口腔黏膜微核细胞数与上皮异常增生病损癌变的关系

目的:探讨微核细胞计数与上皮异常增生病损(oral epithelial dysplasia,OED)癌变的关系。方法:收集30例健康对照者口腔黏膜、46例口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)病损、78例口腔黏膜白斑(oral leukoplakia,OLK)伴上皮单纯增生病损、30例OLK伴轻度OED病损、29例OLK伴中度OED病损、15例OLK伴重度OED病损和22例口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)病损的口腔脱落细胞进行Feulgen及fast green染色,计数微核细胞数。结果:微核细胞率依OSCC、OLK伴重度OED、OLK伴中度OED、OLK伴轻度OED、OLK上皮单纯增生、OLP、健康对照者口腔黏膜的顺序逐渐降低(P<0.001)。结论:口腔黏膜微核细胞计数可反映口腔上皮癌变的进程,可作为患者定期随访的监测指标。

180例男性不育患者Y染色体微缺失的检测分析

目的 探讨深圳地区男性不育患者Y染色体微缺失的特点,为临床进行男性不育的诊断及治疗提供理论依据.方法 选取2015年1月-2016年1月来我院就诊的180例无精或者严重少精的患者,采用两管多重PCR扩增,4个通道（FAM/VIC/ROX/Cv5）荧光定量检测的方法,判断AZFa、AZFb、AZFc 3个区域,6个序列标签位点的微缺失.结果 180例无精或者严重少精的患者中,18例为AZFc缺失,检出j率为10.0％,2例为AZFb＋c缺失,检出率为1.1％,两组检出率差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 在深圳地区AZFc缺失发生率最高.

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者外周血淋巴细胞的DNA损伤及意义

目的探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea hypopnea syndrome,OSAHS)患者外周血淋巴细胞DNA损伤及意义。方法选择在兰州大学第一附属医院就诊,经睡眠监测(PSG)确诊的30例男性OSAHS患者和22例男性健康志愿者,并用Epworth嗜睡量表(ESS)进行评估。用胞质阻滞法(cytokinesis blocked micronucleus,CBMN)检测外周血淋巴细胞DNA损伤情况。结果OSAHS组外周血微核发生频率(以下简称微核率)显著高于对照组,(38.60±11.85)‰vs(12.40±5.47)‰(P<0.01),且OSAHS组的微核率在轻、中、重各组间差异有统计学意义,(28.46±8.42)‰vs(38.01±10.46)‰vs(42.43±11.72)‰(P<0.05)。OSAHS组的微核率与睡眠呼吸低能气指数、夜间最低血氧饱和度、夜间平均血氧饱和度均有相关性(rs=0.517,P<0.01;rs=-0.549,P<0.01;rs=-0.370,P<0.05)。而OSAHS组染色体桥的发生频率也高于对照组,(7.65±6.30)‰vs(3.93±2.23)‰(P<0.05)。结论OSAHS患者外周血淋巴细胞存在较高的DNA损伤现象,这种损伤可能与间断性缺氧引起的氧化应激相关,并且可能进一步参与了心脑血管等靶器官损害的发病机制。

哮喘患者外周血淋巴细胞DNA的损伤及意义

目的探讨哮喘患者外周血淋巴细胞DNA的损伤及意义。方法选取32例哮喘患者和30例健康对照者,其中哮喘急性发作期15例,缓解期17例,采用胞质分裂阻断微核(CBMN)法观察外周血淋巴细胞的DNA损伤。结果哮喘患者组的微核率、核芽率、染色体桥率分别为(26.34±6.79)‰、(2.99±1.66)‰、(7.68±5.26)‰;健康对照组的微核率、核芽率、染色体桥率分别为(13.16±3.81)‰、(1.72±0.64)‰、(4.59±2.22)‰;微核率、核芽率、染色体桥率两组比较差异有统计学意义(P<0.01或<0.05)。哮喘急性发作期和缓解期患者微核率比较差异无统计学意义(P>0.05)。哮喘患者微核率与病程有相关性(rs=0.424,P<0.05)。结论哮喘患者外周血淋巴细胞存在DNA的损伤,可能与哮喘的气道慢性炎症及氧化应激相关。

深圳市2015-2020年放射工作人员上岗前职业健康检查染色体畸变率与微核率分析

目的分析深圳市2015—2020年放射工作人员上岗前职业健康检查染色体畸变率与微核率的水平及其分布特征,为加强放射工作人员辐射防护和职业健康管理提供科学依据。方法选取2015—2020年在深圳市职业病防治院接受上岗前职业健康检查的2777名放射工作人员开展横断面研究,其中男性2210名、女性567名,年龄17~69(27.6±6.8)岁,将受检者按年龄分为5组:17~20岁、21~30岁、31~40岁、41~50岁、51~69岁。采用全血微量培养法制备受检者的淋巴细胞微核和染色体,应用全自动染色体扫描分析系统对每名受检者的100个淋巴细胞染色体中期分裂相进行分析,统计双着丝粒体、着丝粒环和无着丝粒体等染色体畸变类型,比较不同年龄组以及同年龄组不同性别受检者染色体畸变情况和微核情况的差异。计量资料的组间比较采用方差分析;染色体畸变和微核的分布服从泊松分布,采用非参数检验,2组间比较采用Mann-Whitney U检验,多组间比较采用Kruskal-Wallis秩和检验。受检者年龄与染色体畸变率、微核率的相关性分析采用Spearman秩相关分析。结果2777名受检者的染色体畸变(双着丝粒体+着丝粒环+无着丝粒体)率为(0.072±0.005)%、双着丝粒体+着丝粒环畸变率为(0.016±0.002)%、染色体畸变细胞率为(0.068±0.005)%、微核率为(0.43±0.01)‰、微核细胞率为(0.40±0.01)‰、淋巴细胞转化率为(85.07±3.16)%。各年龄组间染色体畸变率、双着丝粒体+着丝粒环畸变率、染色体畸变细胞率以及各年龄组不同性别受检者的染色体畸变率、染色体畸变细胞率间的差异均无统计学意义(χ^(2)=1.193、0.931、0.691,Z=−0.929~−0.059,均P>0.05)。与17~20岁年龄组相比,其余各年龄组受检者的微核率、微核细胞率均较高,淋巴细胞转化率均较低,且差异均有统计学意义(Z=−6.981~−2.510,F=4.922~52.860,均P<0.05);受检者的微核率和微核细胞率均与年龄呈正相关(r=0.166、0.168,均P<0.001),而淋巴细胞转化率与年龄呈负相关(r=−0.197,P<0.001);21~30岁年龄组、31~40岁年龄组女性受检者的微核率、微核细胞率以及17~20岁年龄组、21~30岁年龄组女性受检者的淋巴细胞转化率均显著高于同年龄组的男性受检者,且差异均有统计学意义(Z=−4.826~−3.516,F=6.947、14.563,均P<0.01)。结论深圳市2015—2020年放射工作人员上岗前职业健康检查染色体畸变率与微核率均未超过国内文献报道的健康人群的本底水平范围,但有随年龄增大而升高的趋势,需加强放射工作人员的辐射防护与职业健康管理。

应用基因重组细胞模型研究苯并[a]芘的细胞毒性和遗传损伤效应

目的利用经基因重组构建的具有细胞色素P4501A1（CYP1A1）代谢活性的人支气管上皮细胞（16HBE）为体外模型，研究苯并[a]芘[B（a）P]的细胞毒性和遗传效应改变。方法应用实时定量PCR方法检测细胞的CYP1A1和微粒体环氧化物水解酶（mEH）的mRNA水平。细胞分0、1、5、10、20μmol／LB（a）P处理组，应用胞质分裂阻滞微核细胞组学技术综合评价B（a）P的有害生物效应，其中核分裂指数、细胞凋亡率和细胞坏死率等指标评价B（a）P的细胞毒性，微核、核质桥和核芽的发生率检测B（a）P的遗传损伤效应。结果CYP1A1和mEtI在16tlBE—CYP1A1细胞中有较高表达，mRNA相对含量分别是7．8×10^-4和0．030。B（a）P作用后，16HBE—CYP1A1细胞1、5、10、20μmol／L处理组核分裂指数分别为1．92±0．04，1．71±0．0l，1．61±0．04，1．41±0．01，低于对照组（2．08±0．03）；双核细胞率分别为（76．33±3．51）％、（66．33±0．58）％、（51．67±1．53）％、（39．00±1．00）％，低于对照组的（82．67±6．66）％；细胞坏死率分别为（1．93±0．42）％、（2．20±0．53）％、（8．07±0．90）％、（15．27±2．80）％，高于对照组的（0．47±0．11）％，差异均有统计学意义（F值分别为、899．94、303．33、240．87，P值均〈0．01）。而凋亡细胞随着B（a）P作用剂量的增加出现先增高后降低的趋势，分别为（1．20±0．53）％、（2．00±0．20）％、（1．47±0．12）％、（1．20±0．00）％、（1．20±0．00）％。遗传损伤效应分析中发现，随B（a）P作用浓度的增加，核质桥发生率随之增加，分别为（4．67±2．89）‰、（7．33±1．53）‰、（10．67±2．08）‰、（11．00±1．00）‰；核芽发生率也随之增加，分别为（2．334-0．58）‰、（4．00±1．00）％。、（5．00±1．00）‰、（7．67±1．16）‰，均有剂量-效应关系（F值分别为50．23、121．09，P值均〈0．01）。在B（a）P低于10μmol／L组中，微核率也随B（a）P作用浓度的增加而升高，分别为（8．33±3．21）％o、（14．67±1．15）‰，但在20μmol／L组，微核率为（16．67±2．88）‰，低于10μmol／L处理组[（17．67±2．08）‰]。在空载质粒细胞16HBEV中，细胞毒性出现较晚，在5、lO、20p^mol／L组中，微核、核质桥和核芽的发生率[分别为（6．37±2．08）‰、（9．33±1．52）‰、（9．33±3．21）‰；（4．33±1．53）‰、（6．00±2．65）‰、（5．33±1．53）‰；（2．33±0．58）‰、（3．33±1．16）‰、（3．67±1．16）‰]没有明显的组间改变。结论B（a）P代谢活化后可导致遗传损伤效应增加，这可能与细胞的核分裂指数降低、细胞坏死率增加或细胞凋亡受抑制有关。