与水稻互作的枯草芽孢杆菌OKB105菌株胞内全蛋白双向电泳条件的优化

用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)OKB105菌株菌悬液处理水稻种子及幼苗,发现OKB105菌株能够显著促进水稻生长。为了研究枯草芽孢杆菌的促生机制,建立了水稻与OKB105菌株的互作体系,并对互作后的OKB105菌株胞内全蛋白的双向电泳条件进行了优化。结果表明:分离胶浓度为10%,等电聚焦(IEF)程序中最高电压8 000 V,聚焦60 000 Vh且增加低电压慢速除盐步骤能够提高双向电泳图谱质量,为蛋白质组学水平上研究水稻与枯草芽孢杆菌的互作奠定了良好的基础。

枯草芽孢杆菌发酵工艺研究进展

综述了枯草芽孢杆菌发酵过程中涉及的多种发酵工程策略,详细探讨了包括高产菌株的选育、培养基的优化、发酵条件的设定以及发酵过程的精细调控等方面的内容。探讨了通过传统育种技术和现代基因工程手段来提高菌株产量的方法。分析了不同营养成分和添加剂对菌株生长和产物生成的影响。介绍了温度、pH、溶氧量等因素对发酵过程的影响及其优化策略。此外,还探讨了发酵过程的动态监控和调控方法,以实现高效的生产过程。对枯草芽孢杆菌工程菌发酵领域的最新研究现状进行了全面介绍,总结了当前的研究成果和存在的问题,提出了未来研究的方向和可能的发展趋势。

枯草芽孢杆菌WR菌株对番茄灰霉病的生防潜力

为评估WR菌株对番茄灰霉病的生防潜力,测定了WR对番茄灰霉病菌的离体和活体活性。平板对峙培养和发酵液带毒培养试验表明,WR对番茄灰霉菌落生长的拮抗率达98.2%,WR发酵上清液的30倍稀释液对灰霉菌落生长的抑制率达94.5%。喷施带菌发酵液及其50倍稀释液,对采后番茄果实灰霉病发生的保护作用和治疗作用均达100%,果面光洁;而对照果实上灰霉菌生长旺盛,菌落平均直径1.10~1.13 cm,病害周围果实软化,碰触有臭味汁液流出。WR发酵上清液经11种不同性质的树脂吸附后的残液抑菌活性在2.2%~70.7%,表明发酵液抑菌活性成分丰富,D201和001×7均可作为活性成分富集树脂。经16S rDNA核苷酸序列鉴定,WR为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),具有防治番茄灰霉病的潜力。

内生拮抗枯草芽孢杆菌BS-2菌株的发酵条件

内生拮抗细菌BS 2菌株在以黄豆粉为原料的 3号培养基中生长速度快 ,发酵滤液对辣椒炭疽病菌的抑制作用强 ,菌液对辣椒果炭疽病的防效最好。培养基初始 pH值、培养时间、温度、通气量等对菌株生长及其抗菌物质的分泌有明显影响。结果表明 ,以黄豆粉培养基、初始 pH值 6 .7(灭菌后 )、2 8℃、培养 4 8h、并尽量增大培养通气量 ,为菌株的最佳发酵条件。

枯草芽孢杆菌G3菌株的抗菌物质及其特性

产几丁质酶枯草芽孢杆菌G3菌株的固体培养物在黄瓜灰霉病菌和番茄叶霉病菌抑菌试验中证实,抑菌活性物质存在于过滤上清液中,它们是从酸沉淀物中提取出的伊枯草菌素、生物表面活性素和存在于盐析粗蛋白中的几丁质酶。在叶霉孢子萌发试验中,伊枯草菌素微弱地抑制孢子萌发但强烈破坏芽管和新生菌丝;生物表面活性素和几丁质酶则强烈抑制孢子萌发并长久性地抑制芽管伸长。在PDA平板上的灰霉菌丝抑菌试验中,伊枯草菌素抑制菌丝生长,引发菌丝顶端膨大,形成泡囊,泡囊破裂后原生质外泄;几丁质酶抑制菌丝生长,引发产生不规则的菌丝团;生物表面活性素在平皿上对菌丝则不显示出抑菌活性。

枯草芽孢杆菌B47高产拮抗物质菌株的紫外诱变选育

[目的]为选育对西瓜枯萎病病菌具更强抑制作用的新菌株。[方法]对从番茄茎内分离获得的内生枯草芽孢杆菌B47菌株进行连续2次紫外线诱变，并对诱变菌株的遗传稳定性和生理生化特性进行测定。[结果]筛选获得3株押菌活性高于B47菌株的诱变菌株F303、F304、F305，经10代传代培养后，3株诱变菌株对西瓜枯萎病病菌的抑菌活性都有所下降，但F305的抑菌活性下降最小，遗传稳定性最好，在同等条件下其抑菌圈直径仍比野生菌株B47大5min。诱变菌株F305在36h内处于对教生长期，在36～96h内处于稳定期；最适宜生长温度为35℃；在浓度为1％-0％的钠盐中皆能生长，但以浓度为1％时生长最好，该菌株的生理生化反应与野生菌株B47的反应一致。[结论]该研究为利用1347菌株进行工厂化生产拮抗性物质产品和探讨防治西瓜枯萎病的新方法奠定了基础。

枯草芽孢杆菌XM16菌株制剂对苹果霉心病的防治及病原的抑制作用

从苹果树体上分离得到枯草芽孢杆菌 [Bacillussubtilis(Ehrenberg) Cohn]XM16颉颃菌株。室内测定其带菌培养液对 Alternaria alternata、Trichothecium roseum和 Fusarium sp.3种苹果霉心病主要病原的抑制作用均为 10 0 % ,而 XM16菌株 50倍的灭菌制剂 ,对上述 3种病菌的抑制效果分别为 92 .5%、86 .5%和 92 .2 %。其抑菌机理主要是使病菌孢子和菌丝畸变 ,细胞壁溶解 ,原生质泄漏。1997年和 1998年连续两年对苹果霉心病进行小区防治试验 ,北斗和红星品种霉心病的病果率分别为 6 .8%、6 .5%和 6 .0 %、5.4 % ,而对照的发病率分别为 4 8.0 %、4 5.5%和 50 .6 %、4 3.0 % ;XM16制剂处理的防治效果分别为 85.8%、85.7%和 88.1%、87.4 % ,明显高于化学药剂处理的 2 1.9%、30 .1%和 2 6 .9%、2 0 .9%的效果 ;两年的试验结果基本一致。

吡虫啉等11种农药对枯草芽孢杆菌B36菌株可湿性粉剂防治番茄灰霉病效果的影响

生物农药受环境影响较大已是学界的共识,这也是生物农药药效不稳定的主要原因。通过研究吡虫啉等11种番茄保护地常用农药对枯草芽孢杆菌B36菌株可湿性粉剂防治番茄灰霉病效果的影响,结果表明:1.8%阿维菌素乳油与B36可湿性粉剂混用可以明显提高B36可湿性粉剂防治番茄灰霉病的药效,其预防效果与治疗效果分别提高2.59百分点与5.84百分点。80%代森锰锌可湿性粉剂与B36可湿性粉剂混用降低了B36可湿性粉剂防治番茄灰霉病的药效,其预防效果与治疗效果分别降低1.77百分点与5.28百分点。其余9种农药对枯草芽孢杆菌B36菌株可湿性粉剂防治番茄灰霉病存在一定影响,但均不显著。

枯草芽孢杆菌B-903菌株抗真菌作用研究初报

作者从郑州市苹果园中分离到一株对植物病原真菌具强拮抗作用的细菌,编号B-903,经鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。现将该菌株抗菌物质及其抑菌作用的初步研究结果简报如下:

内生枯草芽孢杆菌B-001菌株抗菌肽纯化与性质

An antagonistic peptide,H16,produced by endophytic Bacillus subtilis B-001 was purified via ammonium sulphate precipitation,DEAE-Sepharose FF chromatography,FPLC Phenyl FF chromatography and HPLC C18 chromatography.The peptide showed strong antagonistic activity to Ralstonia solanacearum.LC-ESI-MS analysis showed molecular weight of the peptide was 7 367.4 Da,which was the same with that by SDS-PAGE.It was thermostable and not sensitive to proteinases.

枯草芽孢杆菌S44菌株ituD基因敲除突变株的构建

利用同源重组基因敲除方法构建了枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)S44 ituD基因同源突变株。菌落PCR、RT-PCR、SDS-PAGE结果均显示ituD基因缺失突变株构建成功。野生株与突变株的菌落形态、生长速率以及抑菌活性均有显著差异。抑菌活性试验结果显示,突变株抑菌活性显著减弱,成功构建的ituD基因突变株为进一步研究ituD基因的生物学功能奠定了基础。

枯草芽孢杆菌高耐菌株泡腾制剂对肉鸡生长性能、盲肠肠道菌群的影响

为研究枯草芽孢杆菌高耐菌株泡腾制剂对肉鸡生长性能、盲肠肠道菌群的影响,将3日龄AA肉鸡1 200只随机分为6组,每组200只,试验1~4组饮水中分别添加枯草芽孢杆菌高耐菌株泡腾粉、枯草芽孢杆菌高耐菌株泡腾颗粒、枯草芽孢杆菌高耐菌株泡腾片、枯草芽孢杆菌普通菌株粉剂各1 kg·t^(-1),试验5组在全价基础日粮中额外添加15%杆菌肽锌预混剂266 g·t^(-1)。结果表明,枯草芽孢杆菌高耐菌株泡腾制剂可以提高AA肉鸡平均日增重、提高平均日采食量、降低料肉比、降低死淘率、降低腹泻率,优于枯草芽孢杆菌普通菌株粉剂,优于或与杆菌肽锌预混剂相当。极显著增加21日龄、42日龄AA肉鸡盲肠中芽孢杆菌数量(P<0.01)、双歧杆菌数量(P<0.05或P<0.01)、乳酸菌数量(P<0.05),显著降低大肠杆菌数量(P<0.05)、沙门氏菌数量(P<0.05),优于枯草芽孢杆菌普通菌株粉剂,优于或与杆菌肽锌预混剂相当。

骆驼刺源产乳酸的枯草芽孢杆菌分离鉴定和菌株特性研究

为了解疏叶骆驼刺青贮中乳酸菌的组成,用MRS培养基对骆驼刺青贮中的细菌进行分离和纯化,通过革兰氏染色、细胞形态学观察、生理生化试验和16SrDNA序列分析对分离的单菌落进行菌株特性研究和种属鉴定。结果表明：L14菌株呈杆状,G^＋,有芽孢;产乳酸,液化明胶,水解淀粉,触酶阳性,温度生长范围15-55℃,酸生长范围pH值为4-7,NaCl生长范围为2%-10%,可利用多种碳源和氮源;16SrDNA测序结果显示该菌株与ATCC6051的相似性为98.7%,说明该菌为枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）。

枯草芽孢杆菌突变株BS-9发酵D-核糖条件研究

以枯草芽孢杆菌为出发菌株，经紫外线诱变处理，选育出莽草酸营养缺陷型突变株ＢＳ－９，其发酵产物经物理、化学鉴定为Ｄ－核糖．通过利用碳源、氮源实验，发现该突变株在以葡萄糖为碳源、玉米浆和硫酸铵为氮源的发酵培养基中生长良好，在温度为３６℃，ｐＨ值为６．８，转速为２３０ｒ·ｍｉｎ－１中摇床培养７２ｈ，Ｄ－核糖质量浓度可高达６７．６ｇ·Ｌ－１。

2株枯草芽孢杆菌的分离鉴定及特性研究

【目的】寻求适合制作水产类微生态制剂的益生菌。【方法】从养鱼塘底泥和健康鲫鱼Carassius auratus肠道中分离芽孢杆菌,结合细菌形态学、生理生化特征和16S rRNA序列分析对其进行鉴定,对菌株安全性、高温耐受性、酸性耐受性、拮抗性及产酶情况等特性进行研究。【结果】分离到2株芽孢杆菌,分别命名为B1和B2,细菌形态学、生理生化特征和16S rRNA序列分析的结果显示,B1和B2均为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。特性研究结果证实B1、B2菌株都具有较好的安全性、高温耐受性和酸性耐受性,可对致病性大肠埃希菌Escherichia coli、金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、嗜水气单胞菌Aeromonas hydrophila以及温和气单胞菌A.sobria有良好的体外抑菌能力,均具有产脂肪酶、淀粉酶、蛋白酶和纤维素酶的能力。【结论】分离到2株性能优良的枯草芽孢杆菌,可将其作为水产微生态制剂的候选菌株。

枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)B1、B2菌株对当归、黄芪的防病促进生长效果

对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)B1、B2菌株在当归、黄芪上的防病促生效果进行了田间试验研究。结果表明:B1、B2对当归、黄芪根腐病具有较好的防治作用。B1对当归、黄芪根腐病的防治效果分别为39.13%、41.48%,B2为41.30%和48.16%,B2防治效果与化学农药无显著性差异;同时,B1、B2对当归、黄芪具有促生增产作用,B1增产率分别为7.74%、12.5%;B2分别为17.2%、16.25%。且B1、B2均可提高当归和黄芪的品质。

枯草芽孢杆菌转酮醇酶变异株C1-B941菌种特性的初步研究

C1-B941是一株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的转酮醇酶(Transketolase,TKT)变异株,与亲株C1相比,其在菌体形态及代谢特性上发生了显著变化,如对戊糖不利用,对葡萄糖等利用变弱,碳源利用存在抑制,表现为芳香氨基酸合成途径缺陷,对数期细胞聚集成链,孢子形成能力下降,在发酵培养基中可以积累D-核糖,发酵液具有广泛的用途。

无痕敲除法构建食品安全级枯草芽孢杆菌无芽孢菌株

利用同源重组法快速构建枯草芽孢杆菌(Bacilus subtilis168)spo0A基因缺陷型无芽孢菌株B.subtilis168Δspo0A。经PCR及核酸电泳验证,孢子形成率鉴定和芽孢染色镜检,确定最终获得不产芽孢的B.subtilis168Δspo0A基因缺失突变菌株。基因敲除完成后,菌株基因组不需引入抗性基因或其它任何筛选标记,实现了对spo0A基因的无痕基因敲除。本研究对枯草杆菌的工业化生产及提高相关产品食品质量安全性具有重要意义。

一株枯草芽孢杆菌的分离鉴定及其发酵条件优化

通过水浴处理,反复平板划线,从土壤中分离纯化出一株疑似枯草芽孢杆菌的菌株,命名为WZB。对该菌株进行形态学观察、生理生化实验和16S rDNA序列分析,最终鉴定该菌株为枯草芽孢杆菌。并对该菌株的发酵条件进行了初步优化,优化得到的发酵条件为:接种量3%、发酵温度34℃、初始pH值7.0、培养时间36 h,进一步为枯草芽孢杆菌菌剂开发应用奠定了基础。