含肟酯/醚结构的枯茗醛衍生物合成及抑菌活性

以孜然精油的主要成分枯茗醛为原料,设计合成了系列含肟酯/醚结构的枯茗醛衍生物18个,并通过^(1)H NMR、^(13)C NMR和HRMS进行了结构表征;以地毯草黄单胞柑橘致病变种和水稻黄单胞菌为对象,采用浑浊度法对目标化合物的抑菌活性进行了评估。抑菌活性测试结果表明:化合物(Z)-4-异丙基苯甲醛-O-(3-甲氧基苯甲酰基)肟(4i)在质量浓度50μg·mL^(-1)下对地毯草黄单胞柑橘致病变种的抑制率为3280%,优于对照药剂叶枯唑(1688%);目标化合物(Z)-4-异丙基苯甲醛-O-(苯甲酰基)肟(4d)、(Z)-4-异丙基苯甲醛-O-(4-三氟甲基苯甲酰基)肟(4h)和(Z)-4-异丙基苯甲醛-O-(3-甲氧基苯甲酰基)肟(4i)在质量浓度100μg·mL-1下对地毯草黄单胞柑橘致病变种的抑制率分别为60.3%、31.37%和33.30%,优于对照药剂叶枯唑的抑制率(45.82%)。

孜然枯茗醛对实验性胃溃疡大鼠胃黏膜的保护作用

目的采用乙醇损伤构建大鼠的胃溃疡模型,探究孜然果实中枯茗醛(cuminaldehyde,CUM)对胃溃疡的作用与保护机制。方法选择36只雄性的SD大鼠,分为6组:对照组、模型组、奥美拉唑阳性对照组以及CUM低、中、高剂量组,每组6只。连续灌胃7 d后,采用无水乙醇法对大鼠进行急性胃溃疡实验。检测各组大鼠的胃溃疡面积、抑制率、胃组织抗氧化能力、血清炎症因子与胃黏膜保护因子的表达。结果CUM组可明显降低胃黏膜溃疡面积,提高胃溃疡抑制率,CUM高剂量组抑制率最高可达74.65%,此外,CUM 4的大鼠胃组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)的活性明显升高,胃黏膜保护因子血清前列腺素E_(2)(PGE_(2))和胃组织NO的含量也明显增加,降低了丙二醛(MDA)的含量。与模型组比较,CUM降低了大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的含量,髓过氧化物酶(MPO)的活性明显降低。结论CUM具有良好的抗氧化应激能力和抗炎活性,可提高保护因子的表达,增强胃黏膜的防御能力,对大鼠急性胃溃疡产生明显的保护作用。

孜然主要成分枯茗醛对吲哚美辛致胃溃疡大鼠的保护作用

为探讨孜然活性物质枯茗醛对吲哚美辛胃溃疡模型大鼠的保护作用及机制,该实验设置空白组(CK)、吲哚美辛模型组(Model)、奥美拉唑阳性对照组(Positive)和枯茗醛低(CUM2)、中(CUM4)、高(CUM6)剂量组,每组6只。连续给药7 d后用吲哚美辛构建大鼠胃溃疡模型,观察大鼠胃组织形态、检测胃溃疡指数和胃蛋白酶活性、胃组织抗氧化性能等指标。结果显示,与模型组相比,随枯茗醛剂量增加,大鼠胃组织溃疡条带和出血点逐步减少,整体无水肿、糜烂,腺体排列趋于整齐,炎症细胞浸润减轻;逐步降低溃疡指数和胃蛋白酶活性(P<0.01),增加溃疡抑制率,CUM6溃疡抑制率达到最高(58.48%);不同程度增加胃组织SOD、CAT活性和GSH、NO含量,降低MDA含量(P<0.05或P<0.01);降低血清TNF-α、IL-1β含量及MPO活性,增加IL-10、PGE2含量。综上说明,枯茗醛可显著减少大鼠溃疡面积,降低胃蛋白酶活性,提高抗氧化和抗炎活性,从而增强胃黏膜防御能力,改善胃黏膜的健康状态,降低吲哚美辛对胃组织的伤害,具有作为胃溃疡治疗药物的潜力。

孜然种子提取物枯茗醛和枯茗酸抑菌作用研究

以番茄早疫病菌、棉花黄萎病菌、小麦纹枯病菌、烟草赤星病菌、小麦全蚀病菌、油菜菌核病菌、辣椒疫霉病菌、水稻纹枯病菌、小麦白粉病菌和番茄灰霉病菌等为供试菌种,采用离体与活体相结合的方法系统地测定了枯茗醛和枯茗酸的抑菌活性。离体抑菌活性测定结果表明,枯茗醛和枯茗酸对多种病原菌具有一定的抑制效果,其中对油菜菌核病菌菌丝生长的抑制效果高于其它供试病原菌,有效中浓(EC50)分别为2.1和7.3 mg/L;枯茗醛和枯茗酸对小麦白粉病的防治实验结果表明,供试浓度为1000 mg/L时,两种药剂的保护防效均高于50%;相同处理浓度下,枯茗酸对油菜菌核病的保护防效与速克灵处理相当,达到57.52%。

气相色谱质谱法测定孜然挥发油中枯茗醛含量的方法研究

本研究利用水蒸气蒸馏法提取孜然挥发油中枯茗醛,并采用GC-MS法进行含量测定。采用岛津DB-5柱(30m×0.32mm,0.25μm),进样口温度220℃,色谱升温条件为起始温度40℃,升温速率8℃/min,终点温度220℃,氦气流量1.2ml/min,分流比100:1,进样量0.5μl。结果表明枯茗醛浓度在7.75～69.75mg/ml呈良好线性关系,线性方程Y=3.34×108X-3.373×106(r=0.9989),平均回收率96.5%,重复性RSD为1.8%(n=3)。此法简便、准确且重复性好,可为孜然质量标准的制定提供科学的方法依据。

枯茗醛、孜然精油及其微胶囊对两种储粮害虫的熏蒸效果比较

本研究评价了孜然精油主成分枯茗醛、孜然精油及其微胶囊对玉米象(Sitophilus zeamais)和杂拟谷盗(Tribolium confusum)两种储粮害虫的熏蒸效果。结果表明:孜然精油对玉米象和杂拟谷盗具有良好的熏蒸作用,20μL/L浓度下熏蒸12 h可达到100%的控制效果;枯茗醛的熏蒸效果略逊于孜然精油,孜然精油微胶囊的熏蒸效果一般;杂拟谷盗对高浓度孜然精油的敏感性高于枯茗醛,而枯茗醛则对玉米象的作用效果明显,且随着浓度升高、作用时间延长,熏蒸效果越好。由此表明,孜然精油中的各种活性成分会通过协同作用达到良好的熏蒸效果。

沙枣胶/枯茗醛复合涂膜对番茄采后红粉病的抑制作用及机制

红粉病是番茄果实主要的病害之一,采前采后均可发生,给番茄生产和贮运造成了较大损失。本实验研究枯茗醛对番茄红粉病病原真菌粉红单端孢(Trichothecium roseum Pers.Link)的体外抑制活性,并制备沙枣胶与枯茗醛复合涂膜‘千禧’樱桃番茄,果实经损伤接种后探究该涂膜对番茄红粉病的抑制作用及其对番茄果实抗性的影响。结果显示,枯茗醛在离体条件下能有效抑制T.roseum孢子萌发和菌丝生长,在0.1 μL/mL枯茗醛作用下,对菌落生长的抑制率达80%以上。在体内条件下,沙枣胶与枯茗醛复合涂膜能明显抑制果实上T.roseum菌体生长,延缓病斑扩展并降低番茄果实接种发病率,在贮藏第9天,质量浓度30 mg/mL沙枣胶与体积分数0.2%枯茗醛复合涂膜组病斑直径和发病率分别为对照组的36.7%和69.2%。复合涂膜可显著提高番茄果实接种前期H_(2)O_(2)含量,并显著提高果实贮藏期间过氧化物酶、苯丙氨酸解氨酶和4-香豆酸辅酶A连接酶的活力,促进果实中总酚和类黄酮的积累。沙枣胶与枯茗醛复合涂膜能够有效抑制番茄采后红粉病的发生与发展,其作用机制不仅与枯茗醛抑制病原菌生长有关,还与诱导番茄果实增强抗性有关。

HPLC法测定蒙药查干-赛日阿中枯茗醛的含量

目的:建立蒙药查干-赛日阿中枯茗醛的含量测定方法。方法:采用HPLC法,Agilent Eciipse XDB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.08%磷酸水溶液(58∶42)为流动相,等度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为257 nm,柱温为室温(25℃)。结果:枯茗醛在0.075,36～2.411,52μg范围内对应峰面积与进样量呈良好的线性关系。平均回收率为100.7%,RSD%为2.3%。结论:7批样品测定结果表明,该方法简便,准确,可用于蒙药查干-赛日阿中枯茗醛的含量测定。

高效液相色谱法测定孜然精油中枯茗醛含量

枯茗醛是孜然精油挥发油中含量最高的物质,也是孜然精油的主要呈味物质。为建立孜然精油中枯茗醛的检测方法,本文采用Agilent Eclipse Plus C18（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱分离法对孜然精油中的枯茗醛含量做了检测。实验中乙腈-0.08%磷酸水溶液为流动相等梯度洗脱,其流速为1 mL/min,检测波长257 nm。实验结果显示枯茗醛的保留时间为9.880 min,其线性范围为7.7119-123.3901μg/mL（R2=0.9998）,加标回收率为94.90%-97.35%（RSD为1.00%）。该方法简单易行,稳定性好,用于孜然精油的质量评价具有较好的预期效果。对比该方法和GC检测法,结果较为一致。

孜然主要活性成分枯茗醛对大鼠肠道菌群结构的影响

目的:探究孜然主要的香味活性物质枯茗醛对大鼠肠道菌群的影响。方法:随机取18只大鼠均分为3组,每组6只,分别给药枯茗醛0、15、30 d,作为CK组、S15组和S30组,收集大鼠粪便提取肠道菌群DNA,进行高通量测序,分析长期枯茗醛给药对大鼠肠道菌群的影响。结果:与CK相比,在门水平上,枯茗醛给药15 d组(S15)的大鼠肠道中厚壁菌门(Firmicutes)丰度上升(CK50.62%,S1564.09%),拟杆菌门(Bacteroidetes)相对丰度降低(CK45.45%,S1533.74%);科水平上,S15组的大鼠木日白克科(Muribaculaceae)相对丰度最低(CK24.63%,S1515.26%);属水平上,枯茗醛给药组(S15和S30)均使得大鼠肠道中册它提属(Acetatifactor)和另枝杆菌属(Alistipes)相对丰度增加,棒状杆菌属(Corynebacterium_1)相对丰度降低。此外,枯茗醛还促进了有益菌群如另枝杆菌属、册它提属等在大鼠肠道中的定植,而显著降低有害菌群如罗姆布茨属(Romboutsia)、分节丝状菌属(Candidatus_arthromitus)在S15的大鼠肠道中的占比(P<0.05)。结论:枯茗醛可改变有益与有害菌群在大鼠肠道中的定植情况,改变大鼠肠道菌群结构与组成,维持大鼠肠道微生物稳态。

枯茗醛对甘草跳甲触角电位与行为影响的研究

为探究枯茗醛(p-Isopropylbenzal-dehyde)对甘草跳甲(Altica deserticola)的驱避效应,并为套种孜然(Cuminum cyminum L.)以预防甘草跳甲对甘草叶片的取食危害提供科学依据,试验采用触角电位测量系统(Electroantennogram system)测定甘草跳甲成虫对6种浓度(0.001,0.01,0.1,1,10,100μg/μL)枯茗醛溶液的触角电位(Electroantennogram,EAG)反应,用Y型嗅觉仪测定甘草跳甲成虫对6种浓度枯茗醛溶液的行为反应。结果表明:所有浓度的枯茗醛溶液都能引起甘草跳甲成虫的EAG反应,其中对0.1μg/μL枯茗醛溶液的反应最强烈,对0.001,0.01,1,10μg/μL枯茗醛溶液的反应强度无显著差异(P>0.05),对100μg/μL枯茗醛溶液的EAG反应最弱。不同浓度的枯茗醛溶液对甘草跳甲成虫均有驱避作用,0.1μg/μL枯茗醛溶液驱避率最高,显著高于其他浓度(P<0.05);0.001,0.01,1,10μg/μL浓度的枯茗醛溶液对甘草跳甲成虫的驱避效果相似,无显著差异(P>0.05);枯茗醛浓度为100μg/μL时驱避率最低。甘草跳甲成虫对0.1μg/μL枯茗醛溶液的反应率最高。说明枯茗醛对甘草跳甲成虫有明显的驱避作用,在甘草地中套种孜然或许可作为生物防治甘草跳甲的一种有效措施。

微波辅助水蒸汽蒸馏法和无溶剂微波萃取法提取孜然精油工艺的研究

采用微波蒸馏法提取孜然精油,考察微波溶剂提取和无溶剂提取孜然精油工艺中微波提取时间、微波功率、粒度和液料比等因素对孜然精油提取率的影响。同时以枯茗醛含量作为精油品质的评价指标,并通过GC对孜然精油进行分析。研究结果表明,微波溶剂提取孜然精油的最佳工艺条件为:液料比6:1、微波提取时间90min、微波功率300W,此条件下精油提取率为3.501%,精油中枯茗醛含量为19.121%。微波无溶剂提取孜然精油的最佳工艺条件为:浸泡时间30min、微波提取时间45min、微波功率200W,此条件下精油提取率为2.461%,精油中枯茗醛含量为23.910%。

孜然种子中杀菌活性成分分离及结构鉴定

以小麦白粉病菌Blumer graminis、黄瓜霜霉病菌Pseudoperonispora cubensis、杨树溃疡病菌Dothiorella gregaria、棉花枯萎病菌Fusarium oxysporumf.sp.vasinfectum、白菜黑斑病菌Alternariaoleracea和稻瘟病菌Pyricularia grisea6种病原菌为指示菌种,对孜然种子中的杀菌活性成分进行了跟踪分离及活性测定。采用柱层析分离技术,从孜然种子乙醇浸膏石油醚萃取液中分离得到两个具有杀菌活性的化合物,其结构经质谱、核磁共振氢谱及碳谱等分析确定其分别为枯茗酸(对异丙基苯甲酸,p-isopropyl benzoic acid)和枯茗醛(对异丙基苯甲醛,p-isopropyl benzaldehyde)。采用菌丝生长速率法测定了两化合物对油菜菌核病菌Sclerotinia sclerotiorum和辣椒疫霉Phytophthoracapsici的毒力,其中枯茗醛对两种病原菌的EC50值分别为2.093和15.40mg/L,枯茗酸的EC50值分别为7.298和19.66mg/L。

对伞花烃直接电解氧化反应的评价(英文)

研究了在有机溶剂、合适的支持电解质和碳棒存在下,对伞花烃的直接电解氧化反应,使用GC和GC MS方法分析测定了主要电解氧化产物,如:百里香酚甲醚、1 异丙基 4 甲氧甲基苯、枯茗醛、枯茗醇、对二甲氧甲基异丙基苯、枯茗酸甲酯、对羟基甲氧甲基异丙基苯、乙酸枯茗酯和1 二甲氧甲基 4 (1 甲氧基 1 甲基乙基)苯。详细研究了影响氧化主产物得率的主要因素,对伞花烃直接电解氧化选择性地制备枯茗醛合理的电解条件为:电解时间20～25h,甲醇/乙酸体积比10∶1,氟硼酸钠作支持电解质,阳极/阴极面积比1∶1,电流密度0.018A/cm2。

孜然精油的化学成分及其提取工艺研究

本文应用气相色谱/质谱/计算机联用技术分析了我国孜然精油的化学成分,从中鉴定出了二十种化合物。我国孜然精油的主要成分是:枯茗醛(37.18%)、二氢枯茗醛(26.24%)、γ-萜品烯(12.59%)、β-蒎烯(11.49%)、对伞花烃(8.70%。在我国孜然精油中,作者首次发现了三环烯、α-水芹烯、顺,反—水合桧烯、α-萜品醇、四氢枯茗醛、桔茗醇、β-石竹烯、β-金合欢烯、β-甜没药烯等十种化合物的存在。另外,作者就影响孜然精油生产过程的提取时间、料水比等进行了研究,提出了最佳条件。

1株孜然内生真菌的分离鉴定及代谢产物的GC分析

采用组织分离法从孜然种子中分离纯化出内生真菌ZR-003菌株,并通过形态学观察和ITS序列分析方法确定其种属。采用平板测定法研究了该菌株对19种常见农业致病真菌的抑制作用,ZR-003菌株发酵液经过滤、离心和萃取,旋转蒸干之后利用GC方法对其代谢产物进行分析。研究结果表明:ZR-003菌落絮状、白色、具不明显的放射状沟纹,分生孢子结构稀少,其菌丝帚状结构明显散开,瓶梗形状和菌落特征应属于散枝亚组微紫青霉系中颜色较淡的类群;经分子生物学鉴定,ZR-003菌株的ITS序列与微紫青霉(Penicillium janthinellum)的相似性为99%,属微紫青霉菌;同时确定其对香蕉灰纹病菌[Cordana musae (Zimm.)Hohn.]、稻曲病菌(Ustilaginoidea virens)、苹果斑点落叶病菌(Alternaria alternaria f.sp mali)、小麦根腐病菌[Bipolaris sorokiniana(Sacc.)Shoemakey]、黄瓜黑星病菌(Cladosporium cucumerinum)都具有非常良好的抑制作用,其抑菌率分别为80.00%、81.82%、80.95%、80.00%和80.49%,其中对稻曲病菌的抑菌作用最好。经GC、UV分析可知,ZR-003菌株发酵液提取物在保留时间17.1789min处有明显出峰,其在328nm(λ),20(ε);280nm(λ),1500(ε);244nm(λ),15000(ε)下有明显吸收,与标准样品枯茗醛的色谱光谱特征一致,经计算得到其在发酵液中含量为28.7μg·mL-1,综上可见,孜然内生真菌ZR-003菌株发酵液中含有与孜然相同的药用成分—枯茗醛,从而为枯茗醛的获得开辟了新的微生物来源。

不同提取预处理方法对孜然精油提取成分组成的影响

选用孜然(Cuminum cyminum L.)为研究对象,分别对孜然进行整粒、粉碎、冷冻破碎、酶处理、溶剂均质5种预处理,采用水蒸气蒸馏法分别从5种预处理的孜然样品中提取精油,并通过气相色谱-质谱联用分析方法对5份精油的成分组成进行分析比较。研究结果表明,不同预处理方式对孜然成分及提取率有较大影响,孜然整粒精油中枯茗醛为主要成分,4种预处理方式虽然会提高孜然精油提取得率,但枯茗醛在精油中的占比会显著降低。

蒙药苏格木勒-3汤不同部位中4种成分的含量测定

目的:建立测定蒙药苏格木勒-3汤水提物中芹菜素、胡椒碱及其挥发油中桉油精、枯茗醛含量的方法。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)测定芹菜素、胡椒碱的含量;采用气相色谱法(GC)测定桉油精、枯茗醛的含量。HPLC法采用色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18,流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液,流速为1.0 mL/min,检测波长为225(芹菜素)、342 nm(胡椒碱),柱温为30℃,进样量为10μL。GC法采用色谱柱为Dimensions SH-Rtx-1毛细管柱,载气为高纯氢气,进样口温度为270℃,载气流量为1 mL/min,程序升温,进样量为10μL,进样分流比为1∶10。结果:芹菜素、胡椒碱、桉油精、枯茗醛检测质量浓度的线性范围分别为12.5~200μg/mL(r=0.999 6)、87.3~139.7μg/mL(r=0.999 9)、136~2 187μg/mL(r=0.999 9)、39~635μg/mL(r=0.999 9);定量限分别为0.02、0.06、0.06、0.12μg/mL;检测限分别为0.01、0.02、0.03、0.04μg/mL;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于4%;加样回收率分别为89.26%~97.26%(RSD=2.69%,n=6)、94.20%~104.01%(RSD=3.64%,n=6)、98.51%~110.11%(RSD=3.87%,n=6)、95.76%~107.82%(RSD=4.12%,n=6);含量分别为0.769~0.828、7.741~7.981、5.284 7~5.846 6、1.038 6~1.1012 mg/g(n=3)。结论:所建方法简单、可行,可用于蒙药苏格木勒-3汤不同部位的质量控制。

醋制工艺对孜然化学成分的影响及整体特征分析

目的考察醋制工艺对孜然中化学成分的影响并进行整体特征分析,为其质量控制提供依据。方法采用高效液相色谱法测定各孜然样品中枯茗醛和木犀草素含量,采用傅里叶变换衰减全反射红外光谱法和粉末X射线衍射法对各孜然样品进行整体特征分析,采用X射线荧光分析法对各孜然样品进行整体元素含量比较。结果枯茗醛和挥发油含量随着炒制温度的升高和时间的延长而降低;木犀草素含量无明显变化;粉末X射线衍射法结果表明,醋制工艺导致孜然的整体化学成分发生了改变;X射线荧光分析法结果表明,醋制工艺可导致孜然中的金属元素含量明显降低。结论该研究建立的枯茗醛含量测定方法和整体特征鉴别方法具有良好的普适性,方法准确性高,可用于规范和控制醋制孜然的药材质量。