正交试验优化磁场法提取枸杞黄酮工艺

以新鲜枸杞为原料,采用磁场法提取枸杞黄酮。在单因素试验基础上,通过正交试验优化磁场处理的条件。结果表明,在磁感应强度640mT、磁化时间40min、磁化温度65℃、浸提回流时间60min的条件下,枸杞黄酮的提取率可达到290.81mg/100g。

枸杞黄酮对H_2O_2损伤的血管内皮细胞NO及NOS作用的研究

目的研究枸杞黄酮对过氧化氢(H2O2)损伤的血管内皮细胞一氧化氮(NO)及一氧化氮合酶(NOS)作用。方法以人脐静脉内皮细胞(HUVEC)为研究对象,建立H2O2诱导HUVEC的氧化损伤模型。实验分为正常对照组、H2O2组、维生素C(VitC)组、枸杞黄酮低、中、高浓度组(枸杞黄酮100mg/L、200mg/L和400mg/L预处理)。用MTT法观察枸杞黄酮对H2O2损伤的血管内皮细胞活性的影响,观察枸杞黄酮类化合物对氧化应激损伤细胞过氧化物丙二醛(MDA)、人总一氧化氮合成酶(TNOS)、诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)、及NO的作用。结果 (1)MTT结果表明H2O2损伤后内皮细胞生长抑制率(IR)为38.8%;枸杞黄酮低、中、高浓度组IR分别为34.0%、30.7%、25.5%,与H2O2组比较差异有统计学意义(P<0.01);(2)与正常对照组相比较,H2O2组细胞NO活性降低,而TNOS、iNOS、MDA生成增加。与H2O2组相比较,枸杞黄酮低、中、高浓度组中NO、TNOS、iNOS、MDA的变化则相反,与枸杞黄酮呈剂量依赖性(P<0.01)。结论枸杞黄酮对H2O2所致人血管内皮细胞损伤有保护作用,且保护效果与枸杞黄酮呈一定相关性。

响应面法优化超声波提取枸杞黄酮的工艺研究

利用响应面法优化超声波提取枸杞黄酮的工艺条件。在单因素试验的基础上,选取液固比、超声温度、超声时间3个因素,应用中心组合试验建立数学模型,以枸杞黄酮得率为响应值,进行响应面分析(RSA)。结果表明:超声波提取枸杞黄酮的最佳工艺条件为:液固比31∶1(V/m)、超声温度71℃、超声时间42min,在此条件下枸杞黄酮得率的预测值为0.99%,实测值为1.07%,相对标准偏差为0.081%。证明响应面法可以很好的优化枸杞黄酮的提取工艺。

枸杞黄酮提取方法的优化以及不同生态因子与枸杞黄酮相关性研究

枸杞黄酮是中药材枸杞子主要的有效成分,也是其质量优劣的主要评价指标。本文分别考察了乙醇回流提取法、高速剪切辅助乙醇提取法、高速剪切辅助低共熔溶剂提取法、超声辅助低共熔溶剂提取法对枸杞黄酮提取量的影响,选出最佳的提取方法,通过单因素实验与正交试验获得最佳提取条件,采用SIMCA 14.1软件分析不同产区生态因子和枸杞黄酮含量的相关性。结果表明:高速剪切辅助低共熔溶剂提取枸杞黄酮的效率最优,最佳提取工艺为:转速14000 r/min,料液比1:20 g/mL,提取时间5 min,黄酮平均提取量为7.11 mg/g。不同产地枸杞黄酮含量从大到小依次为:宁夏银川>宁夏中卫>甘肃瓜州>宁夏固原>新疆精河>宁夏中宁>甘肃白银>甘肃武威>甘肃玉门>新疆阿尔泰>新疆伊宁>青海都兰>青海格尔木>韩国b>韩国a;由SIMCA 14.1软件分析得到:枸杞黄酮含量与温度和无霜期的正回归系数值最大,与海拔高度的负回归系数绝对值最大,影响枸杞黄酮含量最主要的生态因子是温度和无霜期。

枸杞黄酮对H_2O_2致血管内皮细胞损伤的保护作用

研究枸杞黄酮对过氧化氢(H2O2)损伤血管内皮细胞的保护作用。以体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)为实验对象,H2O2建立HUVEC的损伤模型。试验分正常对照组、过氧化氢损伤组、阳性对照组(Vit C)、干预组(枸杞黄酮100、200、400 mg/L预处理)。用MTT法观察枸杞黄酮对H2O2损伤的血管内皮细胞活性的影响,测定内皮细胞中脂质过氧化物丙二醛(MDA)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)的活性,分析其保护作用机制。MTT结果表明H2O2损伤后内皮细胞生长抑制率(IR)为38.8%;100、200、400 mg/L枸杞黄酮干预组IR分别为34.0%、30.7%、25.5%,IR显著降低,且与枸杞黄酮浓度呈相关(P<0.01);干预组中H2O2损伤内皮细胞的MDA生成减少,SOD活力增加,与枸杞黄酮浓度呈相关(P<0.01)。枸杞黄酮的干预对H2O2所致内皮细胞的损伤有保护作用,且随枸杞黄酮浓度的增加,保护作用更强。其机制可能与枸杞黄酮抑制H2O2所致内皮细胞的脂质过氧化以及增强其抗氧化作用有关。

枸杞黄酮提取工艺研究

[目的]研究枸杞黄酮的提取工艺。[方法]采用不同的提取溶剂对枸杞叶及果柄中的黄酮进行提取,通过正交试验研究溶剂浓度、料液比、提取时间、原料粒度对总黄酮含量和得率的影响,确定枸杞黄酮的提取工艺。测定枸杞叶、果柄原料粗黄酮含量,分析不同样品中黄酮含量差异。[结果]确定了枸杞黄酮最佳提取工艺条件为:乙醇浓度70%,料液比1∶8(M∶V,g/ml),提取时间3 h,提取3～8mm碎粒,在该工艺条件下获得黄酮含量为79.4%,得率为3.72%。枸杞叶中黄酮含量明显高于枸杞果柄,5月份采摘的枸杞叶黄酮含量高于10月份采摘的。[结论]该研究为枸杞黄酮的开发提供了理论依据。

枸杞黄酮类化合物清除氧自由基及对小鼠L_(1210)癌细胞能量代谢的抑制作用

采用ＥＳＲ自旋捕捉法和微量量热法能量研究了枸杞总黄酮（ＴＦＬ）对活性氧自由基的清除作用，及对Ｌ１２１０细胞热代谢的影响。结果表明：在Ｆｅｎｔｏｎ体系中，ＴＦＬ７．５～２００ｍｇ／Ｌ对ＯＨ·的清除率为２０％～７２％；在Ｘａｎ／ＸＯ体系中ＴＦＬ０～２１７ｍｇ／Ｌ，Ｏ－·２清除率为０～５１％；ＴＦＬ０．５６ｇ／Ｌ对多形核白细胞ＰＭＮ呼吸爆发的产热峰完全抑制，对Ｌ１２１０细胞的能量代谢有明显抑制作用，对正常大鼠ＰＭＮ能量代谢有促进作用。

枸杞黄酮的研究进展

对枸杞黄酮的药理作用和提取方法等方面的研究进展进行综述,为枸杞黄酮在医药、保健领域中的应用提供借鉴。

超声微波协同萃取枸杞黄酮的工艺研究

采用超声微波协同萃取技术对枸杞中的总黄酮进行快速提取。在单因素实验的基础上设计正交实验对提取工艺条件进行优化,得到最佳条件为:提取温度50℃,提取液为60%的乙醇,料液比为1∶20,提取时间20min,在此条件下枸杞中黄酮的提取率可达1.98%。同时还将超声微波协同萃取法与传统冷凝回流法、超声波辅助提取法和微波提取法进行对比。结果表明,超声微波协同萃取法不仅简单高效,同时快速节能,非常适合枸杞中黄酮类化合物的提取。

枸杞叶黄酮对HepG2细胞脂质代谢的影响及作用机制

目的:以正常培养和油酸诱导培养的HepG2细胞为模型,探讨枸杞叶黄酮(Lycium barbarum leaves flavonoids,LBLF)对HepG2细胞脂质积累的影响。方法:实验划分为空白组、模型组、阳性对照组以及LBLF低、中、高剂量组。通过油红O染色判断各组别的脂滴聚集情况,并测定各组别脂质水平、氧化应激指标,最后通过实时聚合酶链式反应和Western blot检测脂质生成相关关键基因mRNA水平和蛋白水平的表达情况。结果:LBLF可减少油酸诱导的HepG2细胞内甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇以及丙二醛和活性氧的水平,提升高密度脂蛋白胆固醇、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽、过氧化氢酶水平。同时,Western blot结果显示LBLF干预能上调磷酸化AMP活化蛋白激酶(phosphorylated adenosine 5’-monophosphate (AMP)-activated protein kinase,p-AMPK)/AMPK水平,下调甾醇调节元件结合蛋白-1c(sterol regulatory element-binding protein 1c,SREBP-1c)、过氧化物酶体增殖物活化受体γ(peroxisome?proliferator-activated?receptor?γ,PPARγ)、CCAAT增强子结合蛋白α(CCAAT enhancer binding proteinalpha,CEBPα)蛋白的表达;实时聚合酶链式反应结果表明,LBLF干预能下调ACC、FAS、SREBP-1c、SCD-1、PPARγ、CEBPα等基因的表达。结论:枸杞叶黄酮可通过调节脂质生成和氧化相关基因的表达水平,部分缓解由油酸诱导的HepG2细胞脂质代谢紊乱。

枸杞黄酮的提取及其促进伤口愈合潜力的探究

为探讨新疆枸杞作为制备伤口敷料负载物的潜能,利用单因素法提取枸杞中的活性物质,利用DPPH法、抑菌试验检测枸杞提取物的抗氧化活性、抑菌性能,并利用荧光染色试验及扫描电子显微镜(SEM)对枸杞提取物的抑菌机制进行初步分析。此外,利用CCK-8法检测枸杞提取物的细胞毒性。结果表明,枸杞提取物的最佳提取条件为:在70℃水浴中用80%乙醇以料液比1︰8 (g/mL)静置90 min,此时提取物中的黄酮含量最高,为15.52 mg/g。抗氧化活性检测结果表明,枸杞提取物能有效清除DPPH自由基,提取物浓度2.5 mg/mL时,清除效果接近同等浓度下的VC溶液。抑菌试验表明,枸杞提取物浓度分别为0.2和0.1 g/mL时,其对E. coli和S. aureus有良好的抑制作用,通过对细菌的荧光染色发现,枸杞提取物能够通过破坏细菌细胞膜抑菌。CCK-8试验结果表明,枸杞提取物对L929细胞没有毒性并能够促进其增殖。枸杞提取物具有良好的抑菌、抗氧化活性,且对细胞无毒,表现出良好的生物活性,在治疗皮肤伤口愈合等医用材料方面具有很大潜力。

枸杞黄酮对良性前列腺增生大鼠血清性激素的影响

为了研究枸杞黄酮对良性前列腺增生大鼠血清性激素的影响,试验将50只雄性SD大鼠随机分为5组,即空白对照组、睾酮+小剂量枸杞黄酮(60 mg/kg)组、睾酮+中剂量枸杞黄酮(120 mg/kg)组、睾酮+高剂量枸杞黄酮(240 mg/kg)组、模型对照组,研究不同浓度的枸杞黄酮对前列腺重量、脏器系数、前列腺体积、睾酮浓度、雌二醇浓度、性激素结合球蛋白指标的影响。结果表明:240 mg/kg枸杞黄酮能够降低前列腺增生SD大鼠的雌激素和雄激素水平,前列腺体积减小,脏器系数减小,与空白对照组相比能够抑制前列腺增生。说明枸杞黄酮对良性前列腺增生有明显的抑制作用。

宁夏枸杞总黄酮对高糖诱导损伤人脐静脉内皮细胞抗氧化作用的影响

目的探讨宁夏枸杞总黄酮对高糖诱导损伤的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)抗氧化作用的影响。方法利用体外培养HUVEC,采用高糖诱导HUVEC建立氧化应激损伤模型,实验分为正常对照组、高糖损伤模型组、枸杞黄酮保护组(100、200、400mg·L-1),以及阳性对照(维生素C 30mg·L-1)组。MTT法测定细胞存活率、测定各组细胞上清液中超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮合酶(NOS)活性,及丙二醛(MDA)的含量和一氧化氮(NO)释放量。结果与正常对照组比较高糖损伤模型组MDA含量增高,LDH活性上升,SOD活性明显下降,NO、NOS生成量及活性均下降(均P<0.01)。与高糖损伤模型组比较,枸杞黄酮保护组MDA含量下降,LDH活性下降,SOD活性增高(P均<0.01、P<0.05),NO、NOS的生成量及活性明显增高(P均<0.01),且上述各指标的变化程度随枸杞总黄酮浓度的增加而改变。结论宁夏枸杞总黄酮显著提高高糖诱导的人脐静脉内皮细胞损伤模型的抗氧化作用,这可能与宁夏枸杞总黄酮抗脂质氧化,提高抗氧化酶活性及NO的释放量有关。

枸杞黄酮的纯化

比较了溶剂萃取法、重结晶法、树脂法富集产品除去杂质的作用,认为树脂法效果最好。确定HPD-100作为纯化枸杞黄酮的最佳树脂,静态吸附量为36.43 mg/g,静态解析量为24.01 mg/g,最佳上样浓度为0.6 m L/mg,上样流速为0.5 m L/min,选择95%的乙醇作为解析溶剂,解析流速为0.5 m L/min,枸杞黄酮回收率可达85.64%,醇沉后,总黄酮含量可达43.31%。

枸杞鲜果冻干制品中枸杞黄酮的含量及抗氧化活性研究

目的测定枸杞冻干粉中枸杞黄酮的含量并比较枸杞鲜果冻干粉中枸杞黄酮清除DPPH的能力、总抗氧化能力与枸杞干果的差异。方法以芦丁为对照品,测定枸杞鲜果冻干粉中枸杞黄酮的含量;以清除DPPH自由基、总抗氧化能力为指标测定了冻干粉中枸杞黄酮的清除自由基能力。结果枸杞鲜果冻干粉中枸杞黄酮的含量为34.5mg/g,对DPPH的清除率IC50值为55.06μg/ml。当枸杞黄酮浓度为0.69mg/ml时总抗氧化能力24.91ml/单位。结论枸杞冻干工艺对枸杞中的活性成分枸杞黄酮具有很好的保护作用,黄酮含量明显优于烘干制品,且冻干制品中的黄酮对DPPH的清除作用及总抗氧化活性也明显优于烘干制品。

大孔吸附树脂分离纯化枸杞叶总黄酮的研究

研究应用大孔树脂纯化枸杞叶总黄酮的工艺,比较了AB-8、ADS-5、ADS-7、ADS-17、ADS-21、HP-20六种大孔树脂分离纯化枸杞叶总黄酮的优劣,结果表明,HP-20型大孔树脂对枸杞叶总黄酮的吸附性能与解吸效果最好。确定了其最佳工艺为:上柱液13 BV,上样流速2 mL/min,上样浓度2.336 mg/mL,以70%乙醇为洗脱液,洗脱流速2 mL/min,洗脱剂用量3.5 BV。在此条件纯化后,枸杞叶黄酮提取物中总黄酮含量由29.02%提高到83.75%。该工艺条件科学合理,可有效地用于枸杞叶黄酮的分离富集。高效液相色谱检测芦丁含量由9.88%提高到23.79%。

星点设计-效应面法优化果胶酶酶解提取枸杞总黄酮的工艺

目的:采用星点设计-效应面法优化果胶酶酶解提取枸杞总黄酮的工艺。方法:在单因素试验的基础上,以果胶酶用量、酶解时间和酶解温度为自变量,枸杞总黄酮得率为因变量,通过对自变量各水平的多元线性回归及二项式拟合,用效应面法选取最佳工艺,并进行预测分析。结果:果胶酶辅助提取枸杞总黄酮的工艺路线为:果胶酶用量0.22%、酶解时间1.2 h、酶解温度43℃,得到枸杞总黄酮平均得率为2.3829%。结论:星点设计-效应面法优化的枸杞总黄酮提取工艺,方法简单,精密度高。

响应面法优化复合酶提取枸杞子总黄酮的工艺研究

目的采用响应面法优化复合酶提取枸杞子总黄酮的工艺条件。方法在单因素试验基础上,选择酶用量、酶解时间、酶解温度为因素,进行3因素3水平的中心组合设计,采用响应面法分析3个因素对枸杞子总黄酮得率的影响。结果复合酶辅助提取枸杞子总黄酮的工艺路线为:复合酶用量0.30%,酶解时间1.0 h,酶解温度60℃。总黄酮得率预测值为0.949 2%。结论响应面法优化复合酶辅助提取枸杞子总黄酮的方法稳定可行,操作简单,可为深入研究及应用提供依据。

枸杞总黄酮对运动小鼠腓肠肌抗氧化能力的影响

目的观察枸杞总黄酮对运动小鼠腓肠肌抗氧化能力的影响。方法选择60只雄性健康小鼠,随机分为安静对照组、递增游泳训练组、递增游泳训练+TFL组,每组20只。递增游泳训练组,递增游泳训练+TFL组进行4周的低氧递增游泳训练。递增游泳训练+TFL组在训练期间每天以青海枸杞叶提取物水溶液灌胃。4周后记录小鼠力竭游泳时间和腓肠肌丙二醛含量、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性。结果①递增游泳训练组小鼠力竭游泳时间显著短于递增游泳训练+TFL组(P<0.05)。②腓肠肌丙二醛含量递增游泳训练组显著高于递增游泳训练+TFL组(P<0.05)。③腓肠肌超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性递增游泳训练组低于递增游泳训练+TFL组(P<0.05)。结论TFL具有提高小鼠运动耐力及清除活性氧的作用。

宁夏枸杞总黄酮对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响

目的观察宁夏枸杞总黄酮(total flavonoids from lycium barbarum,TFL)对MCF-7细胞株细胞增殖和凋亡的影响。方法从枸杞中提取TFL,采用细胞增殖与细胞毒性检测试剂(Cell Counting Kit 8,CCK8)法观察不同TFL作用浓度(30、75、150μg·mL^(-1))对MCF-7细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测TFL对MCF-7细胞凋亡的影响;反转录PCR法检测TFL对MCF-7细胞Bax、Bcl-2、Caspase-3的m RNA表达的影响。结果 TFL作用MCF-7细胞48h的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)为75.58μg·mL^(-1);TFL抑制MCF-7细胞的增殖,且随作用浓度增加,其抑制作用增强(P均<0.05);在药物作用48h时的抑制作用较24h时强(P<0.05)。流式细胞术显示20、37.5μg·mL^(-1)的TFL可促进MCF-7细胞凋亡作用,且随浓度增加,其凋亡率增加;20、37.5μg·mL^(-1)的TFL作用于MCF-7细胞,MCF-7细胞中Caspase-3表达随浓度增加逐渐升高,Bcl-2表达随浓度增加逐渐下降(P<0.05)。结论 TFL可抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖,促进其凋亡,为进一步研究TFL在乳腺癌防治中的作用提供了实验依据。