枯草芽孢杆菌活菌产品对皮肤用药的安全性分析

目的探讨皮肤应用枯草芽孢杆菌活菌产品的安全性。方法4只家兔背部皮肤左右分别设给药组和空白对照组，用枯草芽孢杆菌活菌产品多次局部涂抹家兔的皮肤进行刺激，观察皮肤刺激性；将豚鼠完全随机分为空白对照组、给药组和阳性对照组，每组10只，空白对照组给予赋形剂，给药组给予枯草芽孢杆菌产品，阳性对照组给予1％2，4-二硝基氯代苯。对皮肤多次局部涂抹致敏，观察过敏反应。结果枯草芽孢杆菌活菌产品对家兔皮肤刺激强度为0．14分，小于0．5分，后续观察未出现可逆反应，无明显皮肤刺激性反应；给药组豚鼠致敏率为0分，致敏等级为I级，无皮肤过敏反应。结论枯草芽孢杆菌活菌产品局部毒性小，皮肤用药具有良好的安全性。

枯草芽孢杆菌G10合成表面活性素的发酵条件优化

为提高表面活性素的产量,该研究以具有合成表面活性素能力的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)G10菌株为研究对象,利用酸沉淀和甲醇抽提法相结合提取表面活性素,对其表面活性及抑菌性能进行测定,并通过单因素试验和正交试验优化枯草芽孢杆菌G10合成表面活性素的发酵条件及培养基组成。结果表明,表面活性素具有明显的表面活性和抑菌活性,其对大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的抑菌圈直径分别为1.8 cm、1.9 cm、1.4 cm。合成表面活性素最优发酵条件为:转速200 r/min,发酵温度30℃,发酵培养基初始pH值为7.5;最优发酵培养基组分为:葡萄糖22 g/L,L-谷氨酸5.0 g/L,Mg SO_(4)0.5 g/L,KCl 0.5 g/L,KH_(2)PO_(4)1 g/L,Fe SO_(4)·7H_(2)O 0.15 g/L,MnSO_(4)0.65 g/L,CuSO_(4)·5H_(2)O 0.16 g/L。在此优化条件下,枯草芽孢杆菌G10发酵表面活性素平均产量为9.89 g/L,表面活性素产量较优化前提高了46.7%。

酸碱度和含水量对枯草芽孢杆菌生物有机肥活性和效应研究

为了生产高品质的枯草芽孢杆菌生物有机肥料,以腐熟羊粪为主要原料,通过糠醛渣的添加量调节肥料的酸碱度(pH分别为6.00、6.50、7.00、7.50、8.00、8.88)来测定活菌数确定最佳配比,并通过不同的水分含量来确定枯草芽孢杆菌生物肥料最佳含水量。结果表明,用糠醛渣的添加量来调节生物有机肥料的酸碱度,不同酸碱度对生物肥料中枯草芽孢杆菌活菌数影响不显著,各处理保存到180 d后,活菌数维持在10×10^(9)cfu/g左右。酸碱度对生物肥料中丝状真菌杂菌数的影响十分显著(P<0.01),杂菌数先随着pH的升高而升高,当pH为7.00时,杂菌数最多,达6.17×10^(6)cfu/g;当pH大于7.00或者小于7.00时,杂菌数减少。不同酸碱度的生物肥料对种子发芽指数有显著影响,随着pH升高种子发芽指数降低,说明生物肥料中pH过高会抑制根系的生长。随着水分含量的增加,枯草芽孢杆菌的数量逐渐减少,而肥料中丝状真菌杂菌数随着水分含量的增加而增加,水分含量达到40%、保存180 d时杂菌数最多,达3.97×10^(7)cfu/g;水分含量小于10%时,杂菌基本不生长。综合分析,枯草芽孢杆菌生产生物肥料的最佳pH为6.00~7.00,水分含量以小于20%为宜。

高压热杀菌处理时D-果糖对枯草芽孢杆菌芽孢灭活的抑制机制

研究高压热杀菌(high-pressure thermal sterilization,HPTS)处理时D-果糖对枯草芽孢杆菌芽孢灭活的抑制作用。HPTS处理压力为200、600 MPa,处理温度为25、65、75℃,处理时间为20 min,D-果糖质量分数为0、15%、30%、60%。使用流式细胞术检测处理前后芽孢内膜的损伤情况,采用傅里叶红外光谱对处理前后芽孢蛋白质和内膜脂质进行分析,以揭示蛋白质结构与内膜脂质相态的变化。HPTS处理后芽孢内膜通透性增大,内膜完整性受损,然而随着添加的D-果糖质量分数的升高,芽孢内膜脂质的相态由液晶态逐渐转变为凝胶态,内膜稳定性增加、通透性降低、完整性提高,且芽孢蛋白质的有序二级结构的含量增加。不添加D-果糖时,600 MPa、75℃处理20 min后,芽孢死亡了5.31 lg(CFU/mL),芽孢悬浮液OD_(600)下降到0.41,2,6-吡啶二羧酸(2,6-pyridinedicarboxylic acid,DPA)泄漏率达93.56%,内膜受损的芽孢比率达到80.95%,芽孢蛋白质的α-螺旋和β-折叠结构含量分别下降到16%和17%;而当添加的D-果糖质量分数提升到60%时,相同条件的HPTS处理后,芽孢存活数量上升了1.69 lg(CFU/mL),芽孢悬浮液OD_(600)上升了0.09,内膜受损的芽孢比率减少了20.74个百分点,芽孢蛋白质的α-螺旋和β-折叠结构含量分别回升到25%和28%。D-果糖抑制了HPTS处理对芽孢结构的破坏和孢内关键物质的泄漏,且这种作用与D-果糖质量分数呈正相关。

枯草芽孢杆菌对湖羊瘤胃菌群和血清代谢物的影响

【目的】利用16S rDNA高通量测序技术和LC-MS/MS非靶向代谢组学技术,研究短期和长期饲喂添加枯草芽孢杆菌日粮对育肥湖羊瘤胃内容物菌群和血清代谢物的影响。【方法】选择日龄((60±10)d)相近、体质量((19.51±2.07)kg/头)接近的湖羊断奶公羔36只,随机分为3组,分别为对照组(CON)、枯草芽孢杆菌Ⅰ组(BSN)和枯草芽孢杆菌Ⅱ组(BSH),每组12只羊。CON组饲喂基础饲粮,BSN组饲喂基础饲粮+100 mg/kg枯草芽孢杆菌,BSH组饲喂基础饲粮+200 mg/kg枯草芽孢杆菌。预试期10 d,正试期60 d,分别在正试期的第30天(短期)和第60天(长期)每组随机选择6只羊取瘤胃内容物和血清进行分析。【结果】①短期和长期饲喂添加枯草芽孢杆菌饲粮对湖羊瘤胃微生物丰富度指数Chao 1指数和多样性指数Shannon指数、Simpson指数均无显著影响(P>0.05)。湖羊瘤胃菌群在门水平上,短期饲喂BSN组的螺旋体菌门、迷踪菌门相对丰度较CON组显著降低(P<0.05),长期饲喂BSH组的变形菌门相对丰度显著升高(P<0.05);在属水平上,短期饲喂BSN组普雷沃氏菌属UCG-003相对丰度显著降低(P<0.05),而瘤胃球菌属1相对丰度显著升高(P<0.05)。长期饲喂BSN和BSH组湖羊普雷沃氏菌属UCG-003相对丰度显著降低(P<0.05)。②短期饲喂BSN和BSH组湖羊血清代谢物中L-苹果酸、D-2,3-二羟基丙酸、5-氨基水杨酸、2-氮杂环丁烷羧酸、棕榈酰溶血磷脂酸、1-磷酸果糖、核黄素均较CON组显著降低(P<0.05);BSN组5-磷酸脱氧核糖、丙烯酸、甘氨酰异亮氨酸、2-酮丁酸、1,2,4-偏苯三酚、β-D-半乳糖、丁酸乙酯均较CON组显著降低(P<0.05),而3′-磷酸腺苷较CON组显著升高(P<0.05),差异代谢物相关通路为辅因子的生物合成、核黄素代谢、磷酸转移酶系统等。长期饲喂BSH组10E,12Z-共轭亚油酸、N4-乙酰胞嘧啶、吡咯烷酮羧酸、9,10-环氧十八烷酸、肌酸酐均较CON和BSN组显著升高(P<0.05),差异代谢物相关性最高的关键通路为程序性坏死、鞘脂信号通路和鞘脂代谢。③属水平上差异微生物和差异代谢物相关性分析发现,普雷沃氏菌属UCG-003与大豆苷显著负相关(P<0.05),螺旋菌属2与3′-磷酸腺苷显著负相关(P<0.05),而瘤胃球菌属UCG-011与对苯二甲酸、喹啉酸、5,7-二羟基-2-(4-羟基-3,5-二甲氧基苯基)-4H-色胺-4-酮显著正相关(P<0.05)。【结论】枯草芽孢杆菌短期饲喂可调节湖羊瘤胃微生态平衡,使纤维降解有关的细菌相对丰度增加,但长期饲喂不仅调节能力降低,且长期大剂量(200 mg/kg饲粮)饲喂还会引起瘤胃微生物菌群失调;同时,枯草芽孢杆菌可影响湖羊代谢过程,短期饲喂可能调控辅因子的生物合成、核黄素代谢、磷酸转移酶系统等代谢过程,长期饲喂可能调控程序性坏死、鞘脂信号通路和鞘脂代谢。

枯草芽孢杆菌复合制剂对蛋鸡生产性能和肠道菌群的影响

试验旨在探究枯草芽孢杆菌复合制剂对蛋鸡生产性能和肠道菌群的影响。选取30只500日龄体重相近的蛋鸡随机分为2组,每组3个重复,每个重复5只蛋鸡。CK组(对照组)饲喂玉米-豆粕基础饲粮,T组在基础饲粮中添加1 g/kg枯草芽孢杆菌复合制剂。试验期70 d。结果显示,与CK组相比,T组料蛋比显著降低(P<0.05);在门水平,十二指肠厚壁菌门相对丰度极显著增加(P<0.01),回肠放线菌门相对丰度显著增加(P<0.05),盲肠变形菌门相对丰度极显著降低(P<0.01);在属水平,十二指肠乳杆菌属相对丰度极显著增加(P<0.01),棒状杆菌属丰度极显著降低(P<0.01),回肠肠球菌属和卡多维亚氏菌(Aeriscardovia)相对丰度显著或极显著增加(P<0.05或P<0.01),盲肠理研菌科相对丰度显著增加(P<0.05)。β多样性分析显示,十二指肠和回肠菌群结构具有一定的相似性,且与盲肠菌群结构不同。研究表明,添加枯草芽孢杆菌复合制剂可促进乳酸菌、Aeriscardovia生长,优化了肠道菌群结构,提高了饲料利用率。

耳穴压豆联合枯草杆菌二联活菌颗粒在心脏瓣膜置换术后腹胀患者中的应用效果

目的探析耳穴压豆联合枯草杆菌二联活菌颗粒在心脏瓣膜置换术后腹胀患者中的应用效果。方法选取2022年1月至6月于南昌大学第二附属医院心脏大血管外科100例行瓣膜置换术后腹胀患者作为研究对象,根据随机数字表法分为对照组和观察组,每组50例。对照组接受多潘立酮常规干预,观察组加用耳穴压豆联合枯草杆菌二联活菌颗粒干预,两组均干预1周。比较两组的护理效果、胃肠道症状消失时间(排气时间、排便时间以及肠胀气消失时间)以及安全性。结果观察组患者的总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组患者术后首次排气、排便时间以及肠胀气消失时间均短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者术后并发症总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论耳穴压豆联合枯草杆菌二联活菌颗粒在心脏瓣膜置换术后腹胀患者中应用价值良好,可有效缩短患者术后排气时间、排便时间以及肠胀气消失时间,安全性尚可。

基于MTT比色和响应面法优化侧孢短芽孢杆菌最大活菌数培养条件

目的:探索获得侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)最大活菌数的最佳培养基成分及培养条件。方法:在建立MTT比色法与平板计数法的相关回归方程基础上,对获得最大活菌数的侧孢短芽孢杆菌最适培养基成分(碳源、氮源、无机盐)和培养条件(初始pH、温度、接种量、磷酸二氢钾)进行优化。结果:MTT比色法与平板计数法对活菌数测定结果表现出显著的线性关联(R^(2)>0.999);麦芽糖、氯化钙、初始pH、磷酸二氢钾为显著影响因子,最佳发酵条件为麦芽糖8.75 g/L,氯化钙0.17 g/L,初始pH 7.07、磷酸二氢钾3.73 g/L,此条件下活菌数为8.12×10^(8)CFU/mL,与理论活菌数(8.25×10^(8)CFU/mL)无显著差异。结论:基于MTT比色和响应面法优化侧孢短芽孢杆菌最大活菌数培养条件,优化后的活菌数较优化前提高了3.02倍。

枯草芽孢杆菌无细胞上清液抑制单增李斯特菌生物被膜形成的研究

单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)是一种常见的食源性致病菌,其生物被膜是导致食品污染和疾病传播的重要原因。该研究选用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)无细胞上清液(cell free supernatant,CFS)作为抑制剂,探究B.subtilis CFS在抑制L.monocytogenes野生菌株118(以下简称No.118)生物被膜方面的作用和潜力。首先测定了B.subtilis CFS的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),接着采用结晶紫染色法测定了不同亚最小抑菌浓度下B.subtilis CFS对No.118的生物被膜抑制率,发现不同亚抑菌浓度下的CFS对No.118生物被膜均具有显著的抑制作用,且在1/64 MIC时生物被膜抑制率仍可达到47%;同时B.subtilis CFS对No.118生物被膜代谢活性、自聚集率、表面疏水性、群集泳动能力和膜外聚合物分泌也均有显著抑制作用;最后,通过激光共聚焦显微镜观察了在CFS作用下,No.118生物被膜结构和细胞分布的变化规律,经CFS处理后,No.118生物被膜结构松散,细菌数量明显减少。综上,B.subtilis CFS可通过影响No.118生物被膜细胞的代谢活性、自聚集能力和群集泳动能力以及膜外聚合物的分泌来抑制其生物被膜形成,对探究益生菌代谢产物作为生物被膜抑制剂方面的应用具有重要的参考价值。

枯草芽孢杆菌的生理功能及其在畜禽生产中的应用

枯草芽孢杆菌是一类可形成芽孢的具有多种生理功能且对动物机体无毒副作用的理想益生菌。在饲料中添加枯草芽孢杆菌具有调节畜禽肠道功能、平衡微生物区系,提高免疫力和促生长等作用。枯草芽孢杆菌还可以作为饲料发酵菌种,经发酵后的饲料会降低抗营养因子的含量,提高营养物质的含量,从而促进畜禽对饲料养分的消化和吸收。枯草芽孢杆菌内生芽孢的特性,可以保证其在饲料生产和畜禽内环境条件下的功能稳定性以及作为疫苗表达载体的独特优势。因此,枯草芽孢杆菌在畜禽生产中具有十分广阔的应用前景。作者综述了枯草芽孢杆菌的生物学特性、生理功能及其在畜禽生产中的应用,以期为枯草芽孢杆菌在畜禽生产中的应用提供一定的参考。

枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊治疗肠易激综合征效果和安全性的Meta分析

目的采用Meta分析方法评价枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊治疗肠易激综合征(IBS)的效果及安全性。方法系统检索了PubMed、Embase、中国生物医学文献、中国知网、万方、维普、Cochrane Library等数据库,检索时间截止至2023年6月。观察组采用枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊单用或联合其他药物治疗,对照组采用其他药物单药或联合治疗。利用RevMan 5.4.1软件进行Meta分析。结果Meta分析结果显示,观察组总有效率优于对照组(相对危险度=1.20,P<0.001),腹痛、腹泻症状发生率均低于对照组(均P<0.05),而2组不良反应发生率差异无统计学意义(比值比=0.80,P=0.28)。亚组分析结果显示,观察组腹泻型IBS和便秘型IBS患者的治疗总有效率均高于对照组(均P<0.05)。结论基于目前的文献证据,枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊治疗IBS有效性及安全性均较好。

枯草芽孢杆菌源抗菌肽发酵条件优化及其对雏鸡的抗炎作用

研究旨在优化枯草芽孢杆菌源抗菌肽发酵条件并探究其对雏鸡的抗炎作用。试验采用单因素方法筛选出适合枯草芽孢杆菌K4发酵的最佳氮源、碳源及初始pH值、温度、接种量。用筛选出的最佳发酵培养基和条件在50 L发酵罐内发酵1株能产抗菌肽的枯草芽孢杆菌K4,并将最终发酵液添加20%水溶性淀粉进行喷雾干燥。喷干后的菌粉使用大肠杆菌O2作为指示菌进行体外抑菌试验和雏鸡抗炎试验。结果显示,试验筛选出的最佳氮源为蛋白胨,最佳碳源为葡萄糖,培养基初始pH值为7.0,发酵温度为37℃,接种量为5%。喷干后的菌粉活菌数为4.60×10^(10)CFU/g。体外抑菌试验结果显示喷干菌粉对O2的抑菌圈为30 mm。雏鸡抗炎试验结果显示,大肠杆菌感染后的雏鸡灌服抗菌肽K4后的存活率为65%,比药物对照组高18.18%,说明枯草芽孢杆菌K4具有抑制大肠杆菌、降低雏鸡感染大肠杆菌后的死亡率的作用。

枯草芽孢杆菌复合微生物制剂对鸡坏死性肠炎的预防效果

为了研发有效预防鸡坏死性肠炎(necrotic enteritis,NE)的微生态制剂,选用1日龄817雏鸡120只,随机分为4个处理组,其中,空白对照(Control)组和坏死性肠炎(NE)组(用G型产气荚膜梭菌感染肉仔鸡建立NE模型)饲喂基础日粮、预防1(Prob1)组在基础日粮中添加0.2%的微生物制剂1、预防2(Prob2)组在基础日粮中添加0.2%的微生物制剂2;试验第14~16天Prob1组、Prob2组和NE组肉鸡连续灌胃产气荚膜梭菌(Clos-tridium perfringens,CP),探究在饲料中添加不同的枯草芽孢杆菌复合微生物制剂对该病的预防作用。结果显示:NE组肉鸡体质量低于Control组,试验第17、23天Prob1组、Prob2组体质量显著高于NE组(P<0.05)。NE组肉鸡空肠上皮细胞坏死脱落、绒毛变短、隐窝加深、绒隐比降低,使用枯草芽孢杆菌复合微生物制剂后肉鸡空肠绒毛结构较完整、绒毛长度和绒隐比显著高于NE组。NE组肉鸡空肠黏膜T-SOD、T-AOC、AKP活性低于Control组;试验第17天Prob1组、Prob2组肉鸡空肠黏膜T-AOC、AKP活性显著高于NE组,Prob1组肉鸡空肠黏膜T-SOD活性显著高于NE组;试验第23天,Prob1组、Prob2组肉鸡空肠黏膜T-SOD、T-AOC、AKP活性高于NE组,无显著差异;NE组肉鸡空肠黏膜MDA含量高于Control组,试验第17、23天Prob1组、Prob2组肉鸡空肠黏膜MDA含量低于NE组。NE组肉鸡的肠道紧密连接蛋白CLDN1、ZO-2基因表达量低于Control组,在试验第17天有显著差异;试验第17、23天,Prob1组、Prob2组肉鸡肠道紧密连接蛋白CLDN1、ZO-2基因表达量高于NE组,试验第23天Prob1组、Prob2组ZO-1基因表达量显著高于NE组。研究表明,日粮中添加枯草芽孢杆菌复合微生物制剂可以改善坏死性肠炎鸡的生长发育、提高肉鸡抗氧化能力以及肠道紧密连接蛋白基因表达量,且枯草芽孢杆菌复合微生物制剂1对鸡坏死性肠炎有较好的预防作用。

枯草芽孢杆菌LJ的分离鉴定及其对凡纳滨对虾幼体弧菌病防治效果

【目的】从对虾肠道分离鉴定拮抗病原弧菌的益生菌,对其生物安全性及对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)幼体弧菌病的控制效果进行评价,以促进益生菌对对虾弧菌病的防治效果。【方法】利用平板划线法从虾肠分离细菌,根据拮抗病原弧菌活性筛选潜在益生菌株,结合表型特征、16S rRNA和rpoB基因序列对目标菌株进行鉴定,利用纸片扩散法测试其对17种抗菌药物敏感性。通过水体添加目标菌评价其对凡纳滨对虾幼体感染副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)的生物防治效果。【结果】从对虾肠道分离筛选得到一株对副溶血弧菌、哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)和坎氏弧菌(Vibrio campbellii)均有明显拮抗作用的菌株LJ;LJ不溶血且无多重耐药性,被鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。水体添加1×10^(5)和1×10^(6)cfu/mL LJ均可显著提高感染副溶血弧菌的对虾幼体存活率和变态率(P<0.05),且高剂量处理组效果更明显;未添加病原菌条件下,高浓度(5×10^(7)cfu/mL)LJ对幼体无害,并能显著促进幼体存活和变态。【结论】对虾肠源枯草芽孢杆菌LJ生物安全性高,可有效拮抗病原弧菌和提高感染副溶血弧菌凡纳滨对虾幼体的存活率。

枯草芽孢杆菌抗菌脂肽的重组表达及应用研究进展

为了解决对人类健康和粮食安全构成重大风险的抗生素耐药性威胁,开发新型抗菌药物势在必行。枯草芽孢杆菌所产的抗菌脂肽不易使细菌产生广泛的耐药性且无任何副作用,被认为是最具潜力的抗菌剂之一。但是,枯草芽孢杆菌抗菌脂肽生产成本高和生产效率低的问题严重限制了其在食品、医药、环境等工农业领域的应用,因此提高抗菌脂肽产量显得尤为重要。近几十年来,随着生物技术的快速发展,利用基因工程和优化发酵策略来生产高产量的抗菌脂肽可以克服上述问题。本文从枯草芽孢杆菌所产脂肽的结构和功能特性出发,主要从高产抗菌脂肽技术、构效关系以及应用进行综述,特别是基因工程方法提高脂肽产量的研究进展,为枯草芽孢杆菌高产抗菌脂肽的进一步研究提供参考。

豆酱源枯草芽孢杆菌S1-2产细菌素分离鉴定及其稳定性研究

本研究首先从东北传统豆酱中分离筛选出一株具有良好抑菌作用的菌株,结合16S rDNA与持家基因gyrA测序分析等方法对菌株鉴定。其次,利用乙酸乙酯萃取法对其所产细菌素进行粗提,使用葡聚糖凝胶Sephadex-G50和高效液相色谱(HPLC)技术进一步纯化,结合SDS-PAGE和液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)技术进行鉴定。最后通过最小浓度实验与生长抑制曲线分析了细菌素对金黄色葡萄球菌的抑制效果,并探究了细菌素对热、酸碱和蛋白酶的稳定性。结果表明,枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)菌株S1-2对金黄色葡萄球菌和单增李斯特氏菌抑菌效果最好,该菌株产生的细菌素经分离纯化鉴定为subtilosin A,分子量约为3 kDa,对金黄色葡萄球菌和单增李斯特氏菌有明显的抑制效果,对金黄色葡萄球菌的最小抑制浓度为0.625 mg/mL。该细菌素在20~80℃抑菌活性稳定,且在100~120℃仍表现出抑菌活性;对酸碱耐受性较高,经过pH为1、10的强酸强碱处理后仍表现出抑菌活性,在pH6.0~8.0的范围内表现出最高的抑菌活性;能够被蛋白酶K、胃蛋白酶、胰蛋白酶水解。综上,枯草芽孢杆菌S1-2与其产生的细菌素subtilosin A在食品生物防腐中具有较强的研究和应用潜力。

基于表达元件优化提高脱氧雪腐镰刀菌烯醇解毒酶DepB在枯草芽孢杆菌中的表达水平

本研究实现了脱氧雪腐镰刀菌烯醇解毒酶DepB在枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)RIK 1285中的异源表达,但DepB较低的发酵水平限制了其在食品加工和饲料中的应用,可采用转录和翻译相结合的策略提高DepB在枯草芽孢杆菌中的表达水平。首先,选择9个单启动子替换原始启动子P43,其中单启动子P_(spoVG)介导的重组菌经发酵后酶活力最高,酶活力为29.59 U/mL。其次,选择4个具有较高DepB表达水平的启动子(P43、PsacB、P_(spoVG)和P_(aprE))构建16个双启动子系统,其中,DepB在双启动子P_(aprE^(-))P_(spoVG)的介导下活力达到最高,为48.87 U/mL。此外,通过对启动子P_(aprE^(-))P_(spoVG)的核心区域(-35和-10区)进行优化,Mutant-5酶活力高达69.17 U/mL,是原始菌株(14.45 U/mL)的4.79倍。在此基础上,通过优化启动子P_(spoVG)的核糖体结合位点序列,进一步提高了DepB的表达水平,RBS15酶活力为115.15 U/mL,是原始菌株的7.97倍。研究结果表明,转录和翻译相结合策略是提高重组蛋白发酵水平的有效手段。

枯草芽孢杆菌OLR3-9对拟石莲属多肉植物黑腐病的生防效果

由尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)引起的黑腐病是拟石莲属(Echeveria)多肉植物生产和家庭种植中的重要病害.为控制该病害,研究从长雄野生稻(Oryza longistaminata)根部分离并鉴定出一株内生枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)OLR3-9菌株.通过体外抑菌活性、温室防效和定殖情况的测定,结果表明,OLR3-9菌株对2种拟石莲属多肉植物品种‘血色罗密欧’(E.agavoides)和‘静夜’(E.derenbergii)的黑腐病具有较好的生物防治效果.该菌株对‘血色罗密欧’和‘静夜’黑腐病的病菌菌丝抑制率分别为63.45%和66.60%,菌体抑制率分别达到78.74%和76.45%,在盆栽条件下的防治效果分别为65.55%和73.13%.与该生防菌拮抗互作后,2种拟石莲属多肉植物黑腐病菌菌丝畸形,产孢量减少,并能在2种拟石莲属多肉植物的根、茎和叶部组织稳定定殖,阻止黑腐病病菌的侵入与蔓延.因此,枯草芽孢杆菌OLR3-9菌株对拟石莲属多肉植物黑腐病具有良好防效,是一株具有良好开发潜力的生防菌.

枯草芽孢杆菌PB6制剂对产蛋后期蛋鸡生产性能、蛋品质、抗氧化能力和肠道菌群的影响

试验旨在探讨饲粮中添加枯草芽孢杆菌PB6制剂对产蛋后期蛋鸡生产性能、蛋品质、抗氧化能力和肠道菌群的影响。试验采用单因子试验设计,选用60周龄同批海兰褐蛋鸡576只,随机分为4个日粮处理,每个处理6个重复,每个重复24只鸡。BSP 0、BSP 100、BSP 150、BSP 200各组分别在基础日粮中添加0、100、150、200 mg/kg枯草芽孢杆菌PB6制剂。结果表明:与BSP 0组相比,BSP 100组、BSP 150组、BSP200组均提高了蛋鸡产蛋率、料蛋比、蛋壳强度和哈氏单位(P≤0.05);提高了血清和十二指肠谷胱甘肽过氧化酶水平,降低了丙二醛含量(P≤0.05);与BSP 0组相比,枯草芽孢杆菌PB6制剂通过降低梭状芽孢杆菌和大肠菌群的数量(P≤0.05)、增加双歧杆菌和乳酸菌数量(P≤0.05)来调节回肠和盲肠菌群组成。由此可见,饲粮中添加枯草芽孢杆菌PB6可提高蛋鸡生产后期的产蛋率和蛋壳品质,BSP 150组(150 mg/kg枯草芽孢杆菌PB6)效果最好。

声热耦合杀菌对乳中耐热枯草芽孢杆菌抑制作用研究进展

声热耦合技术作为一种温和有效的新兴杀菌技术,已成功用于多种食品中微生物安全的控制,尤其在乳制品加工领域具有广阔的应用前景。超声波有独特的动力杀菌策略,在缓解乳制品供应链压力、减少乳制品腐败带来的经济损失方面起到不容忽视的积极作用。本文从超声波的空化作用、破坏细胞壁和细胞膜、产生自由基和抗菌类物质及损伤细胞代谢相关酶等方面综述近10年国内外关于声热耦合杀菌技术抑制枯草芽孢杆菌的机制和研究进展,提出一种控制乳制品中污染菌体数量的新型杀菌方法,旨在为今后更好地研究和应用该技术控制乳制品贮藏加工过程中耐热芽孢杆菌污染、降低耐热芽孢杆菌残留引起的乳制品劣变风险、更好地保障产品货架期内品质安全提供参考。