染料木素共聚物纳米胶束冻干粉的制备及性质

目的制备染料木素共聚物纳米胶束冻干粉。方法以共聚物聚乙二醇-聚乳酸(PEG-PLA)为载体,采用改良溶剂挥发法制备染料木素共聚物纳米胶束,用真空冷冻干燥法制备染料木素共聚物纳米胶束冻干粉。通过考察制备的冻干粉特性来确定冻干保护剂的种类和用量。结果5%蔗糖为最佳冻干保护剂,得到的冻干粉外观符合冻干制剂要求,粒径为(133.56±3.67)nm,Zeta电位为(-12.60±2.26)mV。冻干工艺为:真空度1 Pa,-60℃预冻5 h,-35℃恒定2 h,-33℃恒定5 h,-30℃恒定5 h,0℃恒定2 h,25℃恒定2 h。冻干粉在水中分散性良好,体系中染料木素浓度达到333.32μg·mL-1。染料木素纳米共聚物胶束冻干粉具有生物活性,其对羟自由基(·OH)的清除作用在20~80μg·mL-1范围内强于染料木素单体。结论通过冻干保护剂种类和用量的筛选及冻干工艺的优化,可得到较为稳定的染料木素共聚物纳米胶束冻干粉。

染料木素MePEG-PLGA共聚物胶束在荷瘤小鼠中靶向性研究

目的 采用人肝癌SMMC-7721细胞移植裸鼠,研究染料木素MePEG-PLGA共聚物胶束在荷瘤小鼠体内的分布情况。方法 以FITC为荧光探针,采用HPLC定量和小动物活体成像技术监测染料木素MePEG-PLGA共聚物胶束在荷瘤小鼠体内的分布情况。结果 建立了简单可靠的高效液相色谱方法用来定量分析荷瘤小鼠心、肝、脾、肺、肾、肿瘤组织以及血浆中的染料木素(GEN)浓度,色谱柱为DIKMA Diamonsil(钻石C18,5μm,250 mm×4.6 mm),流动相为甲醇∶水=60∶40(V/V),检测波长为260 nm,流速为0.8 mL·min^(-1),柱温为35℃,进样量为10μL。荷瘤裸鼠的体内分布研究结果表明,GEN胶束在肿瘤部位的相对摄取率(RUE)可达到2.04,峰浓度比值(Ce)也高达1.68,明显高于其他器官(P<0.05),与乳剂相比能够明显提高药物在肿瘤部位的蓄积。小动物成像结果表明,尾静脉注射给药后4 h时GEN胶束在肿瘤部位聚集最多,明显高于其他组织。结论 染料木素MePEGPLGA共聚物胶束能够在肝肿瘤部位富集,可明显提高给药系统的肿瘤靶向性。

染料木素甲氧基封端的聚乙二醇-乳酸羟基乙酸共聚物胶束在小鼠体内的组织分布研究

目的:研究染料木素甲氧基封端的聚乙二醇-乳酸羟基乙酸(Me PEG-PLGA)共聚物胶束在小鼠体内的组织分布特征。方法:采用高效液相色谱法测定染料木素在小鼠血浆及各组织(心、肝、脾、肺、肾)中的浓度。色谱柱为Dikma Diamonsil C18,流动相为甲醇-水(60∶40,V/V),流速为1.0 m L/min,检测波长为260 nm,柱温为35℃,进样量为10μL。48只小鼠分为乳剂组和胶束组,每组24只,分别按40 mg/kg剂量尾静脉注射染料木素乳剂或染料木素Me PEG-PLGA共聚物胶束,检测给药后5、30、90 min血浆及各组织(心、肝、脾、肺、肾)中染料木素的含量,比较两组AUC_(0-90 min)和平均驻留时间(MRT)。结果:胶束组小鼠给药后5、30、90min血浆中染料木素的含量均高于乳剂组,给药后5、30 min肝组织中染料木素的含量均低于乳剂组。与乳剂组比较,胶束组小鼠血浆中染料木素的AUC_(0-90 min)明显增加、MRT明显延长(P<0.01),肝组织中染料木素的AUC_(0-90 min)明显降低、MRT明显缩短(P<0.05),肾组织中染料木素的AUC_(0-90 min)明显增加(P<0.05),其他差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:染料木素制成Me PEGPLGA共聚物胶束后,可增加血浆中染料木素的分布,降低其在肝组织中分布,从而可能会提高治疗效果并降低药物肝毒性。

染料木素MePEG-PLGA共聚物胶束体内外抗肿瘤作用

目的探讨染料木素MePEG-PLGA共聚物胶束对人肝癌SMMC-7721细胞的体内外抗肿瘤作用。方法采用MTT法、Annexin V-FITC/PI染法分别考察染料木素MePEG-PLGA共聚物胶束对人肝癌SMMC-7721细胞的细胞毒性、细胞凋亡、细胞周期的影响;通过荷肝SMMC-7721瘤裸鼠体内抗肿瘤试验,考察染料木素胶束的体内抗肿瘤效应。结果染料木素胶束对肝癌SMMC-7721细胞的抑制率均高于染料木素,最高抑制率分别可达83.26%,78.25%。流式细胞仪检测结果显示,染料木素胶束组能够提高染料木素对SMMC-7721细胞凋亡的诱导能力,并且呈浓度依赖性。5,10,20μg·mL^-1的染料木素组和染料木素胶束组药物作用于SMMC-7721细胞48 h时,染料木素胶束能够明显提高染料木素对细胞G2/M期细胞的阻滞作用,并且呈现浓度依赖性。体内抗肿瘤试验结果表明,相同浓度的染料木素胶束组的抑瘤效果显著强于染料木素乳剂组,呈浓度依赖性,最高抑瘤率可达55.41%。结论染料木素MePEG-PLGA共聚物胶束在体内和体外均有显著的抗肝癌作用。

染料木素-维生素E琥珀酸酯-聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯纳米胶束的制备研究

目的制备染料木素(genistein,GEN)-维生素E琥珀酸酯(VES)-聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯(TPGS)纳米胶束,以改善染料木素口服生物利用度。方法薄膜分散法制备GEN-VES-TPGS纳米胶束,以胶束平均粒径、包封率、载药量为评价指标,单因素实验优化处方及工艺,包括TPGS、VES、GEN的用量、水化体积、水化温度、水化时间;对优选处方工艺的胶束形态、体外释放度及大鼠体内药动学进行了考察。结果优化得到处方为TPGS 200 mg、VES 30 mg、GEN6 mg,水化体积15 mL、水化温度50℃、水化时间3 h。所制备GEN-VES-TPGS纳米胶束澄明度好,平均粒径为(43.50±1.65)nm,包封率为(98.99±0.69)%,载药量为(2.57±0.04)%;胶束呈球形,可见明显的囊泡结构,GEN原料药和纳米胶束在体外均呈现缓释特征;大鼠ig给药药动学结果显示,所构建的GEN纳米胶束生物利用度为GEN原料药的162.96%。结论所制备的GEN-VES-TPGS纳米胶束粒径小,稳定性好,显著地提高了GEN口服生物利用度。