因已成功整合到S12菌株中,成功建立了S12菌株的遗传转化体系,并获得了GFP标记菌株,有6株转化子对LR-1菌株的抑菌率与野生型S12菌株无明显差异。【结论】成功建立了遗传稳定性良好的S12菌株遗传转化体系,筛选出了6株抑菌效果与野生型菌株相当的转化子。
展开更多
关键词
深色有隔内生真
菌
枝状枝孢菌s12菌株
原生质体
遗传转化
下载PDF
职称材料
枝状枝孢霉MD2的候选基因A00981的克隆及转基因菌株的构建
2
作者
张鹏
刘盼
+4 位作者
周兰
裴婷
甘喆
李浩东
宋发军
《中南民族大学学报(自然科学版)》
CAS
2019年第1期45-49,共5页
目的:为揭示真菌紫杉醇合成分子机制.方法:克隆了产紫杉醇内生真菌枝状枝孢霉MD2的候选基因A00981,该基因DNA和cDNA序列分别为969 bp和894 bp;其编码蛋白含有298个氨基酸、无跨膜结构和信号肽,与酰基辅酶A脱氢酶(ACAD)具有73%的一致性....
目的:为揭示真菌紫杉醇合成分子机制.方法:克隆了产紫杉醇内生真菌枝状枝孢霉MD2的候选基因A00981,该基因DNA和cDNA序列分别为969 bp和894 bp;其编码蛋白含有298个氨基酸、无跨膜结构和信号肽,与酰基辅酶A脱氢酶(ACAD)具有73%的一致性.进一步构建该基因的超表达载体pTFC-A00981,并转化枝状枝孢霉MD2,共获得9株转基因菌株.结果:Southern blot分析证明其中5株转基因菌株的外源基因是以单拷贝方式插入.结论:该结果为深入分析超表达候选基因A00981对枝状枝孢霉MD2紫杉烷类合成的影响奠定了基础.
展开更多
关键词
枝
状
枝
孢
霉MD2
紫杉醇
基因克隆
转基因
菌
株
下载PDF
职称材料
紫杉醇合成相关候选基因A02725的克隆及转基因菌株的构建
被引量:
1
3
作者
刘盼
柯友胜
+5 位作者
周兰
德格
裴婷
甘喆
李浩东
张鹏
《基因组学与应用生物学》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第1期145-150,共6页
真菌紫杉醇合成相关基因的功能研究是揭示真菌紫杉醇合成机制的关键。为了揭示产紫杉醇内生真菌枝状枝孢霉MD2的候选基因A02725对宿主紫杉烷类合成的作用,本研究克隆了候选基因A02725的DNA全长序列(1 524 bp);生物信息学预测结果表明该...
真菌紫杉醇合成相关基因的功能研究是揭示真菌紫杉醇合成机制的关键。为了揭示产紫杉醇内生真菌枝状枝孢霉MD2的候选基因A02725对宿主紫杉烷类合成的作用,本研究克隆了候选基因A02725的DNA全长序列(1 524 bp);生物信息学预测结果表明该基因编码蛋白为亲水蛋白,含508个氨基酸,无信号肽和跨膜结构,与牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶(geranylgeranyl pyrophosphate synthase,GGPPS)具有79%的一致性;进一步构建该基因的超表达载体并转化枝状枝孢霉MD2,通过抗性筛选以及Southern blot检测,共获得27株转基因菌株,其中5株转基因菌株的外源基因是以单拷贝方式整合。该结果为深入分析超表达候选基因A02725对宿主紫杉烷类合成的影响奠定了基础。
展开更多
关键词
枝
状
枝
孢
霉MD2
紫杉醇
候选基因
转基因
菌
株
原文传递
题名
深色有隔内生真菌S12菌株遗传转化体系的建立及GFP标记菌株的获得
1
作者
赵楠
闫思远
裴瑞瑞
顾沛雯
机构
宁夏大学农学院
出处
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2024年第4期127-135,145,共10页
基金
国家自然科学基金项目(32260697)
国家重点研发计划子课题“酿酒葡萄病虫害早期多元化预警与防控技术研究与示范”(2019YFD1002502)。
文摘
【目的】建立深色有隔内生真菌(dark septate endophyte,DSE)的遗传转化体系,获得绿色荧光蛋白(GFP)标记的DSE转化子,为研究DSE在植物根系的侵染定殖行为和侵染定殖规律奠定基础。【方法】以前期从健康枸杞根系分离的1株DSE菌株枝状枝孢菌(Cladosporium cladosporioides)S12菌株为供试材料,确定潮霉素B对其的最低抑制质量浓度,然后研究菌龄(13,15,17,19和21 h)、酶解时间(1.0,1.5,2.0,2.5,3.0和3.5 h)、崩溃酶质量浓度(10,15,20,25,30和35 mg/mL)和渗透压稳定剂种类(NaCl、KCl、CaCl_(2)和MgSO_(4))对S12菌株原生质体制备的影响。采用聚乙二醇(PEG)介导原生质体转化法将PDL2质粒(含hph和gfp基因)转入S12菌株,对所获转化子进行表型、GFP荧光、PCR及拮抗活性(以尖孢镰刀菌枸杞专化型Fusarium oxysporum f.sp.Lycium barbarum LR-1菌株为靶标菌)检测,筛选与野生型S12菌株无明显差异且带有GFP标记的转化子。【结果】S12菌株在YPD液体培养基中培养17 h,以0.7 mol/L NaCl为稳渗剂,用30 mg/mL的崩溃酶酶解2.5 h,原生质体制备数量最多,为4.53×10^(6)mL^(-1)。通过PEG介导,将PDL2质粒(含hph和gfp基因)转入S12菌株,可得47株转化子,转化效率2.35株/μg,从中筛选出10株生长速度和产孢量与野生型S12菌株无明显差异的转化子。荧光观察、PCR和拮抗活性检测结果表明,外源基因已成功整合到S12菌株中,成功建立了S12菌株的遗传转化体系,并获得了GFP标记菌株,有6株转化子对LR-1菌株的抑菌率与野生型S12菌株无明显差异。【结论】成功建立了遗传稳定性良好的S12菌株遗传转化体系,筛选出了6株抑菌效果与野生型菌株相当的转化子。
关键词
深色有隔内生真
菌
枝状枝孢菌s12菌株
原生质体
遗传转化
Keywords
dark
s
eptate endophyte
Clado
s
porium clado
s
porioide
s
s
12
protopla
s
t
PEG-mediated tran
s
formation
分类号
Q93-335 [生物学—微生物学]
S476 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
下载PDF
职称材料
题名
枝状枝孢霉MD2的候选基因A00981的克隆及转基因菌株的构建
2
作者
张鹏
刘盼
周兰
裴婷
甘喆
李浩东
宋发军
机构
中南民族大学生命科学学院生物技术国家民委重点实验室/武陵山区特色资源植物种质保护与利用湖北省重点实验室
出处
《中南民族大学学报(自然科学版)》
CAS
2019年第1期45-49,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(31370118
31770134)
文摘
目的:为揭示真菌紫杉醇合成分子机制.方法:克隆了产紫杉醇内生真菌枝状枝孢霉MD2的候选基因A00981,该基因DNA和cDNA序列分别为969 bp和894 bp;其编码蛋白含有298个氨基酸、无跨膜结构和信号肽,与酰基辅酶A脱氢酶(ACAD)具有73%的一致性.进一步构建该基因的超表达载体pTFC-A00981,并转化枝状枝孢霉MD2,共获得9株转基因菌株.结果:Southern blot分析证明其中5株转基因菌株的外源基因是以单拷贝方式插入.结论:该结果为深入分析超表达候选基因A00981对枝状枝孢霉MD2紫杉烷类合成的影响奠定了基础.
关键词
枝
状
枝
孢
霉MD2
紫杉醇
基因克隆
转基因
菌
株
Keywords
Clado
s
porium clado
s
porioide
s
MD2
taxol
gene clone
tran
s
genic
s
train
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
Q93 [生物学—微生物学]
下载PDF
职称材料
题名
紫杉醇合成相关候选基因A02725的克隆及转基因菌株的构建
被引量:
1
3
作者
刘盼
柯友胜
周兰
德格
裴婷
甘喆
李浩东
张鹏
机构
中南民族大学生命科学学院
出处
《基因组学与应用生物学》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第1期145-150,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.31370118,No.31770134)
湖北省本科高校“生物技术专业综合改革”试点项目(GJZ15006)共同资助。
文摘
真菌紫杉醇合成相关基因的功能研究是揭示真菌紫杉醇合成机制的关键。为了揭示产紫杉醇内生真菌枝状枝孢霉MD2的候选基因A02725对宿主紫杉烷类合成的作用,本研究克隆了候选基因A02725的DNA全长序列(1 524 bp);生物信息学预测结果表明该基因编码蛋白为亲水蛋白,含508个氨基酸,无信号肽和跨膜结构,与牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶(geranylgeranyl pyrophosphate synthase,GGPPS)具有79%的一致性;进一步构建该基因的超表达载体并转化枝状枝孢霉MD2,通过抗性筛选以及Southern blot检测,共获得27株转基因菌株,其中5株转基因菌株的外源基因是以单拷贝方式整合。该结果为深入分析超表达候选基因A02725对宿主紫杉烷类合成的影响奠定了基础。
关键词
枝
状
枝
孢
霉MD2
紫杉醇
候选基因
转基因
菌
株
Keywords
Clado
s
porium clado
s
porioide
s
MD2
Taxol
Candidate gene
Tran
s
genic
s
train
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
深色有隔内生真菌S12菌株遗传转化体系的建立及GFP标记菌株的获得
赵楠
闫思远
裴瑞瑞
顾沛雯
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2024
0
下载PDF
职称材料
2
枝状枝孢霉MD2的候选基因A00981的克隆及转基因菌株的构建
张鹏
刘盼
周兰
裴婷
甘喆
李浩东
宋发军
《中南民族大学学报(自然科学版)》
CAS
2019
0
下载PDF
职称材料
3
紫杉醇合成相关候选基因A02725的克隆及转基因菌株的构建
刘盼
柯友胜
周兰
德格
裴婷
甘喆
李浩东
张鹏
《基因组学与应用生物学》
CAS
CSCD
北大核心
2020
1
原文传递
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
上一页
1
下一页
到第
页
确定
用户登录
登录
IP登录
使用帮助
返回顶部