槐角中染料木苷和槐角苷的匀浆-超声协同提取工艺的研究

以槐角为原料,乙醇作为提取溶剂,利用匀浆-超声协同辅助的方法提取染料木苷与槐角苷。采用高效液相色谱法为定量手段,考察了乙醇体积分数、液料比、匀浆时间、匀浆速率、超声时间、超声功率、超声空化时间和超声缓冲时间这些因素对染料木苷和槐角苷得率的影响。确定最佳提取条件分别为:乙醇体积分数50%,液料比20 mL·g^(−1),匀浆时间3 min,匀浆速率22000 r·min^(−1),超声时间35 min,超声功率350 W,超声空化时间2.5 s,超声缓冲时间1.5 s。匀浆-超声协同提取法与传统提取方法相比,具有高效、环保、节能的优点。

反相高效液相制备色谱法分离淡豆豉中的大豆苷、黄豆苷、染料木苷

目的:建立一种快速、高效地从淡豆豉的乙醇提取物中分离3种大豆异黄酮苷的方法。方法:采用索氏提取除去脂溶性成分,再经1300型大孔吸附树脂初步分离纯化,分别用水、10%、20%、30%、40%、50%、70%、95%乙醇梯度洗脱,其中对40%乙醇洗脱流分采用反相高效液相色谱法制备,色谱条件:YWG C18柱(10.0 mm×200 mm,10μm),进样量750μl,乙腈-水-冰醋酸(25:75:1,V/V/V)为流动相,流速3.0 m l/m in,检测波长260 nm。结果:快速分离得到大豆苷、黄豆苷和染料木苷,经外标法检测,所得化合物纯度均达到99%以上。结论:该方法操作简便,可重复进样,适用于高纯度大豆异黄酮苷的制备。

蔓性千斤拔中染料木素和染料木苷的提取工艺研究

目的:考察蔓性千斤拔中染料木素和染料木苷的最佳提取工艺。方法:采用HPLC法,以染料木素和染料木苷为指标,通过单因素试验及正交试验确定从蔓性千斤拔中提取染料木素和染料木苷的最佳工艺。结果:蔓性千斤拔药材的最佳乙醇提取工艺为:80%乙醇,料液比2∶60,超声温度50℃,超声时间60 min。结论:该实验确定的最佳提取工艺稳定性好且简便易行。

薄层扫描法测定槐角及槐角丸中的染料木苷和总染料木素

在硅胶G薄层色谱板上,采用双波长薄层扫描法建立了测定槐角、槐角丸中的染料木苷和总染料木素的分析方法。染料木苷和染料木素的薄层展开剂分别为V(三氯甲烷)∶V(甲醇)∶V(冰乙酸)=25∶7∶4和V(三氯甲烷)∶V(甲醇)∶V(冰乙酸)=15∶1∶0.1,染料木苷和染料木素分别在0.5～3.0μg和0.9～5.0μg范围内呈良好线性。该方法为中药槐角和中成药槐角丸的质量控制提供检测方法。

染料木苷和黄豆苷的纯化和分离

为了深入研究大豆提取物中主要成分染料木苷和黄豆苷单体的性质,本实验进行了二者的分离。首先用丙酮萃取和无水乙醇重结晶等方法纯化大豆异黄酮提取物,得到纯度较高的染料木苷和黄豆苷混合物。然后,利用Sephadex LH-20柱层析实现了染料木苷和黄豆苷的分离。

染料木苷纯度标准物质定值及不确定度评估

目的建立纯度标准物质的2种定值方法并对染料木苷的纯度定值和不确定度进行评估。方法采用液相色谱质谱法和核磁氢谱法对原料进行定性确证。质量平衡法中主要采用液相色谱-面积归一化法对原料的主成分进行定量分析,然后采用微量水分测定仪测定原料中的水分,采用顶空气相色谱法测定挥发性杂质,采用电感耦合等离子质谱法测定金属元素杂质。定量核磁法采用一级纯度标准物质苯甲酸为内标,经过方法优化,通过不同位移上氢峰的面积比进行纯度定值。结果 2个方法定值结果均为99.72%,质量平衡法的不确定度评估为0.19%,定量核磁法的不确定度评估为0.09%。结论建立的2种染料木苷纯度标准物质的定值方法准确、可靠,不确定度评估合理,适合大豆异黄酮类纯度标准物质的准确定值。

高速逆流色谱法分离大豆异黄酮中的大豆苷和染料木苷

大豆异黄酮对前列腺癌、乳腺癌、结肠癌等具有抑制肿瘤细胞增殖及抑制肿瘤生长作用.为了分离得到制备级的大豆异黄酮单体,实验采用高速逆流色谱法(HSCCC)分离纯化大豆异黄酮,并选用高效液相色谱法(HPLC)测定样品的质量分数.通过对溶剂体系的选择,以及对主机转速、流速和进样量的优化,确定了分离纯化大豆异黄酮单体的最佳工艺条件.在最佳工艺条件下,对大豆异黄酮进行分离纯化,分离得到大豆苷91.65%,染料木苷92.97%.

高效液相色谱法测定大豆异黄酮粉中大豆苷和染料木苷的含量

目的 探讨高效液相色谱法(High performance liquid chromatography,HPLC)测定大豆苷和染料木苷的含量.方法 十八烷基键合硅胶柱,流动相为甲醇-水-乙酸(40∶60∶1.2),检测波长254 nm.结果 大豆苷在0.008～0.4 μg内,染料木苷在0.0068～0.34 μg内,峰面积与浓度线性关系良好(大豆苷r=0.998 6;染料木苷r=0.999 9).结论 该方法简便快捷,重复性好,可作为质量控制指标之一.

荧光光谱法研究染料木苷与牛血清白蛋白的相互作用

采用荧光光谱法,在pH=7.4的磷酸盐缓冲溶液(PBS)中研究了染料木苷(Genistin,Ge)与牛血清白蛋白(BSA)的作用方式及作用机理。结果表明,Ge可静态猝灭BSA的内源荧光,二者之间的结合位点数为1.4,温度对结合常数影响不大,300K、306K、310K和313K的结合常数平均为4.31×104 L.mol-1。热力学参数表明二者之间的作用力主要是静电力。同步荧光光谱表明Ge使色氨酸残基的微环境亲水性增强。本研究对于阐明Ge与蛋白的相互作用机理具有借鉴意义。

染料木苷对3T3-L1脂肪细胞分化以及AMPK磷酸化的影响

目的观察染料木苷(Genistin,GIN)对3T3-L1前脂肪细胞细胞分化以及分化过程中腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)磷酸化程度的影响。方法用激素鸡尾酒法诱导3T3-L1前脂肪细胞分化,用MTT法观察GIN对细胞生存率的影响,以油红O染色法镜下观察3T3-L1前脂肪细胞分化的情况,并通过比色分析法检测GIN对细胞内脂滴堆积量的影响;用Western blotting方法分别检测对照组和给药组细胞分化过程中细胞中AMPK,P-AMPK(Thr172)蛋白表达量,借以计算AMPK磷酸化比率。结果分化诱导后,对照组脂肪细胞呈典型的成熟脂肪细胞表型,形成"戒指环"结构,经100μM GIN干预后,脂滴数量减少,体积减小,通过比色分析法量化后显示100μM GIN可减少胞内脂质的堆积(P<0.05)。与对照组相比,给药组从第4天开始上调p-AMPK(Thr172)/AMPK比率,并持续到第10天(P<0.05)。结论 GIN可通过激活AMPK抑制3T3-L1脂肪细胞分化。

黄豆、豆浆、豆渣中黄豆苷、染料木苷、染料木素的含量测定

建立同时测定黄豆中黄豆苷、染料木苷、染料木素的RP-HPLC法,为豆类食品中以上有效化学成分的检测和合理食用提供参考。样品经80%甲醇超声提取15 min,采用Eclipse XDB-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5.0μm)色谱柱,以甲醇∶0.1%磷酸=62.5∶37.5为流动相,流速为1.00 mL/min,进样量为10μL,检测波长为254 nm。以峰面积计算结果为黄豆苷、染料木苷、染料木素分别在0.5~32.0 mg/L,4.0~128.0 mg/L,0.1~16.0 mg/L呈良好线性关系,相关系数r均为0.999 9;测定黄豆苷、染料木苷、染料木素的高、中、低浓度精密度均<2.0%,三成分的重现性精密度分别为1.67%,0.06%,0.07%,表明该方法精密度和重现性良好。测定黄豆样品中黄豆苷,染料木苷,染料木素的平均含量分别为724.3,1 306.7,16.0μg/g。黄豆苷在其豆浆和豆渣中含量分别为黄豆的39.6%,23.2%;染料木苷在其豆浆、豆渣中分别为黄豆的53.5%,34.9%;染料木素在豆渣中含量约占黄豆的43.1%,而豆浆中因浓度低而未检出。

染料木苷对FFAs诱导的HepG2细胞胰岛素抵抗的影响

目的观察染料木苷对游离脂肪酸(FFAs)诱导的HepG2细胞胰岛素抵抗的影响。方法软脂酸诱导HepG2细胞胰岛素抵抗,给予不同浓度的染料木苷(1、2、4μmol/L)、罗格列酮(1μmol/L)干预,采用MTT法检测药物对细胞增殖的影响,以葡萄糖氧化酶法检测葡萄糖消耗量(GC),使用Western blot法检测肝细胞葡萄糖转运体1(GLUT1)蛋白的表达水平。结果不同浓度的染料木苷对HepG2细胞增殖无影响;与对照组比较,软脂酸作用24h后,HepG2细胞在胰岛素刺激下的GC降低,GLUT1表达减少(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,染料木苷组HepG2细胞GC随浓度增加而明显提高,GLUT1蛋白表达明显增加(P<0.05,P<0.01)。结论染料木苷能改善软脂酸诱导的HepG2细胞胰岛素抵抗。

RP-HPLC测定马齿苋黄酮提取物中染料木苷的含量

目的检测马齿苋黄酮提取液中染料木苷的含量。方法用反相高效液相色谱（RP-HPLC）检测马齿苋黄酮部位中染料木苷的含量。色谱柱为SunfireC18column（250.0mm×4.0mm，5.0μm），流动相为甲醇：冰醋酸：水＝45：1：55，流速为0.8ml/min，柱温25℃，柱压2144psi，检测波长为259nm。结果马齿苋黄酮部位中染料木苷与标准品中染料木苷保留时间一致，染料木苷进样量在0.0625～2.0000ng范围内线性关系良好（r＝0.9999），平均回收率98.30％，RSD＝0.57％（n＝5）。结论RP-HPLC测定方法简便，结果可靠，含生药6kg/L的马齿苋黄酮提取液中染料木苷含量为1.66mg/L。

大豆糖蜜发酵提高染料木苷含量研究

以制备大豆浓缩蛋白时副产物"大豆糖蜜"为底物,通过发酵法提高其染料木苷含量。在单因素试验基础上,采用正交试验优化发酵工艺条件;结果表明,最宜发酵工艺条件为:发酵温度30℃、发酵时间24 h、大豆糖蜜溶液浓度10%、pH 5.0、酵母用量7%;在此条件下,染料木苷含量提高率最大,为81.0%。

异黄酮配合物法纯化染料木苷的研究

介绍了纯化大豆异黄酮中染料木苷的一种方法。用水溶性有机溶剂提取一种含有异黄酮混合物的原料,将氧化钙或氢氧化钙加入提取物中,形成钙-异黄酮配合物,并从提取物中分离出配合物,此时钙-异黄酮配合物沉淀中染料木苷配合物的含量要高于黄豆苷配合物和黄豆黄素苷配合物。上述钙-异黄酮配合物可通过加酸转化成游离苷形式,再次经过提取、浸灰、分离和转化可使染料木苷含量进一步提高。

高效液相色谱法测定千斤拔中染料木苷的含量

建立用高效液相色谱法测定千斤拔中染料木苷含量的方法。千斤拔药材粉碎后，用甲醇浸泡、超声提取、过滤，取滤液进样。色谱仪为岛津LC-2010A，色谱柱为Agilent Extend-RP柱，流动相为乙腈-0．1％磷酸水溶液（19：81）洗脱，流速为1．0mL／min，紫外检测波长为262nm。结果表明：在范围内，线性关系良好，方法回收率高。本方法快速、简便、准确。

发酵因素对提高染料木苷含量的影响

本研究以大豆浓缩蛋白的副产物"废糖蜜"为原料,使用"安琪白酒王"酵母发酵,消耗废糖蜜中的单双糖来提高染料木苷的含量,并考察废糖蜜溶液浓度、pH值、酵母用量对提高染料木苷含量的影响。结果表明,废糖蜜溶液浓度为10%、pH值为5.0、酵母用量大于5%时染料木苷含量分别为最高,为进一步研究提供理论依据。

水解法提高大豆异黄酮中染料木苷含量的研究

据报道染料木苷(genistein)是12种大豆异黄酮中抗癌效果最好的一种,为了充分利用大豆资源,提高其利用价值,探讨了在脱脂豆粕中用酶水解法提高染料木苷含量的作法,即将以糖苷形式存在的三羟基异黄酮葡萄糖苷(genistin)酶解为以非糖苷形式存在的染料木苷。结果表明,最佳酶水解条件为:pH5.0,50℃,保温1h,同时还表明,酶水解法提高脱脂豆粕中染料木苷含量是提高大豆综合利用价值的有效方法。

染料木苷药理作用的研究进展

染料木苷是大豆异黄酮的有效成分之一,结构上属于植物雌激素。目前,关于染料木苷的药理学活性研究已有较多报道,但对其药理学活性的总结与展望尚显不足。本文综述了其改善女性更年期综合征、抗肿瘤、改善心肌缺血、调节代谢综合征、抗炎和细胞保护等药理活性,以期为染料木苷和其他异黄酮类化合物的研究和应用提供理论依据和借鉴。

HPLC定量分析千斤拔药材中染料木苷和染料木素的含量

目的:建立千斤拔药材的质量控制方法。方法:采用高效液相色谱法测定其中的染料木苷和染料木素的含量;色谱柱为Kromasil 100-5 C18(250 mm×4.6 mm,5μm),梯度洗脱,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,流速为1 m L·min-1,检测波长为260 nm。结果:染料木苷和染料木素分别在质量浓度17.483~279.720μg·m L-1和4.088~65.406μg·m L-1与峰面积线性关系良好。平均回收率,染料木苷为104.27%,RSD为2.61%(n=9);染料木素为97.16%,RSD为5.54%(n=9)。不同产地千斤拔药材中染料木苷和染料木素的含量有明显差异。结论:建立的含量测定方法操作简便、分离效果好、准确,能满足千斤拔药材中染料木苷和染料木素含量的准确测定,为千斤拔药材的质量评价以及合理开发利用提供了科学依据。