枸杞多肽对D-半乳糖诱导小鼠的抗衰老作用及其可能机制

目的研究枸杞多肽对D-半乳糖(D-gal)衰老模型小鼠的影响及其可能作用机制。方法ICR小鼠60只,随机分为正常对照组、衰老模型组、枸杞多肽200,400,800mg/(kg.d)剂量组和100mg/(kg.d)维生素E(VitE)组。除正常组外均采用D-gal10mg/kg颈背部皮下注射,每日1次,连续注射5周,同时枸杞多肽和VitE组按20ml/(kg.d)灌胃给药。观察各组小鼠的行为学及学习记忆改变,并于5周后检测小鼠血清、心脏、肝脏、脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量及端粒酶活性。结果与正常对照组相比,衰老模型组小鼠体重增加明显减少,小鼠跳台错误次数明显增多,小鼠血清、心脏、肝脏和脑SOD和端粒酶活性降低,MDA含量增加(P<0.01)。与模型组相比,枸杞多肽组和VitE组小鼠体重增加升高(P<0.01),小鼠跳台错误次数减少(P<0.05),小鼠血清、心脏、肝脏和脑组织SOD活性升高,MDA含量减少(P<0.05);枸杞多肽200mg/(kg.d)剂量组及VitE组小鼠血清端粒酶活性有升高的趋势,但差异不显著;400和800mg/(kg.d)剂量组小鼠血清和心脏端粒酶活性升高(P<0.01),VitE组小鼠心脏端粒酶活性也明显升高;而各治疗组小鼠肝脏和脑组织端粒酶活性无明显变化。结论枸杞多肽对D-gal诱导衰老模型小鼠有抗衰老作用,其机制可能与提高小鼠血清、心脏、肝脏和脑组织SOD活性,减少MDA含量,以及提高血清和心脏端粒酶活性有关。

枸杞多肽的制备及其抗氧化活性研究

研究了中性蛋白酶和木瓜蛋白酶复合水解制备枸杞活性肽的工艺条件,并采用离子交换层析和凝胶柱层析对酶解产物进行纯化,以制备具有较高抗氧化活力的枸杞多肽.以DPPH·清除率为指标,通过响应面优化得到最佳酶解工艺条件:酶解温度51℃,中性蛋白酶与木瓜蛋白酶质量比1∶2.65,酶解时间4.3 h,p H=7.0.此条件下得到的枸杞多肽对DPPH·清除率为(23.32±0.47)%.分别采用DEAE阴离子交换层析和Sephadex G-25凝胶柱层析对枸杞多肽进行分离,最终获得DPPH·和OH·清除率分别为(72.65±1.84)%和(58.72±1.88)%的A-1组分,该组分的DPPH·清除能力、ABTS+·清除能力和OH·清除能力均随浓度的增大而提高.

复合蛋白酶交联酶聚集体制备枸杞蛋白多肽

该研究利用交联酶聚体技术制备出复合蛋白酶交联酶聚体固定化酶,以酶活回收率为指标,通过单因素实验得到复合蛋白酶交联酶聚集体最佳制备条件:风味蛋白酶与木瓜蛋白酶比例为3∶1,沉淀剂硫酸铵浓度为60%,戊二醛浓度0.5%,交联时间为50分钟,交联pH为7.5。此时最大酶活回收率为80.32%。相比单一蛋白酶,复合蛋白酶交联酶聚集体具有更好的热稳定性和pH稳定性,同时表现出良好的连续多次水解枸杞蛋白的性能。以蛋白水解度为指标,优化后复合蛋白酶交联酶聚集体最佳水解条件为:温度为60℃,pH为6,酶浓度为10 mg/mL,水解时间为100 min,在此条件下枸杞蛋白水解度为41.21%,比游离复合蛋白酶提高了6.9%。

枸杞血管紧张素转换酶(ACE)化学合成多肽对自发性高血压大鼠的降压作用及机制研究

目的探讨枸杞血管紧张素转换酶(ACE)化学合成多肽对自发性高血压大鼠(SHR)的降压效果及机制,为防治高血压病提供实验依据。方法 SHR大鼠30只,分成组:模型对照、阳性对照(10mg/kg卡托普利)、枸杞ACE化学合成多肽低(5mg/kg)、中(10mg/kg)、高(20mg/kg)剂量组5组;另以Wistar-Kyoto(WKY)大鼠6只为正常对照组。正常对照组和模型对照组给予相应剂量的生理盐水。适应性喂养1 w后开始一次性给药及连续灌胃8w长期给药处理,实验期间大鼠自由进食饮水,每周定时在灌胃后2h测量血压,实验结束后腹腔静脉采血并摘取心脏和肾脏组织,酶联免疫吸附法测定血浆和肾脏组织中Ang-(1-7)、AngII、ACE、ACE2水平。结果干预后,与正常对照组相比,SHR大鼠收缩压(SBP)与舒张压(DBP)均显著升高(均P<0.05);与模型对照组相比较,第6、8w阳性对照组、低、中、高剂量组SHR大鼠DBP明显降低(均P<0.05);实验期间随着灌胃时间的延长SBP有降低趋势。与正常对照组相比,SHR大鼠血浆和肾脏组织中Ang-(1-7)浓度均显著降低(均P<0.05),ACE浓度均显著升高(均P<0.05);与模型对照组相比,枸杞ACE化学合成多肽可以显著降低ACE浓度(均P<0.05),增加ACE2浓度。结论枸杞ACE化学合成多肽对SHR大鼠有一定的降压作用,可能是通过ACE–AngII–AT1R和ACE2–Ang-(1-7)–Mas-R通路的平衡发挥降压作用。[营养学报,2019,41(1):74-80]