绿衣枳壳中枳属苷的提取工艺研究

目的优选绿衣枳壳中枳属苷的最佳提取工艺。方法高效液相色谱法测定绿衣枳壳中枳属苷的含量,以枳属苷的含量为指标,应用单因素试验结合正交试验法优化绿衣枳壳中枳属苷的提取工艺。结果绿衣枳壳中枳属苷的最佳提取工艺为加入6倍量90%乙醇,提取3次,每次1 h。结论该提取工艺方法简单、稳定可行,可以为绿衣枳壳中枳属苷的大规模化生产工艺提供理论依据。

多溶剂萃取法分离制备绿衣枳壳中枳属苷

目的建立一种从绿衣枳壳中快速分离制备高纯度枳属苷的方法。方法采用多溶剂萃取法将枳属苷从绿衣枳壳乙酸乙酯萃取部分粗提物中分离出来,并通过多次试验优化了多溶剂萃取法条件,枳属苷最佳分离实验条件为:萃取溶剂V(甲醇):V(氯仿)=6:5,分相液为水,V(萃取溶剂):V(分相液)=11:4。结果该法所得的枳属苷单体,经HPLC峰面积归一化法计算其纯度均不低于98%。结论多溶剂萃取法是一种简单。高效的分离制备绿衣枳壳中枳属苷的方法。

枳壳HPLC特征图谱及6个黄酮苷类成分含量测定

目的:采用高效液相色谱法建立枳壳的特征图谱,并同时测定6个黄酮苷类成分的含量。方法:以新北美圣草苷、芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷和枳属苷为指标性成分,采用Kinetex?2.6μC18 100(100 mm×4.6 mm,2.6μm)色谱柱,以乙腈为流动相B,0.1%甲酸为流动相A,梯度洗脱(0~10 min,15%B→15%B;10~15 min,15%B→20%B;15~20 min,20%B→25%B;20~30 min,25%B→40%B),流速1.0 mL·min-1,检测波长为283 nm,柱温30℃。结果:建立枳壳特征图谱,30 min内枳壳的主要色谱峰能够达到完全分离,同时标定6个黄酮苷类成分,对12批饮片中的6个成分进行含量测定。新北美圣草苷、芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷和枳属苷的质量浓度分别在1.77~70.8μg·mL-1(r=0.999 8,n=5)、11.3~452.0μg·mL-1(r=1.000 0,n=5)、34.0~1 360μg·mL-1(r=0.999 9,n=5)、13.6~544μg·mL-1(r=1.000,n=5)、27.6~1 104μg·mL-1(r=0.999 6,n=5)、 14.9~596μg·mL-1(r=1.000,n=5)范围内线性关系良好,方法的平均回收率(n=6)分别为96.9%(RSD=1.8%)、104.6%(RSD=1.7%)、97.4%(RSD=1.11%)、107.4%(RSD=1.1%)、93.2%(RSD=1.1%)、107.8%(RSD=1.5%);12批枳壳中上述6个成分含量分别为0.11%~0.45%、0.17%~0.59%、4.85%~9.09%、0.37%~0.74%、3.24%~6.17%、0.05%~0.56%。结论:该方法操作简单,重复性好,并能同时测定6个黄酮苷类成分含量,可为枳壳的质量标准研究提供更加全面的依据。

HPLC一测多评法同步测定玳玳果黄酮降脂提取物4个效应组分含量

目的建立HPLC一测多评法(QAMS)同步测定玳玳果黄酮降脂提取物4个效应组分柚皮苷、新橙皮苷、橙皮内酯水合物、枳属苷含量。方法采用高效液相色谱法,选择主成分柚皮苷为内参物,建立HPLC一测多评法,并与HPLC外标法同时测定的4个组分含量结果比较。色谱柱Lichrocart C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈(A)-0.2%冰醋酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱;流速1.0 m L/min,检测波长284 nm;柱温30℃;进样量10μL。结果玳玳果黄酮降脂提取物柚皮苷、新橙皮苷、橙皮内酯水合物、枳属苷的质量浓度分别在31.377~159.188μg/mL(r=0.999 5)、63.632~208.123μg/m L(r=0.999 8)、3.899~12.241μg/m L(r=0.999 6)、2.696~17.366μg/mL(r=0.999 4)范围内呈良好的线性关系;平均回收率(n=6)分别为97.99%、101.50%、98.21%、95.56%,RSD分别为2.07%、2.80%、2.92%、2.32%。结论以柚皮苷为内参物,HPLC一测多评法同步测定玳玳果黄酮降脂提取物4个效应组分含量结果准确,可用于玳玳果黄酮降脂提取物多指标质量监控。

HPLC法测定酸橙枳壳和枸橘枳壳中黄酮苷的含量

目的:建立酸橙枳壳和枸橘枳壳中异柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷和枳属苷同时测定的HPLC方法。方法:采用Dikma C_(18)(2)柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)-0.1%磷酸水(B)为流动相,梯度洗脱(0~10 min,20%A;10~11 min,20%A→30%A;11~25 min,30%A),流速1.0 m L·min^(-1),检测波长283 nm,柱温25℃。结果:异柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷和枳属苷进样量分别在0.864 0~6.912μg(r=0.999 5)、418.0~3 344μg(r=0.999 1)、18.21~145.6μg(r=0.999 6)、422.1~3 376μg(r=0.999 7)、204.2~1 633μg(r=0.999 1)的范围内呈良好的线性关系;平均回收率(n=6)分别为102.5%、99.60%、101.4%、100.1%和99.61%,其RSD分别为1.5%、2.1%、1.9%、0.34%和0.23%。17批酸橙枳壳中异柚皮苷含量均为0.01%,柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷和枳属苷的含量范围分别为5.73%~12.2%、0.10%~0.61%、2.18%~7.27%和1.03%~1.90%。9批枸橘枳壳中异柚皮苷含量均为0.02%;柚皮苷和枳属苷含量范围分别为1.90%~7.34%和1.11%~4.14%;部分枸橘枳壳中橙皮苷含量低于定量限,最高为0.40%;新橙皮苷含量均低于定量限。酸橙枳壳中柚皮苷和新橙皮苷含量与枸橘枳壳相比均较高,异柚皮苷、橙皮苷和枳属苷含量与枸橘枳壳相比均较低。结论:本法可用于酸橙枳壳和枸橘枳壳中异柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷和枳属苷的含量测定。

HPLC法同时测定绿衣枳壳中3种黄酮类化合物的含量

目的：建立HPLC法同时测定绿衣枳壳中柚皮苷、橙皮苷及枳属苷的含量。方法：采用Hypersil ODS2（250 mm×4.6mm,5μm）色谱柱,以乙腈（A）-0.1%磷酸水溶液（B）为流动相,梯度洗脱（0~15 min,20%A;15~17 min,20%A→30%A;17~27 min,30%A）,流速1.0 m L·min-1,检测波长283 nm。结果：柚皮苷、橙皮苷及枳属苷进样量分别在0.080~2.667、0.033~1.088、0.090~3.013μg范围内呈良好线性关系（r=0.999 6~0.999 9）;各组分平均回收率（n=3）在99.63%~101.5%之间,RSD为0.040%~1.2%。10批样品测定结果为柚皮苷含量1.62%~2.02%,橙皮苷含量0.045%~0.063%,枳属苷含量1.66%~1.90%。结论：本法可用于同时测定绿衣枳壳中柚皮苷、橙皮苷及枳属苷的含量。

一测多评法同时测定玳玳果黄酮滴丸中4个活性成分的含量

目的：建立一测多评法同时测定玳玳果黄酮滴丸中活性成分柚皮苷、新橙皮苷、橙皮内酯水合物及枳属苷的含量。方法：采用高效液相色谱法,使用250-4 lichrocart C18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,流动相为乙腈（A）-0.2%醋酸水溶液（B）,线性梯度洗脱（0-10 min,22%A;10-20 min,22%A→35%A;20-25 min,35%A→48%A;25-30 min,48%A→22%A）,流速1.0 m L·min-1,检测波长284 nm,柱温25℃,进样量20μL。柚皮苷、新橙皮苷、橙皮内酯水合物及枳属苷的色谱峰分离度R〉1.5,理论塔板数按柚皮苷计〉3 000。建立测定代表性成分柚皮苷含量并以其为内参物,通过柚皮苷与新橙皮苷、橙皮内酯水合物和枳属苷的相对校正因子计算新橙皮苷、橙皮内酯水合物和枳属苷含量的一测多评法,实现多指标成分的同步测定;同时与外标法分别测定玳玳果黄酮滴丸上述4个成分含量的结果比较。结果：柚皮苷质量浓度在119.40-477.60μg·m L-1、新橙皮苷质量浓度在122.20-488.80μg·m L-1、橙皮内酯水合物质量浓度在7.62-22.86μg·m L-1、枳属苷质量浓度在3.00-21.00μg·m L-1范围内线性关系良好;柚皮苷、新橙皮苷、橙皮内酯水合物、枳属苷平均加样回收率（n=3）分别为98.67%（RSD=1.5%）、98.20%（RSD=0.50%）、101.9%（RSD=1.7%）、100.9%（RSD=0.35%）;柚皮苷与新橙皮苷、橙皮内酯水合物、枳属苷的相对校正因子分别为1.153、0.434、0.893,RSD（n=6）分别为2.7%、3.1%、1.2%;外标法与一测多评法含量测定结果无显著性差异。结论：以柚皮苷为内参物,利用相对校正因子一测多评法同时测定玳玳果黄酮滴丸活性成分柚皮苷、新橙皮苷、橙皮内酯水合物与枳属苷含量的结果准确,为以中药有效部位为原料制备的中药制剂实现多指标成分群质量控制评价提供了可借鉴的方法。