枣实蝇在中国的风险评估

通过实地调查研究及查阅相关资料,整理出枣实蝇的基础生物学信息,利用适生性分析软件CLIMEX和GARP,结合地理信息系统软件ArcGIS,预测枣实蝇在中国的适生区及其适生程度。综合2种软件的预测结果,认为枣实蝇在我国适生范围很广,其中新疆、甘肃、内蒙古、宁夏、四川、云南、陕西、山西、河北、北京、天津、河南、辽宁、山东、江苏、安徽、湖北、湖南、江西、福建、广西、广东、海南等23个省(市、区)的大多数地区为枣实蝇主要适生区域;次要适生区域包括新疆北部和南部的局部地区、内蒙古临河以东局部地区、宁夏南部局部区域、甘肃与新疆相接的局部地区、川甘陕3省交界的局部地区、青海格尔木市和都兰县、陕西南部地区、山西北部地区、河北北部地区、吉林与内蒙古及辽宁接壤的局部地区、四川中部、重庆东部、西藏墨脱县、西藏察隅县、西藏错那县、湖北与湖南的西部地区、贵州北部地区、浙江北部局部地区、广西与广东的北部局部地区、台湾西部地区。参照国际上有害生物危险性定量分析方法,首次综合评估枣实蝇在我国各省市区的潜在危险性,认为枣实蝇在中国为高度危险性害虫,对我国枣产业的发展构成巨大的潜在威胁。

SYBR Green实时荧光PCR快速鉴定枣实蝇技术

应用SYBR Green实时荧光PCR技术,建立SYBR Green实时荧光PCR快速鉴定枣实蝇的方法。利用枣实蝇（mtDNA）中COⅠ基因序列,设计筛选出1对种的特异引物CarF/CarR。引物的特异性分别用桔小实蝇、瓜实蝇、南瓜实蝇、番石榴实蝇和桃果实蝇5种实蝇来验证。SYBR Green PCR实时荧光反应的灵敏度用40,20,10,1,0.1,0.01,0.001 ng·μL^-1 7个浓度枣实蝇DNA模板来检测。结果表明：SYBR Green PCR的检测限度达0.01 ng·μL^-1以下,最适模板DNA浓度为1～20 ng·μL^-1。SYBR Green实时荧光PCR的可靠性可用枣实蝇不同虫态（幼虫、蛹、成虫）的扩增曲线、熔解曲线及PCR产物的琼脂糖凝胶电泳来检验。成虫、幼虫和蛹3种不同虫态的枣实蝇有一致的扩增曲线,熔解曲线分析和琼脂糖凝胶电泳条带分别用来确认实时荧光PCR产物的特异性;其平均熔解温度为（75.3±0.1）℃,并获得一段长为205 bp的特异性目标片段,说明在枣实蝇成虫为模板的基础上建立的SYBR Green实时荧光PCR方法同时适用于幼虫、蛹的快速鉴定,可将不同虫态的枣实蝇与近似种类区分开来。

枣实蝇特异引物PCR鉴定技术

在设计的枣实蝇15对引物中，利用种特异引物PCR（SS—PCR）和琼脂糖凝胶电泳技术筛选出1对枣实蝇的特异性引物，引物的特异性用桔小实蝇、瓜实蝇、南瓜实蝇、番石榴实蝇和桃果实蝇等5种实蝇来验证。SS—PCR方法的检测灵敏度用40，20，10，1，0．1，0．01，0．001ng·μL^-1等7个不同浓度系列的枣实蝇DNA模板来检测。结果表明，SS．PCR方法的检测限度达0．01ng·μL^-1以下，最适模板DNA浓度为1～20ng·μL^-1。所设计的引物对枣实蝇不同虫态均能进行特异性扩增，结果准确可靠。该技术体系可用于枣实蝇的鉴定识别与检测监测，对阻止其进一步扩散蔓延具有重要意义。

检疫性害虫枣实蝇的鉴定与入侵威胁

枣实蝇Carpomya vesuviana Costa是我国2007年新增补的进境植物检疫性有害生物,枣实蝇的入侵可能对我国枣业生产构成毁灭性危害。文章详细介绍枣实蝇的鉴别特征及其和近缘种的区别,对枣实蝇的危害、生物学特性和防治技术进行介绍,对我国警惕枣实蝇入侵提出预警。

枣实蝇不同发育阶段过冷却点及结冰点的测定

为初步探究枣实蝇耐寒能力,利用过冷却点测定仪对枣实蝇(Carpomya vesuviana Costa)不同发育阶段的过冷却点及体液结冰点进行测定。结果表明,枣实蝇不同发育阶段的过冷却点不同,同一虫态个体间的过冷却点出现不同程度的差异。不同虫龄的过冷却点和体液结冰点差异显著,表现为随着虫龄的增加过冷却点和体液结冰点降低。其中枣实蝇3龄幼虫的过冷却点平均值为(-9.75±0.64)℃,体液结冰点平均值为(-5.53±0.46)℃。枣实蝇30日龄蛹过冷却点平均值为(-22.71±1.21)℃,1日龄蛹平均值为(-7.28±1.08)℃;而枣实蝇30日龄蛹的体液结冰点平均值为(-17.01±2.34)℃,1日龄蛹平均值为(-5.49±0.56)℃。可见,栆实蝇过冷却点较低,具有很强的耐寒性,极有可能适宜在中国大部分枣产区生存。

枣实蝇在中国适生性初步研究

枣实蝇是严重危害枣类生产的重要害虫。本文采用CLIMEX模型与ArcGIS分析相结合的预测方法对枣实蝇在我国的适生性进行了研究,在明确枣实蝇CLIMEX参数指标体系和适生性评判标准的基础上,分析了该实蝇在我国的适生区域和适生程度。结果表明,枣实蝇在我国的适生区域广泛,适生程度偏高:山东、河南、陕西、山西、河北、北京、天津及云南大部分地区,辽宁和广西西部,四川和甘肃东部,江苏、安徽和湖北北部,以及新疆西部和北部的适生程度为高;辽宁和广西中东部,四川西部,重庆大部,湖北和安徽中部,江苏中北部,福建、江西和湖南的零星地区具有中度适生性。鉴于枣实蝇在我国的适生性研究结果,建议采取有效的防控策略,加强枣实蝇检疫措施,完善监测体系,严防该虫的入侵和扩散。

外来有害生物枣实蝇检疫管理对策研究

介绍了枣实蝇Carpomya vesuviana Costa的发生特点和危害规律,并采用定性和定量的方法分析了枣实蝇在我国的风险性,得出枣实蝇的风险性R值为2.03,在我国属于高度危险性有害生物。根据枣实蝇的发生特点、危害规律及风险性分析结果,提出了当前枣实蝇的检疫管理对策。

检疫性有害生物枣实蝇研究进展

枣实蝇为国家进境检疫性有害生物和全国林业检疫性有害生物,专性危害枣属植物,以幼虫蛀食枣果果肉进行危害,严重影响枣果的品质,造成巨大的经济损失。综述枣实蝇的分类地位、分布与寄主、生物生态学特性及防治措施等方面的内容,并对今后的研究进行展望。

枣实蝇成虫飞行能力的测定

【目的】为了明确枣实蝇Carpomya vesuviana Costa成虫飞行扩散能力及相关因子对其飞行能力的影响。【方法】本研究以SUN-FL型智能昆虫飞行信息系统（飞行磨）吊飞方法,测定了不同日龄、性别的枣实蝇成虫的飞行能力,并探究了温度对枣实蝇飞行能力的影响。【结果】羽化后12 d左右的枣实蝇飞行能力最强,雌虫平均飞行距离和最远飞行距离分别为1.037和3.192 km,雄虫分别为0.943和3.085 km;枣实蝇飞行能力随着日龄的增加呈现先增强后减弱的趋势;相同日龄的雌成虫平均飞行距离、平均飞行时间略高于雄虫,雌、雄虫的平均飞行距离、平均最快飞行速度、平均飞行时间之间没有显著性差异;环境温度28~34℃为枣实蝇最佳飞行温度区间,且31℃条件下飞行能力最强。【结论】由此可见,枣实蝇成虫具有较强的迁飞扩散能力。

枣实蝇4个地理种群的线粒体Cytb、基因序列分析

新人侵重大检疫性害虫枣实蝇（Carpomya vesuviana）于2007年首次在吐鲁番地区发现，对该地区枣（Zizyphus jujuba）产业造成了毁灭性损失，且疫情有向其他地区扩散的趋势。枣实蝇原产印度，现已扩散至阿富汗、塔吉克斯坦、泰国、意大利等国家（张润志等，2007）。枣实蝇以成虫产卵和幼虫蛀食危害枣果，成虫产卵于果实表面，致使产卵孔周围组织发育停止，形成凹陷或畸形。

枣实蝇产卵选择习性研究

通过枣实蝇产卵选择习性研究,发现枣实蝇喜欢产卵于枣果的背阴面及底部,其产卵孔周围呈现凹陷或瘤状凸起症状,且对不同品种枣果的产卵选择性不同,‘鸡心枣’、‘骏枣’对枣实蝇的抗性大于‘梨枣’、‘灰枣’和‘相枣’;枣果受伤害程度越重,产卵量就越少;不同大小的枣果均受到危害,且以中型果受害最为严重;随枣果成熟度的增加其产卵量逐渐减少,且不产卵于完全红的枣果上。同时枣实蝇对枣、海棠果、青杏、番茄、葡萄等不同寄主的产卵选择性均存在显著性差异,但更喜欢产卵于枣果。胁迫性寄主试验中不同寄主果实的产卵量存在显著差异,但枣果与杏之间的产卵量差异不明显,而且枣实蝇可以在杏果中化蛹并羽化。

枣实蝇在吐鲁番地区的发生及蛹的分布规律

对吐鲁番地区17个乡镇58个枣园进行了枣实蝇蛹的抽样调查，发现枣实蝇在吐鲁番地区的发生比较普遍而且危害严重；枣实蝇蛹集中分布在0～15cm的土壤中，占总蛹数的90％，且绝大部分分布在树冠垂直投影范围内。枣实蝇幼虫除了在土壤中化蛹外，还能在麻袋、塑料袋等包装材料以及干枣内均能化蛹。

枣实蝇幼虫龄期的测定

通过测定枣实蝇口钩长和头咽骨长2个形态指标,用最小二乘法对所测定的数据进行回归分析,结果表明,枣实蝇幼虫的头咽骨长度值在1龄与2龄之间有部分重叠;口钩长在龄期之间差异显著,可作为幼虫的分龄指标。1龄口钩长度为(0.0539±0.00063)mm;2龄为(0.0982±0.00109)mm;3龄为(0.1675±0.00296)mm;经F检验,枣实蝇各幼虫龄期数与口钩长度呈线性关系y=0.058x-0.011。

枣实蝇及其他5种检疫性实蝇的PCR-RFLP快速鉴定

枣实蝇(Carpomya vesuviana Costa)是一种新入侵检疫性有害生物。应用PCR-RFLP技术,快速区分鉴定了枣实蝇与我国口岸截获频率较高的5种检疫性实蝇。研究表明:设计出的2对引物对6种供试实蝇线粒体DNA(mtDNA)进行PCR扩增,其扩增片断大小分别为350 bp和450 bp。PCR扩增产物用2种限制性内切酶Dra I和MseI进行酶切,根据不同的酶切位点准确区分了6种供试的实蝇。此方法可用于口岸截获实蝇的快速检疫鉴定。

枣实蝇气味结合蛋白基因的克隆及表达谱分析

【目的】克隆枣实蝇Carpomya vesuviana Costa气味结合蛋白(odorant binding protein,Cvco OBP)基因,对其表达谱进行分析,为枣实蝇气味结合蛋白的深入研究奠定基础。【方法】对枣实蝇头部RNA进行转录组测序,通过蛋白序列比对以及构建系统进化树分析枣实蝇OBP序列,运用半定量反转录-聚合酶链反应(semi-quantitative reverse transcription and polymerase chain reaction,sqRT-PCR)方法对获得的Cvco OBP序列进行组织表达特异性研究。【结果】转录组测序后共获得7个OBP,命名为(Gen Bank登录号分别为:KU975053、KU975054、KU975055、KX059394、KU975056、KX059395、KX059396)。对Cvco OBP1-7进行蛋白序列比对发现,Cvco OBP1、Cvco OBP3、Cvco OBP4、Cvco OBP6、Cvco OBP7是典型的OBP家族成员,具有6个高度保守的半胱氨酸残基;Cvco OBP2和Cvco OBP5属于"Minus-C"家族成员,具有4个高度保守的半胱氨酸残基。系统进化分析结果显示,Cvco OBP1-7分别与不同的OBP有较近的进化关系。半定量PCR检测结果发现,Cvco OBP1-7在枣实蝇腹部、头部及胸部都有表达,且表达量较高;Cvco OBP1、Cvco OBP2在翅中有表达,但表达量相对较低;Cvco OBP1、Cvco OBP5、Cvco OBP6在足中也有表达,但表达量相对较低。【结论】获得并分析了7个Cvco OBP,不同Cvco OBP表达部位和表达量各不相同;Cvco OBP1-6分别属于OBP56g,OBP8a,OBP83a,OBP56h,OBP99c,OBP83ef类型。

枣实蝇成虫饲养初报

不同饲料饲养的枣实蝇成虫产卵、孵化、寿命有很大的差异。采用蜂蜜(A)、酸水解酪蛋白+蔗糖(B)、酵母浸粉+蔗糖(C)3种饲料饲养枣实蝇成虫,结果表明:饲料C饲养的枣实蝇单组平均产卵量为(116.33±6.73)粒,与饲料A,B组差异显著;饲料C单组平均孵化率86.13%±1.31%,与饲料A,B差异性不显著;饲料C饲养的枣实蝇最长寿命128 d,优于饲料A(95 d)和饲料B(108 d)。饲料C饲养枣实蝇,各项指标均达到满意的要求。

枣实蝇生物学特性研究

枣实蝇Carpomy avesuviana Costa作为一种高度危险性的外来有害生物,为害枣树并严重影响枣产品质量及其商品价值。本文通过在新疆进行的人工饲养和野外观察试验,对枣实蝇的羽化、交尾、产卵和有效积温等生物学特性进行了研究。结果表明:枣实蝇羽化主要集中在8:00-11:00,占总羽化数的86.3%,其羽化高峰期出现在10:00前后。交尾平均时长为309.00±8.46min,交尾高峰分别出现在11:00-12:00和20:00-21:00。雌虫产卵平均时长为8.20±0.51min;产卵节律不明显,9:00之前和21:00之后产卵量较小,白天各个时间段产卵量无显著性差异。成虫单日产卵量最高为16粒,平均每天产6～9粒,每产卵孔内有1～6粒卵。卵的发育起点温度为13.57℃,有效积温为48.18日·度;蛹的发育起点温度为6.38℃,有效积温为357.17日·度;卵到蛹期的发育起点温度为8.78℃,有效积温为283.29日·度;幼虫的发育起点温度6.39℃,有效积温为245.61日·度。本研究为进一步开展枣实蝇科学防控提供了基本资料。

枣实蝇在陕西省的风险性分析及检疫对策

为了评估枣实蝇(Carpomya vesuviana Costa.)在陕西的潜在危险性,以制定科学的检疫对策。参照国际上的有害生物风险分析方法,结合陕西省枣树资源分布情况,对枣实蝇在陕西省的3个地理区域进行了风险性分析和综合评估。结果表明:枣实蝇在陕北、关中和陕南的评估风险性R值分别为2.239、2.065、1.469,枣实蝇在陕北和关中为高度危险性害虫,在陕南为低度危险性害虫。根据枣实蝇在陕西3个地区的风险性分析的评估结果,提出了防止枣实蝇入侵陕西的检疫对策。

枣实蝇不同地理种群的亲缘关系

枣实蝇是一种高度危险性外来有害生物。对吐鲁番市、KSS、HSX和HMS4个不同地区采集的枣实蝇mtDNACOI基因片段测序,并进行序列比较和系统发育分析。结果表明:采自吐鲁番市、HSX、HMS的枣实蝇遗传距离最近,为0.002,其相似性高达99.8%。吐鲁番市枣实蝇和HMS枣实蝇分别与KSS枣实蝇的遗传距离最远,为0.062,其相似性为94.1%。对以上几个地点采集的枣实蝇基因序列与已公开报道的外群蔷薇咔实蝇Carpomya schineriR248FJ571365.1、蔷薇咔实蝇Carpomya schineriR141FJ571364.1、樱桃绕实蝇Rhagoletis cerasiGQ175823.1同源序列进行相似性比较分析,结果显示HMS枣实蝇与蔷薇咔实蝇相似性高达96.5%。根据进化树对比分析,吐鲁番市、HSX和HMS的枣实蝇来自同一地区,而KSS枣实蝇从另一地区传入。

主要气象因子对吐鲁番枣实蝇越冬代成虫羽化率的影响

枣实蝇（Carpomyia vesuviana Costa）是我国禁止进境的检疫性入侵害虫,该害虫主要以幼虫蛀食果肉来为害红枣（Ziziphus jujube Mill.）和酸枣（Z.juju-ba var.spinosa（Bunge）Hu）等[1-2]。