宁远县柑橘溃疡病综合防控技术及对策

溃疡病致病菌为革兰氏阴性菌,可严重为害柑橘果实、果叶、枝条等,甚至可直接导致柑橘减产。为防控柑橘溃疡病,给柑橘种植工作的开展提供一定的指导意见,以湖南省宁远县为研究区域,分析柑橘溃疡病发生原因、综合防控技术,并提出重视绿色长效治理技术的应用、强化药剂的精准施用等防控对策。

柑橘溃疡病的发生与综合防治技术

柑橘果肉甘甜多汁,是现阶段国内社会大众主要食用的水果之一,而在柑橘种植生产的过程中,除受到天气因素影响外,还容易出现不同的病害,控制不当和防治不当的情况下,容易对柑橘种植生产产量和质量造成比较大的负面影响。溃疡病就是对柑橘种植生产影响比较大的一种细菌性病害,几乎世界范围内各个国家的柑橘都会面临溃疡病的影响。并且从植物种的角度上来说,溃疡病致病菌寄主多达芸香科数十个植物种,除寄主数量繁多外,这一病害传播途径广,传染迅速,危害严重,顽固难防,被列为国内外植物检疫对象,禁止输入或输出。因此,在柑橘种植生产工作中,对溃疡病防治需要保持高度关注和重视,应采取针对性的综合防治技术,保障柑橘种植生产的效益。

柑橘溃疡病综合防治措施探讨

柑橘溃疡病是由黄单胞菌属中的某些细菌引起的一种严重植物病害,不仅威胁到柑橘树的健康,还对我国柑橘产业构成了重大挑战。柑橘溃疡病主要通过风、雨、昆虫以及人为操作传播,一旦感染,会在果实和叶片上形成典型的溃疡症状,导致果实变形、落果甚至整株死亡。由于该病原菌的强适应性和快速传播能力,单一防治措施往往难以达到理想的防控效果,研究和实施柑橘溃疡病综合防治策略显得尤为重要。本文首先概述了柑橘溃疡病症状,然后分析了柑橘溃疡病原因,最后提出了柑橘溃疡病综合防治措施。

几种药剂对柑橘溃疡病的田间防治效果

柑橘溃疡病(Xanthomonas axonopodis pv.citri)是为害柑橘的重要细菌性病害,严重影响柑橘品质和产量,试验选取37.5%氢氧化铜SC、20%噻菌铜SC、20%噻唑锌SC、6%春雷霉素SL、30%王铜SC和47%春雷·王铜WP杀菌剂,研究其对柑橘溃疡病的防治效果。结果显示,在新梢约2 cm时开始施药,6种杀菌剂在设置的使用剂量下对柑橘溃疡病的防治效果均在80%以上,生产上可作为防治柑橘溃疡病的备选药剂,建议各果园根据该病害发生情况、防治时期及药剂性能进行合理轮换使用。

36%春雷·喹啉铜悬浮剂对柑橘溃疡病的防治效果

本文研究了不同剂量36%春雷·喹啉铜悬浮剂对柑橘溃疡病的田间防治效果。结果表明,36%春雷·喹啉铜悬浮剂对柑橘新梢和果实溃疡病的防效随着稀释倍数的增加而降低,其中以36%春雷·喹啉铜悬浮剂750倍液的防效最优,分别达71.6%和75.9%,与对照药剂77%氢氧化铜水分散粒剂的防效相当,且在试验使用剂量下对脐橙安全性良好,可大面积推广应用。

冰糖橙叶片受柑橘溃疡病菌诱导脱落的离区解剖特性分析

【目的】观察冰糖橙叶片受柑橘溃疡病菌(Xanthomonas citri subsp.citri,Xcc)诱导脱落过程中离区组织结构的动态变化特征,探明冰糖橙叶片受Xcc诱导脱落的特征和规律。【方法】通过不同的活体接种方式和接种不同浓度的病原菌,筛选加速叶片脱落的Xcc接种方式和接种浓度,并采用树脂切片观察叶片脱落过程中离区组织结构变化。【结果】与注射接种10^(6)或10^(7)CFU·mL^(-1)Xcc、10^(8)CFU·mL^(-1)主要致病效应子pthA4缺失的菌系Xcc 049A,以及浸泡接种10^(8)或10^(9)CFU·mL^(-1)Xcc相比,注射接种10^(8)CFU·mL^(-1)Xcc显著促进本叶脱落,翼叶未脱落,4 dpi(day post inoculation)离区细胞分化形成离层和保护层,离区细胞膨大且细胞平均面积减少。【结论】冰糖橙叶片注射接种10^(8)CFU·mL^(-1)Xcc后,在本叶和翼叶衔接处从外周向中轴逐渐分离,分化形成成熟的离层和保护层,最终导致本叶脱落。

csi-miR399响应柑橘溃疡病菌侵染的表达模式及其抗病性分析

【目的】明确csi-miR399响应柑橘溃疡病菌(Xanthomonas citri subsp.citri,Xcc)侵染的表达模式,筛选其靶基因,进而分析csi-miR399与寄主Xcc抗性的相关性,为柑橘溃疡病抗性种质的创制打下基础。【方法】分别以柑橘溃疡病抗性品种四季橘(Citrus microcarpa)和感病品种纽荷尔脐橙(Citrus sinensis)为试材,通过茎环qPCR方法分析csi-miR399在叶片离体注射Xcc 1、3和5 d时的表达量变化,明确抗/感品种中csi-miR399响应Xcc侵染的表达模式;利用在线软件psRNATarget预测csi-miR399的靶基因,并通过qPCR分析候选靶基因在接种Xcc柑橘叶片和瞬时表达csi-miR399叶片中表达量的变化;克隆csi-miR399前体基因序列,通过同源重组方法构建病毒表达载体pCLBV202-MIR399,根癌农杆菌介导的真空浸润法接种尤力克柠檬(Citrus limon),通过qPCR分析csi-miR399表达量;进而采用离体叶片针刺法接种Xcc,观察发病症状,统计病情指数,分析csi-miR399过表达对Xcc抗性的影响。【结果】接种Xcc后,csi-miR399在抗病品种四季橘中的表达呈现先下降再上升的趋势,而在感病品种纽荷尔脐橙中的表达呈持续下降趋势。接种Xcc 5 d时,csi-miR399在四季橘与纽荷尔脐橙中的表达量分别是健康对照的4.64倍和7.61%,初步表明csi-miR399与柑橘的溃疡病抗性相关。从13个预测靶基因中筛选鉴定了csi-miR399的3个靶基因Cs2g06030、Cs7g03830、Cs8g18800,分别编码泛素偶联酶PHO2、未知蛋白和漆酶。利用构建的病毒表达载体pCLBV202-MIR399获得过表达csi-miR399的柠檬植株(Y37、Y41和Y57),与空载体对照pCLBV202接种植株(L35)相比,Y37、Y41和Y57中csi-miR399表达量显著增加,接种Xcc后的溃疡病病斑面积显著减小,病情指数显著降低(P<0.01),表明csi-miR399过表达显著提高了柠檬的溃疡病抗性。【结论】csi-miR399与柑橘的溃疡病抗性密切相关,过表达csi-miR399显著提高柑橘对溃疡病的抗性,可应用于柑橘抗溃疡病的分子育种。

植物源甘油酯对氢氧化铜防控柑橘溃疡病的减量增效作用

为评价植物源甘油酯作为助剂对氢氧化铜防控柑橘溃疡病的减量增效作用,试验比较了46.1%氢氧化铜水分散粒剂单独使用、植物源甘油酯乳剂300倍液+46.1%氢氧化铜水分散粒剂2143倍液(减量30%)、植物源甘油酯乳剂300倍液+46.1%氢氧化铜水分散粒剂3000倍液(减量50%),对柑橘溃疡病的防治效果。结果表明:减量30%的处理对柑橘溃疡病的防治效果最好,对叶片的防治效果显著高于减量50%和不减量的处理,3个处理间对果实的防治效果无显著差异。综合比较,采用喷施植物源甘油酯助剂300倍液+46.1%氢氧化铜水分散粒剂2143倍液的处理,可以提高氢氧化铜对柑橘溃疡病的防控效果,同时减少其使用量,值得在生产上推广应用。

柑橘溃疡病发生规律及绿色防控技术探讨

柑橘溃疡病传播途径广,传染迅速,防治困难,严重影响柑橘的品质和产量。本文分析了枝江市柑橘溃疡病发生规律和发生原因,提出了枝江市柑橘溃疡病绿色防控建议措施,为科学防治提供参考。

柑橘溃疡病的发生、检测及绿色防控研究进展

柑橘溃疡病是柑橘类果树主要的细菌性传染病害之一,在我国柑橘产区分布广泛,具有危害重、传播快、寄主广、难根治等特点。近年来国内外相关专家学者对柑橘溃疡病及其防治方法进行了系统研究,取得了诸多成果。分析柑橘溃疡病的发生特点,发现其每年4月上旬开始发病,直至11月均有发生,5月下旬、7月上旬、9月下旬至10月上旬为发病高峰期;高温、多雨、大风天气有利于柑橘溃疡病的发生,夏梢发病最严重,秋梢次之,春梢较轻。综述柑橘溃疡病致病菌侵染过程(主要侵染柑橘的叶、枝、梢和果实,新抽发的嫩梢、嫩叶、幼叶和未成熟叶、幼果等更易感染。)、检测方法(主要有常规检测法、激光检测法、现代分子检测技术、图像识别智能检测技术)及其绿色防控技术(农业防治、生物防治、科学用药、治虫控病)研究进展。

柑橘溃疡病气象条件等级预测模型构建与应用

基于广东省2015—2020年柑橘溃疡病发病样本和同期候平均气温、候降水、候平均相对湿度等地面气象观测资料,采用加权综合法、通径分析等方法,确定了柑橘溃疡病发生发展气象条件等级分级标准和不同气象因子的权重系数,构建了广东柑橘溃疡病综合气象条件等级预测模型。结果表明:候平均气温23.0~26.0℃、候降水≥50 mm、候平均相对湿度95%~100%最利于柑橘溃疡病发生;候平均气温、候降水、候平均相对湿度的权重系数分别为0.421 3、0.342 8和0.245 9;柑橘溃疡病发生气象条件等级预测方程为F_(c)=0.421 3t_(p)+0.3428R_(p)+0.245 9RH_(p)。模型通过2015—2020年历史回代检验,准确率为84.9%,2021年预测验证准确率77.8%;运用2021年天气预测产品试报应用表明,准确率达66.7%,预报效果较好。

46%氢氧化铜水分粒散剂对沃柑柑橘溃疡病的田间防治效果

为明确46%氢氧化铜水分粒散剂对沃柑发生的柑橘溃疡病的防治效果,开展相关田间药效试验。结果表明,46%氢氧化铜水分粒散剂1500倍和2000倍稀释液对溃疡病的防治效果显著优于波尔多液,其中1500倍液的处理效果亦优于2000倍液;两种供试药剂浓度在试验期间均未发现药害现象。

40%戊唑·噻唑锌悬浮剂防治柑橘溃疡病田间药效试验

2022年在广西上林县开展了40%戊唑·噻唑鋅悬浮剂防治柑橘溃疡病田间药效试验,以3%噻霉酮微乳剂、33.5%喹啉铜悬浮剂为对照药剂。试验结果表明,40%戊唑·噻唑鋅悬浮剂对柑橘溃疡病具有较好的防治效果,能有效控制病害蔓延,且用药安全。建议生产使用浓度为800~1000倍液,在柑橘溃疡病发病前或发病初期开始用药,间隔期7天,连续用药3次以上,防治效果较理想。

三种药剂防治柑橘溃疡病的田间药效试验

随着广西柑橘种植面积的进一步增加,柑橘溃疡病的防治难度也随之上升。为提高柑橘溃疡病的防治效果,保障柑橘产量及质量,选择广西南宁市隆安县华岳村柑橘园作为试验地,研究9%萜烯醇乳油(120 mg·L^(-1)、180 mg·L^(-1))、40%噻唑锌悬浮剂533 mg·L^(-1)、46%氢氧化铜水分散性粒剂300 mg·L^(-1)单剂及混配药剂对柑橘溃疡病的田间效果及混配药剂安全性。试验结果表明,第3次药后15 d、30 d,9%萜烯醇乳油120 mg·L^(-1)+40%噻唑锌悬浮剂533 mg·L^(-1)和9%萜烯醇乳油180 mg·L^(-1)+46%氢氧化铜水分散性粒剂300 mg·L^(-1)能有效防治柑橘溃疡病,防效均在85%以上,可进一步应用示范。

柑橘溃疡病生物防治技术研究进展

柑橘是我国重要经济作物,且广泛种植于世界其他国家,为各种植地区带来不小的经济效益。然而柑橘经常会遭受到病虫害等侵袭,柑橘溃疡病便是其中较频发的一种。该病对植株造成枯枝落枝、树势衰弱等严重伤害,并使果实产生病疤,品质降低,更甚者会导致果实脱落,产量下降,影响种植户的经济收入,且使得整体柑橘产业发展迟滞。当前已有化学、生物、物理等多种类防治方法,有效抑制了柑橘溃疡病的扩散,但该病尚无法得到根本性的控制。本文总结了几类常用的柑橘溃疡病生物防治技术,并对柑橘溃疡病生物防治技术未来趋势进行展望,以期能为柑橘溃疡病的防治做出贡献。

7种杀菌剂防治柑橘溃疡病的田间药效试验

为进一步筛选防治柑橘溃疡病的高效安全药剂,明确不同杀菌剂对柑橘溃疡病的防治效果及对柑橘的安全性,特开展7种常用杀菌剂(46%氢氧化铜水分散粒剂、80%波尔多液可湿性粉剂、30%噻唑锌悬浮剂、1000亿芽孢/g枯草芽孢杆菌可湿性粉剂、6%春雷霉素可溶液剂、50%喹啉铜水分散粒剂、47%春雷·王铜可湿性粉剂)防治柑橘溃疡病的田间药效试验。结果表明:供试杀菌剂对柑橘溃疡病均具有一定的防治效果,其中化学杀菌剂对柑橘溃疡病的防治效果显著高于抗生素类及生物类杀菌剂,30%噻唑锌悬浮剂625倍液、46%氢氧化铜水分散粒剂1750倍液和47%春雷·王铜可湿性粉剂625倍液对柑橘叶片及果实溃疡病的防治效果较好,在生产上具有良好的推广应用前景,但应注意交替轮换使用,以延缓柑橘溃疡病病菌的抗药性。

5%大蒜素微乳剂与2%春雷霉素复配对柑橘溃疡病的田间药效试验

[目的]明确植物源农药5%大蒜素微乳剂复配化学农药2%春雷霉素对柑橘溃疡病在田间使用时的减量增效作用,从而指导生产应用。[方法]依照杀菌剂田间药效试验准则进行田间药效试验。[结果] 2%春雷霉素单用对柑橘溃疡病的防效为50.82%,5%大蒜素微乳剂单用可达到2%春雷霉素的防治效果,当两者复配后对柑橘溃疡病防效为81.96%,同时减少2%春雷霉素用量约50%,对柑橘无药害,对环境更加友好。[结论]5%大蒜素微乳剂与2%春雷霉素复配有一定的减量增效作用。

超量表达CsGH3.6通过抑制生长素信号转导增强柑橘溃疡病抗性

【背景】由柑橘黄单胞杆菌柑橘亚种(Xanthomonas citri subsp.citri,Xcc)引起的柑橘溃疡病是柑橘生产上最具毁灭性的一种病害。植物生长素在调控柑橘溃疡病菌引起的寄主侵染部位脓疱形成中起重要作用。生长素早期响应基因GH3通过酰基化吲哚-3-乙酸(indole-3-acetic acid,IAA)调控植物激素动态平衡。前期研究发现柑橘CsGH3.6在调控生长素响应溃疡病侵染中起着重要作用。【目的】通过对超量表达CsGH3.6转基因晚锦橙的抗病性、植株表型、细胞和激素变化进行分析,利用RNA-Seq解析CsGH3.6调控的信号通路,探明CsGH3.6调控激素动态平衡影响柑橘溃疡病抗性的内在机制。【方法】利用针刺法对离体转基因叶片接种溃疡病菌Xcc,统计接种第10天时病斑面积和病情指数,以野生型为对照,评价转基因植株的抗性水平;提取感病前后叶片内源激素,利用高效液相色谱技术(high performance liquid chromatography,HPLC)检测转基因植株中激素含量变化;温室中观察转基因植株表型变化;通过测量叶片纵径、横径和厚度分析转基因植株叶型变化特征;制备叶片表皮切片,显微观察表皮细胞和气孔,并统计转基因植株表皮细胞长度和气孔密度;采用RNA-Seq测序技术研究转基因植株转录组变化情况,并利用Nr、Nt、Pfam、COG、SwissProt和gene ontology(GO)数据库注释基因功能,进一步利用KEEG数据库和MapMan软件解析超量表达CsGH3.6影响的重要基因、功能和途径,阐明CsGH3.6调控柑橘溃疡病抗性的分子机制。【结果】超量表达CsGH3.6显著增强转基因植株的溃疡病抗性;转基因植株分枝增多且下垂,叶片向上卷曲,变小,颜色浅;转基因植株气孔密度增加,表皮细胞变短;激素含量分析显示,转基因植株自由生长素(IAA)和茉莉酸(jasmonic acid,JA)含量显著降低,而水杨酸(salicylic acid,SA)含量显著增加;转录组测序分析表明,超量表达CsGH3.6显著抑制生长素信号转导相关基因表达,特别是所有注释的Aux/IAA家族基因均下调表达,相反,与生物胁迫相关基因的表达为上调,其中绝大部分基因为病程相关蛋白基因。【结论】超量表达CsGH3.6通过酰基化自由IAA抑制生长素信号转导,调控JA和SA的动态平衡,改变细胞和植株的形态建成,从而增强柑橘对溃疡病的抗性。研究结果暗示调控激素动态平衡在柑橘抗病育种中具有潜在价值。

柑橘溃疡病生防菌株CQBS03的鉴定及其培养特性研究

【目的】筛选鉴定柑橘溃疡病菌拮抗菌,研究其培养特性及拮抗物质的初步性质,为柑橘溃疡病的生物制剂研制奠定基础。【方法】利用对峙培养法筛选对柑橘溃疡病菌具有良好抑制作用的生防菌,并通过对菌株形态、生理生化特征以及16SrDNA序列分析鉴定其分类地位;以单因素试验和正交设计方法对影响CQBS03菌株抑菌活性物质产生的各种培养条件进行优化;利用硫酸铵沉淀获得抑菌物质粗提物并测定其对温度、蛋白酶及氯仿的敏感性。【结果】经鉴定CQBS03为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。CQBS03抑菌活性成分主要存在于培养液中,能被80%饱和度硫酸铵沉淀,最高可耐受的温度范围为60～70℃;活性成分在280nm处有最大吸收峰,分子量大于10kD,对蛋白酶K和胰蛋白酶稳定,而对氯仿部分敏感。培养特性研究表明,CQBS03最适培养基为YPG液体培养基,抑菌物质产生的最适培养条件为:pH8.0左右,28℃培养72h。【结论】枯草芽孢杆菌CQBS03所产生的抑菌物质主要成分是蛋白质,且属于外泌型蛋白;该抑菌蛋白对多种植物病原菌有抑菌作用,尤其对柑橘溃疡病菌抑菌活性高,稳定性好,是一株极具开发潜力的生防菌株。

柑橘溃疡病土壤拮抗放线菌的分离及菌株A16初步鉴定

【目的】寻找一种适用于南方柑橘果园的土壤放线菌分离方法,充分利用好基于放线菌的生防药剂。【方法】从广西省桂林市采集柑橘溃疡病发生果园的土壤样品,选用高氏一号培养基稀释分离法分离纯化放线菌,研究重铬酸钾浓度、土壤热处理温度以及孢子活化SDS浓度对放线菌分离的影响。【结果】确定最佳分离条件为重铬酸钾125mg·L-1、不做热处理,0.05%SDS对孢子活化的作用最好。从土壤中分离出对柑橘溃疡病菌拮抗效果较好的放线菌株A16,经电镜观察及16S rDNA测序,初步确定其为灰色链霉属。【结论】拮抗放线菌筛选方法可快速获得柑橘溃疡病的拮抗放线菌。