基于HS-SPME-GC-MS技术分析安神药对柏子仁-酸枣仁中的挥发性成分

目的:对传统药对柏子仁-酸枣仁挥发性成分进行分析,探讨其挥发性成分的药效物质基础。方法:利用单因素考察来确定最佳萃取条件,采用顶空-固相微萃取(HS-SPME)技术结合气相色谱-质谱联用法(GC-MS),测定柏子仁-酸枣仁药对的挥发性成分和相对百分含量。结果:从柏子仁-酸枣仁药对中分离出80个峰,并鉴定了其中71种挥发性成分。结论:柏子仁-酸枣仁药对的挥发性成分主要组成为萜烯类、醇类和烷烃类。

酸枣仁-柏子仁组分调控睡眠障碍中神经递质的研究

目的:探讨宁心安神中药酸枣仁-柏子仁对小鼠下丘脑5-HT能神经通路表达的影响。方法:首先,实验通过检测酸枣仁-柏子仁有效组分对小鼠海马区、下丘脑部位以及前额叶皮质区色氨酸羟化酶(TPH)和5-HT含量变化,考察酸枣仁-柏子仁有效组分对小鼠海马区、下丘脑部位以及前额叶皮质区TPH和5-HT生成的影响;其次通过TRIZOL法提取小鼠下丘脑RNA进行逆转录,最后运用Real-time PCR技术检测5-HT转运体的编码基因Slc6a4基因及5-HT1A受体编码基因Htr1a表达比值,以此探讨酸枣仁-柏子仁有效组分对小鼠下丘脑5-HT转运体编码基因及5-HT1A受体编码基因表达的影响。结果:实验结果显示,与空白组相比,给药组小鼠下丘脑部位、海马区以及前额叶皮质区TPH和5-HT的含量均显著升高(P<0.05);酸枣仁-柏子仁有效组分能使小鼠下丘脑部位Slc6a4基因表达明显降低,而Htr1a基因表达明显增加。结论:实验结果表明酸枣仁-柏子仁有效组分能通过影响色氨酸羟化酶(TPH)、5-HT转运体编码基因Slc6a4基因及5-HT1A受体编码基因Htr1a基因来增强5-HT能神经系统的效应,进而来发挥改善睡眠的作用。

基于网络药理学探究“酸枣仁-柏子仁”药对治疗失眠的作用机制

目的:通过网络药理学方法探讨“酸枣仁-柏子仁”药对治疗失眠(insomnia)的作用机制。方法:基于中药系统药理学数据库与分析平台(traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform,TCMSP)检索酸枣仁、柏子仁的活性成分及相关靶点。在GeneCards数据库和在线人类孟德尔遗传数据库(online mendelian inheritance in man,OMIM)中检索失眠相关靶点。通过在线软件Venn 2.1.0将失眠相关靶点与“酸枣仁-柏子仁”活性成分相关靶点取交集,即为“酸枣仁-柏子仁”治疗失眠的潜在靶点,绘制韦恩图,并利用Cytoscape 3.8.2软件构建“中药-活性成分-疾病靶点”网络。将潜在靶点导入STRING平台,得到潜在靶点蛋白的互作关系,利用Cytoscape 3.8.2软件构建PPI网络图,并使用“Network Analyzer”插件进行拓扑分析筛选核心靶点。将潜在靶点导入David 6.8数据库进行基因本体(gene ontology,GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)信号通路富集分析。结果:在TCMSP数据库中检索得到酸枣仁活性成分9个、柏子仁活性成分5个,相关靶点53个。在GeneCards数据库和OMIM数据库获得失眠相关靶点2 930个。通过在线软件Venn 2.1.0将失眠相关靶点与“酸枣仁-柏子仁”活性成分相关靶点取交集,得到23个“酸枣仁-柏子仁”治疗失眠的潜在靶点。“中药-活性成分-疾病靶点”网络拓扑分析得到关键活性成分为(S)-衡州乌药碱[(S)-coclaurine]、花生四烯酸(arachidonic acid)及酸李碱(zizyphusine)。PPI网络拓扑分析得到SLC6A4、SLC6A3、CASP3、SLC6A2、ADRA1B、PPARG、NOS3可能为“酸枣仁-柏子仁”治疗失眠的核心靶点基因。GO功能富集分析得到生物学过程57个,细胞组成8个,分子功能16个。KEGG信号通路富集分析得到15条信号通路。结论:“酸枣仁-柏子仁”药对可通过多成分、多靶点、多层次发挥对失眠的治疗作用。