柑橘胚性愈伤组织总多酚含量影响因素的研究

研究了甲醇水溶液浓度和浸提时间、品种/基因型、培养时间对柑橘胚性愈伤组织总多酚含量的影响。结果表明,用40%的甲醇溶液在55℃水浴条件下浸提30min,柑橘胚性愈伤组织总多酚的得率最高;总多酚含量受品种/基因型的影响,在所比较的6个柑橘品种/基因型暗柳橙、椪柑、默科特橘橙、无酸甜橙、锦橙和红马叙葡萄柚中,暗柳橙胚性愈伤组织的总多酚含量最高;总多酚含量随培养时间的改变而变化,在培养40d时各品种/基因型胚性愈伤组织的总多酚含量均达到最大值。

TDZ对柑橘胚性组织生长与遗传转化的影响

噻苯隆(Thidiazuron,TDZ)是一类人工合成的苯基脲衍生物,广泛用于多种植物的组织培养。本文以椪柑胚性愈伤组织和球形胚状体为试材,研究了不同浓度TDZ对柑橘胚性愈伤组织增殖与胚状体发育的影响;在此基础上,研究了TDZ对12种柑橘胚性愈伤组织转化的影响。结果表明,培养基中添加较低浓度的TDZ可促进椪柑胚性愈伤组织的增殖,以0.4mg/L为最佳,超过该浓度则起抑制作用。单独使用TDZ不能促进该品种体胚的发生与再分化,但可促进胚状体体积的增大。在筛选培养基和共培养培养基中附加0.4mg/L TDZ,可明显促进椪柑抗性愈伤组织的增加和提高多种柑橘胚性愈伤组织的GFP瞬时荧光表达率,从而提高转化率。