温度及暗培养对枸杞花药胚状体诱导的影响

以"宁杞1号"花药为试材,进行离体培养诱导胚状体发生并获得完整植株,分别研究了低温预处理、高温热处理及暗培养对花药胚状体诱导的影响。结果表明:低温预处理5d能显著提高胚状体诱导率,诱导率达1.43%;而33℃高温热处理和暗培养胚状体诱导率低于对照。

枸杞花药离体培养获得单倍体植株

利用枸杞花药离体培养获得单倍体植株,枸杞单倍体植株是新品种选育和基因组测序、制作遗传图谱、研究遗传规律的良好材料。以"宁杞1号"花药为试验材料,采用MS+5%蔗糖+0.7%琼脂+0.8%活性炭为基本培养基,添加不同浓度的6-BA和NAA,进行花药离体培养,获得花粉植株。利用流式细胞仪检测花培植株的倍性,再经根尖细胞染色体数目鉴定花粉植株的倍性。结果表明,在基本培养基中添加1.0 mg/L 6-BA和0.1 mg/L NAA时,花药离体培养花粉胚状体诱导率最高。花粉植株经过流式细胞仪倍性鉴定,其DNA在荧光通道值100处有一条很明显的尖峰,说明获得的花粉植株为单倍体。又经根尖细胞染色体数目鉴定,染色体数为12条,验证了来自花药中花粉发育成的花粉植株为单倍体植株。

不同基因型枸杞对花药胚状体诱导的影响

以5种枸杞花药为材料,探讨不同基因型枸杞对花药胚状体诱导的影响。结果表明:5种不同基因型枸杞花药培养均有胚状体发生,0902优系胚状体诱导率最高,达到2.20%,宁杞7号诱导率达到2.16%,0902优系和宁杞7号之间胚状体诱导率差异不显著,但0902优系和宁杞7号同宁杞1号、黄果枸杞、黑果枸杞之间花药胚状体诱导率差异极显著。

枸杞单倍体花粉败育的细胞学观察

为揭示枸杞单倍体不育特性,对可育的宁杞1号和花药培养获得的单倍体的花药进行细胞学观察。结果表明:在花粉母细胞时期,宁杞1号和单倍体的花药发育没有明显差异,减数分裂后两者都顺利形成四分体。宁杞1号的四分体可以释放出小孢子,同时绒毡层细胞能够为其提供营养并发育为成熟的花粉粒。而单倍体的花药在四分体时期虽然也能释放出小孢子,但绒毡层细胞提前降解使释放出来的小孢子不能发育为成熟的花粉粒,导致单倍体花粉败育。