枯草芽孢杆菌Tpb55抗菌蛋白纯化特性分析

枯草芽孢杆菌Tpb55分离自烟草叶围,对烟草赤星病菌具有较强的拮抗能力。除去菌体培养液以90%饱和度硫酸铵沉淀所得的拮抗粗提液对热稳定,在pH为5.0～10.0范围内较稳定,对木瓜蛋白酶,蛋白酶K,胃蛋白酶不敏感。粗提液经DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析和Sephadex G-75(1.6 cm×80 cm)凝胶层析,纯化出一种抗菌蛋白,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳对蛋白分子量测定,该抑菌蛋白分子量约为47.8 kD,自动Edman降解法从Bst1N端测得的氨基酸序列为:Met-Glu-Ile-Phe-Lys-Tyr-Met-Glu-Thr-Tyr-Asp-Tyr-Glu-Gln-Leu-Val-Phe-Cys-。

烟草赤星病拮抗细菌Tpb55摇瓶发酵条件的筛选

通过单因素和正交实验相结合的方法,研究了枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)Tpb55液体发酵培养液和发酵条件,筛选出最佳培养液配方为:葡萄糖1%(10 g)、蛋白胨0.3%(3 g)、MgSO4 0.05%(0.5 g)、酵母膏0.15%(1.5 g)与牛肉膏0.15%(1.5 g)的混合物,最适发酵条件为:温度31℃,初始pH7.0,发酵时间72 h。

真菌病害拮抗菌的筛选及其对多种植物病原真菌的拮抗活性测定

针对广西境内常见多发的12种植物真菌病害,对柑橘、香蕉、甘蔗、辣椒、药用植物等作物根际土壤进行拮抗菌筛选试验。结果从不同作物根际土壤中共分离得到386株菌株,其中有拮抗作用的34株,平皿拮抗效果较好的16株;再经复筛,得到一株对柑橘炭疽菌有较好抑制效果的拮抗菌Bs55;对峙培养试验表明,Bs55菌株对12种常见病原真菌具有较强的抗菌活性,抑菌率最高达87.7%。拮抗菌Bs55具有拮抗作用强、能大量繁殖、抑菌谱广等特点,是具有较好利用前景的生物防治材料。