高胆固醇血症患者枯草溶菌素转化酶9基因突变研究

目的探讨国人单纯性高胆固醇血症患者人类枯草溶菌素转化酶9基因突变情况。方法排除载脂蛋白B100基因Q3500R位点突变及低密度脂蛋白受体基因突变后的100例单纯性高胆固醇血症患者,提取其基因组DNA,采用聚合酶链反应方法扩增枯草溶菌素转化酶9基因的12个外显子,进行DNA测序分析,同时选100例健康人群作为对照。结果 100例高胆固醇血症患者中,6例发现3处错义突变(D320N、V312F、R319E)、1处框移突变(934delGV312S)、3处同义突变(A305A、Q342Q、K125K)和1处剪接点突变(第2内含子5'剪接位点突变)。结论枯草溶菌素转化酶9基因在以上位点发生的突变可引起单纯性高胆固醇血症。枯草溶菌素转化酶9基因突变可能与国人高胆固醇血症有关。

冠心病患者外周血人枯草溶菌素转化酶9基因V312F位点的多态性及其临床意义

目的探讨外周血人枯草溶菌素转化酶9(PCSK9)基因V312F多态性与不同类型冠心病之间的关系及临床意义。方法选取2014年1月-2016年1月年在我院就诊的不同类型冠心病患者3 560例作为病例组,按照解剖及病理生理变化分为心绞痛、心肌梗死、无症状心肌缺血、缺血性心肌病、猝死5组,同期健康体检者1 000例为对照组。应用聚合酶链反应(PCR)结合DNA直接测序技术,对所有入选者PCSK9基因V312F(T/G)多态位点进行分型。多因素Logistic回归分析PCSK9基因V312F多态位点与不同类型冠心病的相关性。同时检测研究对象的血脂及PCSK9水平。结果病例组血清PCSK9、TC、TG、LDLC、阳性家族史的比例高于对照组,HDLC低于对照组(均P<0.05);病例组中猝死组各指标变化最明显,无症状心肌缺血组变化最小。病例组中TT、GT基因型和T等位基因频率分别为3.4%、16.6%和11.7%,明显高于对照组(1.1%、10.2%、6.2%)(P均<0.01)。病例组中猝死组TT、GT的基因型频率、T等位基因频率最高,无症状心肌缺血组最低(P<0.05)。Logistic回归分析发现PCSK9基因V312F(T/G)多态位点TT基因型与冠心病的严重程度有关(OR值为8.463,95%CI为3.505~17.854,P<0.001)。结论PCSK9基因V312F(T/G)位点基因突变与冠心病严重程度有关。

载脂蛋白B100基因、低密度脂蛋白受体基因和枯草溶菌素转化酶9基因多态性与急性缺血性脑卒中伴脂代谢异常人群的相关性研究

目的探讨载脂蛋白B100(ApoB100)基因、低密度脂蛋白受体(LDLR)基因和枯草溶菌素转化酶9(PCSK9)基因不同单核苷酸多态性(SNP)位点基因型和等位基因与急性缺血性脑卒中(AIS)、血脂异常之间的关联性和临床意义。方法选择在我院神经内科住院的急性缺血性脑卒中合并脂代谢异常的患者60例为病例组,60名我院体检中心健康体检者为对照组。采用PCR方法检测ApoB100、LDLR、PCSK9基因不同SNP位点的信息。分析两组ApoB100、LDLR、PCSK9基因不同SNP位点的基因型和等位基因的表达情况及其与血脂的关系。结果LDLR基因rs1433099和PCSK9基因rs17111503位点在两组人群中存在基因多态性。LDLR基因rs1433099等位基因A为AIS发病的危险因素(OR=2.677,P<0.05)。PCSK9基因rs17111503等位基因A为急性缺血性脑卒中发病的危险因素(OR=2.486,P<0.05)。rs1433099和rs17111503等位基因GA+AA型患者血清低密度脂蛋白水平均明显高于GG型(均P<0.05)。结论ApoB100基因rs693、LDLR基因rs5925、PCSK9基因rs2479408、rs529787与AIS患病风险无关。LDLR基因rs1433099和PCSK9基因rs17111503的等位基因A是AIS发病的危险因素,且与脂代谢异常有关。

四种中药单体对人肝癌HepG2细胞枯草溶菌素转化酶9表达的影响

目的探讨齐墩果酸、金丝桃苷、槲皮素和熊果酸对人肝癌HepG2细胞枯草溶菌素转化酶9(proprotein convertase subtilisin/kexin 9,PCSK9)表达的影响,为寻找新型降血脂药物提供理论依据。方法培养HepG2细胞,用不同浓度的4种药物分别作用24 h,用RT-PCR、Western blot分别检测PCSK9 mRNA和PCSK9蛋白的表达。用MTT法检测细胞增殖的情况。筛选出可抑制PCSK9表达的药物后,选择最佳药物浓度,处理HepG2细胞0、3、6、12、24 h后,分别用RT-PCR和Western blot检测PCSK9mRNA和PCSK9蛋白表达,观察其抑制作用是否存在时间依赖性。结果金丝桃苷、槲皮素和熊果酸对HepG2细胞PCSK9的表达没有影响(P>0.05),75μmol/L和100μmol/L齐墩果酸处理24 h,与对照组比较PCSK9的表达明显减少,并呈一定的浓度依赖性(P<0.05)。100μmol/L齐墩果酸处理HepG2细胞0、3、6、12、24 h后,12 h组和24 h组明显抑制PCSK9的表达,并呈一定的时间依赖性(P<0.05)。结论齐墩果酸可降低HepG2细胞PCSK9mRNA和蛋白水平,且这种作用呈时间、剂量依赖性。

人类枯草溶菌素转化酶9基因影响胆固醇代谢的研究进展

家族性高胆固醇血症(FH)是一种由低密度脂蛋白受体(LDLR)缺陷所导致的、以血总胆固醇升高为特征的常染色体显性遗传病。目前普遍认为FH是复杂的多基因病。近年研究发现,人类枯草溶菌素转化酶9(PCSK9)在血胆固醇代谢中起重要作用。一些PCSK9突变可减少LDLR总量,进而导致FH。而另一些PCSK9突变影响自身活性,导致低胆固醇血症。本文就PCSK9的基因结构、功能以及该基因不同突变体影响血胆固醇代谢的最新研究进展作一综述。

家族性高胆固醇血症新致病基因——枯草溶菌素转化酶9的研究进展

家族性高胆固醇血症是一种常染色体显性遗传疾病,患者低密度脂蛋白胆固醇大幅度升高,严重者青少年时期可早发冠心病。研究发现该疾病的致病基因存在异质性,其中人类枯草溶菌素转化酶9基因突变可导致严重的家族性高胆固醇血症。该基因属于蛋白转化酶家族,其蛋白结构、功能及致病机制尚不清楚,文章追踪最新研究进展,对该基因导致家族性高胆固醇血症的机制进行综述。

人枯草溶菌素转化酶9抑制剂依洛尤单抗在经皮冠状动脉介入术后应用的临床观察

目的分析人枯草溶菌素转化酶9抑制剂依洛尤单抗治疗经皮冠状动脉介入术后临床应用价值。方法连续纳入2020年7月至2021年6月就诊于上海交通大学医学院附属新华医院心血管内科接受经皮冠状动脉介入术的冠状动脉粥样硬化性心脏病患者90例,依据随机数字表法将患者分为试验组及对照组,每组各45例。对照组给予阿托伐他汀钙,试验组在此基础上给予皮下注射依洛尤单抗,治疗3个月。分析受试者治疗前后血脂水平、炎症因子水平及不良反应情况,收集并比较治疗过程中受试者心绞痛发作次数及持续时间。结果研究发现,两组患者治疗前临床基线资料具有可比性;与治疗前相比,治疗后两组患者低密度胆固醇脂蛋白及总胆固醇均显著下降,高密度胆固醇脂蛋白水平显著升高,且试验组上述指标下降或升高幅度显著高于对照组,差异有显著性(P<0.05);与治疗前相比,治疗后两组患者肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、超敏C反应蛋白均显著下降,且试验组上述指标降幅显著高于对照组;与治疗前相比,治疗后两组患者胸痛发作次数及持续时间均显著缩短,且试验组胸痛发作次数及持续时间均显著小于对照组。结论人枯草溶菌素转化酶9抑制剂依洛尤单抗能够改善PCI术后血脂代谢,抑制机体炎症反应,改善患者临床症状,且不增加不良反应。

齐墩果酸对HepG2细胞枯草溶菌素转化酶9表达的影响

目的观察齐墩果酸(oleanolic acid,OA)对HepG2细胞PCSK9表达的影响,为了解OA降低血脂的分子机制提供实验依据。方法体外培养HepG2细胞,用不同浓度的OA作用HepG2细胞24 h后,用RT-PCR检测PCSK9 mRNA的表达。筛选出合适的OA浓度并以此浓度处理HepG2细胞,在0、3、6、12、24 h时分别用RT-PCR检测PCSK9 mRNA和Western Blot检测PCSK9蛋白的表达。用MTT法检测细胞活力的情况。荧光素酶报告基因实验检测OA对HepG2细胞PCSK9启动子活性的影响。结果与空白对照组比较,75μmol/L和100μmol/L OA处理HepG2细胞24 h后PCSK9 mRNA和蛋白的表达明显减少(P<0.05),其中,100μmol/L OA组下调更显著。与0 h组比较,100μmol/L OA处理HepG2细胞3、6、12、24 h,PCSK9 mRNA和蛋白的表达均下降(P<0.05)。MTT法检测结果表明,与对照组比较,75μmol/L和100μmol/L OA组在12和24 h对HepG2细胞的活力没有影响(P>0.05),在36和48 h能够抑制HepG2细胞的活力(P<0.05)。双荧光素酶报告基因活性检测结果显示OA能下调HepG2细胞PSCK9启动子的活性(P<0.05)。结论 OA可呈时间、剂量依赖性下调HepG2细胞PCSK9mRNA和蛋白水平。OA的降脂作用可能与其抑制PCSK9表达有关。

福建汉族人群人枯草溶菌素转化酶9基因rs505151位点多态性与脂代谢及冠状动脉粥样硬化性心脏病相关性的研究

目的探讨福建汉族人群中人枯草溶菌素转化酶9(proprotein convertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9)基因rs505151位点多态性与脂代谢以及冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary artherosclerosis heart disease,CHD,简称“冠心病”)的相关性。方法选取2019年8月到2019年12月期间就诊福建省立医院并行冠脉造影检查的福建汉族患者244例,根据冠状动脉造影(coronary angiography,CAG)结果分为CHD组(184例)和对照组(60例),收集患者的基本资料并留取空腹血标本,经酶法测定总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein-cholesterol,LDL-Ch)等脂代谢指标,并采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)技术检测PCSK9基因rs505151位点基因多态性。结果CHD组G等位基因频率为10.87%,显著高于对照组(P=0.003),AA、AG、GG三种基因型分布频率在两组间的差异具有统计学意义(P=0.013);携带G等位基因的患者血清TC、LDL-Ch水平更高(GG型>AG型>AA型),冠脉病变更重(Gensini评分:GG型>AG型>AA型)。结论福建汉族人群PCSK9基因rs505151位点中G等位基因频率在CHD人群中更高,携带有G等位基因的患者血清TC、LDL-Ch水平更高,且冠脉病变更重,rs505151位点G等位基因可能是CHD高风险突变位点。

动态动脉硬化指数联合血清肿瘤坏死因子受体相关因子6、前蛋白转化酶枯草溶菌素9对急性分水岭脑梗死病人的预后价值

目的探究动态动脉硬化指数(AASI)联合血清肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)、前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)对急性分水岭脑梗死(CWI)病人的预后价值。方法选取2019年8月至2021年8月保定市第二中心医院收治的96例急性CWI病人为研究组,另取同期体检健康者80例为对照组。收集病人一般临床资料,并对研究组和对照组的血清TRAF6、PCSK9水平及AASI进行检测;根据研究组病人预后情况将其分为预后良好组(67例)和预后不良组(29例),多因素logistic回归分析急性CWI病人预后的影响因素;绘制AASI与血清TRAF6、PCSK9对急性CWI病人预后评估的受试者操作特征曲线(ROC曲线)。结果研究组血清TRAF6(1.48±0.34)µg/L、PCSK9(97.25±14.25)µg/L水平及AASI(0.56±0.15)高于对照组(0.87±0.19)µg/L、(82.78±9.17)µg/L、(0.36±0.11)(P<0.05)。预后良好组与预后不良组年龄、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、空腹血糖、狭窄程度及血管斑块性质差异有统计学意义(P<0.05)。预后不良组血清TRAF6(1.77±0.37)µg/L、PCSK9(104.82±17.93)µg/L水平及AASI(0.62±0.12)高于预后良好组(1.35±0.21)µg/L、(93.97±12.65)µg/L、0.53±0.09(P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示NIHSS评分、狭窄程度、血管斑块性质、AASI、血清TRAF6、PCSK9水平是急性CWI病人预后的影响因素(P<0.05)。AASI联合血清TRAF6、PCSK9预测急性CWI病人预后的AUC是0.92,灵敏度为93.10%,特异度为76.12%,Youden指数为0.69,优于AASI、TRAF6、PCSK9各自单独预测(P<0.05)。结论急性CWI病人血清TRAF6、PCSK9水平显著升高,联合AA-SI对病人的预后状况具有较高的预测效能,可为临床的合理干预和改善病人预后提供依据。

天然化合物抑制前蛋白转化酶枯草溶菌素9的作用机制研究进展

动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)是一种复杂的慢性进行性动脉疾病,被视为全球死亡的重要原因。高水平的血浆低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein-cholesterol, LDL-C)是AS发生和发展的关键危险因素。血浆中循环的前蛋白转化酶枯草溶菌素9 (proprotein convertase subtilisin/kexin type 9, PCSK9)是一种肝细胞合成的丝氨酸蛋白酶,是低密度脂蛋白受体(low density lipoprotein receptor,LDLR)的关键调节因子,在控制血浆LDL-C水平方面发挥着关键作用,它通过与肝脏LDLR结合,形成PCSK9-LDLR复合物导致LDLR在溶酶体中降解,并减少肝细胞膜表面的LDLR的数量,进而导致血浆LDL-C水平升高。目前,临床常用他汀类降脂药物,如阿托伐他汀调节LDL-C水平,延缓AS,但药物起效慢,单一应用难以达到理想的效果,且会在不同程度上产生不良影响。因此, PCSK9是一种新的降低胆固醇的治疗靶点。本综述旨在阐明调控PCSK9的途径及改善AS的天然化合物的研究现状和潜在的治疗意义,以期为防治AS提供参考。

血清前蛋白转化酶枯草溶菌素9与急性心肌梗死患者经皮冠状动脉介入治疗预后不良的相关性

目的探讨血清前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)与急性心肌梗死患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)预后不良的关系。方法选取2018年6月至2021年12月于邯郸市中心医院接受PCI术的急性心肌梗死患者207例,随访1年将患者分为预后良好组171例,预后不良组36例。收集患者临床资料并检测PCI术前、术后1 d、术后3 d、术后5 d血清PCSK9、心肌肌钙蛋白I(cTnI)水平;比较预后良好组与预后不良组患者临床资料、不同时间点血清PCSK9、cTnI水平;Logistic回归分析影响急性心肌梗死患者PCI术后预后不良的因素;受试者工作特征曲线评价PCI术后3 d、术后5 d血清PCSK9水平对急性心肌梗死患者PCI术后预后不良的预测价值。结果预后不良组患者高血压史比例、低密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯、PCI术后3 d和术后5 d血清PCSK9、cTnI水平高于预后良好组,差异有统计学意义(t/χ2=6.471、14.615、10.698、10.024、30.088、19.299、13.148,P<0.05);有高血压史、PCI术后3 d和术后5 d血清PCSK9水平高是影响急性心肌梗死患者PCI术后预后不良的危险因素[OR(95%CI)=2.614(1.382~4.943)、2.847(1.782~4.548)、2.646(1.487~4.708),P<0.01];PCI术后3 d血清PCSK9水平预测急性心肌梗死患者PCI术后预后不良的曲线下面积(AUC)为0.871,截断值为29.34 ng/mL,敏感度为74.71%,特异度为81.52%;PCI术后5 d血清PCSK9水平预测急性心肌梗死患者PCI术后预后不良的AUC为0.911,截断值为20.12 ng/mL,敏感度为85.72%,特异度为81.93%。结论监测急性心肌梗死患者PCI术后3 d和术后5 d血清PCSK9水平,对患者不良预后有一定的预测价值。

前蛋白转化酶枯草溶菌素9抑制剂通过降低血管细胞黏附分子-1减缓载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化进展

目的探究前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)抑制剂减缓动脉粥样硬化(AS)的分子机制。方法选取45只载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠作为研究对象,采用随机数字表法分为对照组、AS模型组和PCSK9抑制剂干预组,每组15只。以普通喂养方式为对照组,通过高脂饮食诱导构建AS模型组,高脂喂养并给予PCSK9抑制剂作为PCSK9抑制剂干预组。实验结束后取小鼠血浆测定血脂浓度;取小鼠主动脉根部,制作切片并通过油红O染色及苏木精-伊红(HE)染色观察AS病理形态学改变;通过免疫组化染色测定主动脉组织血管细胞黏附分子1(VCAM-1)表达;取小鼠胸主动脉利用real-time PCR和Western Blot法测定主动脉血管中VCAM-1的mRNA含量及蛋白表达;ELISA测定血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)浓度。结果AS模型组小鼠血浆中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平高于对照组,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);PCSK9抑制剂干预组血浆TC、TG、LDL-C、HDL-C水平与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05),PCSK9抑制剂干预组血浆TC、TG、LDL-C水平低于AS模型组,HDL-C高于AS模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。AS模型组主动脉硬化斑块相对面积大于对照组,而PCSK9抑制剂干预组斑块相对面积小于AS模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。AS模型组和PCSK9抑制剂干预组小鼠主动脉VCAM-1蛋白表达及mRNA水平高于对照组,而PCSK9抑制剂干预组VCAM-1蛋白表达及mRNA水低于AS模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。AS模型组血浆TNF-α、PAI-1水平高于对照组,而PCSK9抑制剂干预组血浆TNF-α、PAI-1水平低于AS模型组,差异有统计学意义(P<0.05),但PCSK9抑制剂干预组血浆TNF-α、PAI-1含量与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论PCSK9抑制剂可降低血液中炎症因子TNF-α和PAI-1浓度,从而减少主动脉VCAM-1的表达,进而减缓动脉粥样硬化进展。

前蛋白转化酶枯草溶菌素9抑制剂的临床研究及应用进展

前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)抑制剂可通过抑制肝细胞表面低密度脂蛋白受体的降解对脂质代谢起到调节作用。目前已有多项临床研究证明,PCSK9抑制剂单一药物或与他汀类药物联合使用可显著降低低密度脂蛋白胆固醇水平。本文综述了当前PCSK9抑制剂的重要临床研究及应用进展,并简要总结了常见PCSK9抑制剂的安全性、有效性及临床应用现状。

急性缺血性脑卒中患者前蛋白转化酶枯草溶菌素9与血脂水平及临床意义

目的:探讨前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)与急性缺血性脑卒中(AIS)患者的血脂水平及与AIS严重程度的相关性。方法:选取天津市北辰医院诊治的200例AIS患者作为AIS组,另选取体检的200例健康者为对照组。收集两组临床资料,检测两组血脂和PCSK9水平,AIS组根据美国国立卫生研究院脑卒中量表(NIHSS)进行评分,分为轻-中度组(NIHSS评分<15分)和重度组(NIHSS评分≥15分)。使用Pearson相关性分析探讨在AIS组中PCSK9与AIS患者血脂水平、AIS严重程度相关性。结果:AIS组的三酰甘油(TG)、血浆总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、PCSK9水平均高于对照组(P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。AIS组患者PCSK9水平与TG、TC、LDL-C、HDL-C均存在相关性(P<0.05)。重度组患者的PCSK9表达水平显著高于轻-中度组(P<0.05)。结论:脑卒中患者多伴随有血脂异常、PCSK9蛋白水平升高,且PCSK9蛋白水平与AIS患者的血脂水平、疾病严重程度存在一定相关性。

前蛋白转化酶枯草溶菌素9抑制剂治疗急性心肌梗死的研究进展

冠状动脉(下称冠脉)粥样硬化是导致急性心肌梗死的主要病理基础。目前主流观点认为前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)与冠脉粥样硬化的发生、发展有直接关系,因此近年来PCSK9抑制剂已逐渐应用于急性心肌梗死的治疗中。本文将重点阐述PCSK9抑制剂与急性心肌梗死的关系,为PCSK9抑制剂在急性心肌梗死的应用提供参考。

药师基于PDCA循环管理法对前蛋白转化酶枯草溶菌素9抑制剂处方规范性管理的效果分析

目的评价PDCA循环管理法(即按照计划-实施-检查-处理循环法进行质量管理)干预前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)抑制剂处方规范性的效果,提高PCSK9抑制剂的处方合理性。方法以首都医科大学附属北京安贞医院PCSK9抑制剂PDCA循环管理实施前(2022年1月1日至2022年3月31日)的医嘱数据作为对照组,PDCA循环管理实施后(2022年4月1日至2022年6月30日)的医嘱数据作为干预组。回顾性分析对照组和干预组PCSK9抑制剂(依洛尤单抗注射液和阿利西尤单抗注射液)的处方数量、处方不合格率、例均使用数量等指标。结果干预组依洛尤单抗注射液和阿利西尤单抗注射液的医嘱不合格率均低于对照组[7.9%(251/3165)比17.7%(448/2534)、6.4%(140/2173)比17.9%(234/1308)],差异均有统计学意义(χ^(2)=124.30、111.57,均P<0.01)。干预组依洛尤单抗注射液和阿利西尤单抗注射液的例均使用数量分布较对照组有显著改善,差异均有统计学意义[(2.03±0.49)支比(1.99±0.66)支、(2.03±0.50)支比(1.99±0.66)支](t=176.09、97.74,均P<0.01)。结论PDCA循环管理法能有效降低PCSK9抑制剂处方不合格率,提升其临床使用的合理性。

前蛋白转化酶枯草溶菌素9抑制剂与阿托伐他汀联用对介入治疗急性心肌梗死术后的影响

目的:分析急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)患者行经皮冠状动脉介入(percutaneous coronary intervention,PCI)术治疗后联用前蛋白转化酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin kexin type 9,PCSK9)抑制剂与阿托伐他汀治疗对其心室功能、炎性因子、血脂水平及主要不良心血管事件(major adverse cardiovascular events,MACE)的影响。方法:选择2020年9月至2021年9月,本院收治的98例AMI并行PCI术治疗患者加以研究,随机数字表法分观察组及对照组,各49例,对照组予以阿托伐他汀治疗,观察组于对照组的基础之上联用PCSK9抑制剂治疗;比较两组治疗前与治疗3个月后LVEDD、LVESD及LVEF、hs-CRP、CK-MB、TNF-α、PCSK9、TG、载脂蛋白B(pdipop oteir B,apoB)、LDL-C的变化,比较用药60d中MACE事件以及不良反应的发生状况。结果:治疗后,两组LVEDD、LVESD、hs-CRP、CK-MB、TNF-α、PCSK9、TG、apoB、LDL-C水平较治疗前均显著降低(P<0.05),LVEF水平较治疗前显著升高(P<0.05),且观察组LVEDD、LVESD、hs-CRP、CK-MB、TNF-α、PCSK9、TG、apoB、LDL-C水平的降低值及LVEF水平的升高值均大于对照组(P<0.05)。两组Ⅱ级、Ⅲ级心力衰竭、靶血管血运重建、心源性死亡、再发心肌梗死的发生率,均差异无统计学意义(P>0.05),而观察组60 d中MACE事件总发生率显著低于对照组(P<0.05)。两组肌痛、心律失常、神经认知异常、恶心呕吐、新发糖尿病的发生率以及不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:与阿托伐他汀单独治疗相比,PCSK9抑制剂与阿托伐他汀联用治疗AMI行PCI术后患者疗效更为显著,更有助于改善心室功能,降低炎性因子与血脂水平,减少MACE事件的发生状况,不会增加不良反应。

血清微小RNA-7a-5p及前蛋白转化酶枯草溶菌素9水平与急性胰腺炎患者病情严重程度及预后的关系

目的分析血清微小RNA-7a-5p(miR-7a-5p)、前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)水平与急性胰腺炎(AP)患者病情严重程度及预后的关系。方法选取2020年1月至2022年1月重庆医科大学附属巴南医院收治的185例AP患者为AP组,另选取同期本院体检健康者53例为对照组。AP患者根据病情严重程度分为轻症组(81例)、中度重症组(53例)、重症组(51例)。收集AP患者的临床资料,检测所有受试者血清miR-7a-5p、PCSK9水平。分析AP患者预后不良的危险因素以及血清miR-7a-5p、PCSK9水平单独与联合预测AP患者预后不良的价值。结果AP组血清miR-7a-5p、PCSK9水平均高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.001)。轻症组、中度重症组、重症组血清miR-7a-5p、PCSK9水平逐渐升高[miR-7a-5p:(2.12±0.43)、(2.51±0.33)、(3.00±0.43);PCSK9:(36.1±2.6)、(38.6±2.2)、(41.3±2.2)μg/L],差异均有统计学意义(均P<0.001)。多因素Logistic回归分析显示,重症AP、重症监护病房停留时间延长和红细胞体积分布宽度、血肌酐、C反应蛋白、miR-7a-5p、PCSK9水平升高为AP患者预后不良的独立危险因素(均P<0.05)。受试者工作特征曲线分析显示,血清miR-7a-5p、PCSK9水平单独与联合预测AP患者预后不良的曲线下面积分别为0.780、0.773、0.877,二者联合预测AP患者预后不良的曲线下面积大于单独预测(均P<0.05)。结论AP患者血清miR-7a-5p、PCSK9水平升高与病情严重程度和预后不良有关,二者联合对AP患者预后不良的辅助预测价值较高。

前蛋白转化酶枯草溶菌素9通过肝源性巨噬细胞移动抑制因子调控动脉粥样硬化炎症反应的研究

目的利用人细胞株,系统研究PCSK9是否通过肝源性MIF调控单核/巨噬细胞炎症反应,进而为动脉粥样硬化(Atherosclerosis)等炎症性疾病的临床防控提供新的思路和依据。方法利用小干扰RNA(Small interfering RNA,SiRNA)介导的MIF基因转染THLE-3细胞,将实验分为MIF低表达组(Si-MIF-THLE-3)和MIF正常表达组(Con-THLE-3),通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-qPCR)检测肝细胞中PCSK9、MIF mRNA表达。在Si-MIF-THLE-3组和Con-THLE-3组中分别给与PCSK9重组蛋白进行干预,通过Western Blot检测肝细胞中PCSK9、MIF蛋白表达,并用ELISA测定培养液中PCSK9及MIF的含量,并收集上述肝细胞的培养液,-80℃冻存。利用SiRNA介导的MIF基因转染THP-1细胞,将实验分为MIF低表达组(Si-MIF-THP-1)和MIF正常表达组(Con-THP-1),通过Western Blot检测MIF的蛋白表达。将收集的肝细胞培养液分别加入Si-MIF-THP-1和Con-THP-1组共培养48 h,其中PCSK9干预组另设TLR4特异性抑制剂TAK-242(1μM)(P+T)。通过ELISA检测炎症因子表达;Western Blot检测THP-1细胞株中TLR4—NF-κB信号通路的表达。结果①Si-MIF-THLE-3组较Con-THLE-3组的MIF mRNA表达显著降低,而PCSK9的mRNA表达升高(P均<0.05)。②PCSK9干预后肝细胞MIF蛋白的表达以及分泌至培养液中的含量升高,而PCSK9蛋白的表达以及培养液中的含量不变(P均<0.05)。③Si-MIF-THP-1组较Con-THP-1组的MIF蛋白表达显著降低(P均<0.05)。④Si-MIF-THP-1组较Con-THP-1组炎症因子的表达低,PCSK9干预组较正常组和P+T组的炎症因子表达升高;PCSK9干预组较正常组和P+T组的TLR4蛋白表达升高;Si-MIF-THP-1组较Con-THP-1组的IKBα蛋白表达高,PCSK9干预组较正常组和P+T组的IKBα蛋白表达低;PCSK9干预组较正常组和P+T组的P65/P50蛋白表达高(P均<0.05)。结论PCSK9可诱导肝细胞MIF的合成与分泌,肝细胞分泌的MIF可与巨噬细胞表面受体TLR4结合,激活下游NF-κB炎症信号通路,促进TNF-α、白介-6、白介-1β、单核细胞驱化因子-1等炎症因子的分泌,激发炎症效应。