性染色体丢失的生物医学意义

在一个体细胞中，男性丢失Y染色体或者女性丢失1条X染色体，这种现象称之为性染色体丢失（SCL ）。男性的 SCL又称为Y染色体丢失（LOY ）。SCL现象最初发现于肿瘤患者的瘤细胞，之后证实也可出现在相对健康个体的细胞。Gut‐tenbach等［1］通过荧光原位杂交（FiSH）技术检测了来自90例女性和138例男性的1000个外周血淋巴细胞间期细胞核，发现一般人群的SCL具有4个特点：后天性、嵌合性、随年龄增加性和性别差异性。后天性指丢失一条性染色体是在出生后发生的、而非先天性组成型的改变；嵌合性指仅在机体的一部分细胞内发生；随年龄增加性指 SCL细胞占全部受检细胞的百分率随年龄增加而升高；性别差异性是指与男性相比，女性SCL的基础水平偏高且随年龄升高的幅度较大。男性在15岁SCL率仅0．05％，而女性0～5岁 SCL 率已达1．58％；男性SCL率76～80岁可至1．34％，而女性在11～15岁即可升至2．5％，51～91岁则进一步由3．2％增加到5．1％。值得一提的是，正常人的常染色体也可有丢失现象，但是其发生率极低而且不随年龄而改变。那么，SCL的独特规律是否意味着其具有某种生物医学意义呢？这一问题正引起学者们越来越大的兴趣，作者将在下文中对相关文献进行综述。

t(8;21)(q22;q22)伴Y染色体丢失急性髓系白血病临床分析

本研究旨在探讨t(8;21)(q22;q22)伴Y染色体丢失急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)临床特征。回顾性分析我院2010年1月至2013年6月收治AML患者267例,其中13例为t(8;21)(q22;q22)伴Y染色体丢失,对13例患者临床指标、治疗方案、疗效及预后进行回顾性分析。结果表明,在13例患者经过规范化疗后,4例1个疗程获缓解,4例2个疗程获缓解,4例3个疗程获缓解,1例4个疗程仍未获缓解。缓解后在巩固强化治疗过程中未复发有6例,其中4例采用化疗联合移植方案,另外2例采用单纯化疗;其余6例分别为4例复发1次、1例复发2次、1例复发3次,并且2例是化疗联合自体移植后复发,复发后继续给予异基因造血干细胞移植,目前处在无病状态。在随访期间,化疗组无复发生存(RFS)时间为4.67±3.45个月,化疗联合移植组RFS时间为34.17±21.37个月,显示采用化疗联合移植方案可以显著延长RFS(P<0.05)。结论:2013年NCCN指南将伴t(8;21)(q22;q22)定义为预后良好型,目前未明确指出此型伴Y染色体丢失预后差,难缓解,易复发,但是近几年临床治疗过程中发现t(8;21)(q22;q22)伴Y染色体丢失预后差,难缓解,易复发,建议对此类患者行造血干细胞移植以改善预后。

阿托伐他汀对人CD4+T淋巴细胞张力蛋白同源第10染色体丢失的磷酸酶基因表达的影响

目的研究阿托伐他汀在体外对人CD4+T淋巴细胞张力蛋白同源第10染色体丢失的磷酸酶基因(PTEN)表达的影响。方法取25例健康志愿者的新鲜外周血,免疫磁珠分选出CD4+T淋巴细胞,随机分为空白组、植物血凝素(PHA)刺激组、PHA+1μmol/L阿托伐他汀组、PHA+5μmol/L阿托伐他汀组,PHA+10μmol/L阿托伐他汀组,体外培养48 h后收集各组细胞及培养基上清液,荧光定量PCR检测PTEN mRNA表达水平,Western blot检测PTEN蛋白表达,ELISA检测培养基上清液肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)及白细胞介素10(IL-10)浓度。结果与空白组比较,PHA刺激后,CD4+T淋巴细胞PTEN mRNA、蛋白的表达及上清液TNF-α、IL-6浓度均升高(P<0.05),而IL-10浓度升高无统计学差异(P>0.05)。与PHA刺激组比较,PHA+5μmol/L阿托伐他汀组、PHA+10μmol/L阿托伐他汀组CD4+T淋巴细胞PTEN mRNA、蛋白的表达和上清液IL-10浓度增加(P<0.05),而PHA+1μmol/L阿托伐他汀组具有增高趋势(P>0.05),并随着阿托伐他汀药物浓度的增加而增加;各组上清液TNF-α、IL-6浓度降低,PHA+5μmol/L阿托伐他汀组、PHA+10μmol/L阿托伐他汀组具有统计学差异(P<0.05)。直线相关性分析显示,TNF-α、IL-6的分泌水平与PTEN的表达量呈明显的负相关关系(r=-0.837和r=-0.816,P<0.01),IL-10的分泌水平与PTEN的表达量呈明显的正相关关系(r=0.753,P<0.05)。结论阿托伐他汀能够通过调控人CD4+T淋巴细胞PTEN表达发挥抗炎作用。

脓毒症中第10染色体丢失的磷酸酶基因在内皮细胞中表达的研究

目的研究在脓毒症中第10染色体丢失的磷酸酶基因(PTEN)在内皮细胞中的表达情况。方法 20只雄性SD大鼠随机分为2组,盲肠结扎穿孔组(CLP组)和对照组;48 h后取血液和肺组织样本。用血浆作用于体外培养的脐静脉内皮细胞(HUVEC),并应用免疫组织化学方法检测PTEN的表达状况;用West-ern-blot的方法检测脐静脉内皮细胞中PTEN蛋白的表达。结果在CLP组脐静脉内皮细胞中PTEN的表达明显增高;CLP组PTEN的表达为(0.513±0.02),对照组PTEN的表达为(0.162±0.025)。CLP组与对照组相比差异有显著性(P<0.01)。结论脓毒症中PTEN基因在HUVEC中表达增高,提示PTEN在脓毒症内皮细胞损伤中发挥了一定的作用。

Y染色体丢失与其它染色体畸变在急性髓性白血病中的意义

为了研究Y染色体丢失与染色体畸变在急性髓性白血病中的临床意义,采用了细胞遗传学方法及Y染色体荧光原位杂交技术对29例骨髓和血液标本进行了检测,并观察了两种方法所得结果与诊断、疾病进展和预后的关系。结果发现:①细胞遗传学方法检测染色体异常率为83％;②原位杂交技术检测Y染色体的丢失比细胞遗传学方法更敏感;③染色体畸变及Y染色体丢失对疾病诊断、病情进展及预后有价值;④两种方法均显示:处于非缓解期的患者Y染色体丢失率高,反之则低。以上结果为指导急性髓性白血病的治疗提供了有用的信息。

用微核测试法检测染色体丢失的进展

微核测试法是人们广泛使用的细胞遗传学方法之一,目前越来越多的学者正把微核技术同其它现代技术相结合开辟其又一新的应用领域,即检测染色体丢失。这一应用在基础和临床医学研究上具有广泛的实用价值,目前国外已在这方面做了大量工作,国内还未见报道。本文在此对各种检测方法及进展情况作一概括总结。

卵巢上皮性癌组织中与张力蛋白同源的第10染色体丢失的磷酸酶基因的表达及意义

目的探讨与张力蛋白同源的第10染色体丢失的磷酸酶基因（PTEN）在卵巢上皮性癌组织中的表达，分析其与临床病理参数间的关系，并分析其与卵巢上皮性癌患者预后的关系。方法应用免疫组织化学方法，检测10例正常卵巢组织（正常卵巢组），20例卵巢良性上皮性肿瘤（良性肿瘤组），60例卵巢上皮性癌组织（卵巢上皮癌组）中VrEN的表达。结果PTEN在卵巢正常组、良性肿瘤组中的阳性表达率分别为100％（10／10）、80％（16／20），显著高于卵巢上皮癌组的53．3％（32／60）（X2值分别为7．778、4．444，P均〈0．05）；而良性肿瘤组和正常卵巢组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。PTEN蛋白表达与卵巢癌的临床分期、组织学分级、有无淋巴结转移和远处转移有关（X2值分别为4．339、6．465、3．896、10．452，P〈0．01或P〈0．05），而与年龄、病理类型、有无腹水无关（X2值分别为0．004、0．388、1．057，P均〉0．05）。结论PTEN表达缺失与卵巢上皮性癌的发生、发展关系密切，对临床诊断、治疗及预后评价具有重要意义。

伴有性染色体丢失的t(8;2)急性髓系白血病实验室检测资料分析

目的探讨12例伴有性染色体丢失的t(8;21)急性髓系白血病患者的临床和生物学特征。方法结合临床、形态学,采用RHG显带、一组单抗、逆转录-聚合酶链反应等方法对其染色体、免疫分型和分子生物学等进行分析。结果本组病例大多有下述形态学改变:白血病细胞有核凹陷、近核浅染区、胞浆嗜碱性、伴有成熟分化和核浆发育不平衡等;有CD13、CD33表达抗原;经逆转录-聚合酶链反应检测均检出AML1-ETO融合基因转录本。结论性染色体丢失是t(8;21)急性髓系白血病最常见的附加异常,主要和急性粒细胞白血病有关,具有独特的形态学、免疫学和临床特征。

张力蛋白同源第10染色体丢失的磷酸酶基因在胰腺癌中的表达及其与P27蛋白的关系

近年来新发现的张力蛋白同源第10染色体丢失的磷酸酶基因（PTEN）是第一个具有脂质磷酸酶活性的抑癌基因，其表达产物负性调控细胞周期及多种信号途径，抑制细胞粘附迁移，诱导细胞分化及凋亡等多种生理活动。P27是多功能细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子，负性调控细胞周期，是已知重要抑癌基因之一。我们应用免疫组化法研究82例胰腺癌患者肿瘤组织中PTEN及P27蛋白表达水平及相关性，分析其与胰腺癌进展及在临床评估中的意义。

第10号染色体丢失性磷酸酶及张力蛋白同源基因调控的酪氨酸蛋白激酶2/信号传导与转录因子3信号通路对糖尿病心肌缺血后处理敏感性的作用

目的 评价第10号染色体丢失性磷酸酶及张力蛋白同源基因（PTEN）调控的酪氨酸蛋白激酶2/信号传导与转录因子3（JAK2/STAT3）信号通路在糖尿病心肌对缺血后处理敏感性中的作用.方法 健康雄性SD大鼠,体重220～ 280 g,采用1％链脲佐菌素-柠檬酸盐缓冲液60 mg/kg腹腔注射法制备1型糖尿病模型.8周后取成模糖尿病大鼠60只,采用随机数字表法分为5组（每组12只）：假手术组（S组）、缺血再灌注组（I/R组）、缺血后处理组（IPO组）、PrEN抑制剂BpV＋缺血再灌注组（BpV＋I/R组）、BpV＋缺血后处理组（BpV＋IPO组）.I/R组采用结扎左冠状动脉前降支30 min,再灌注120 min的方法建立模型;IPO组于再灌注前行3个循环的再灌注10 s/缺血10 s;S组只穿线不结扎血管;BpV于缺血前lh静脉注射1 mg/kg,对照组注射等量生理盐水.各组于再灌注120 min时处死大鼠,测定血清肌酸激酶同工酶（CK-MB）的水平,心肌梗死面积（IS）和细胞凋亡指数（AI）,PTEN活性及其蛋白表达,磷酸化JAK2（p-JAK2）、磷酸化STAT3（p-STAT3）以及凋亡相关蛋白活化的半胱酰天冬氨酸特异性蛋白酶3（cleaved caspase-3）的表达水平.多组间数据比较采用单因素方差分析,两组间比较采用t检验.结果 与S组比较,I/R组和IPO组血清CK-MB水平及PTEN活性升高,PTEN和cleaved caspase-3表达上调（t=2.997～ 7.702,均P＜0.05）;与IPO组比较,BpV＋IPO组血清CK-MB水平、IS和AI及PTEN活性降低,p-JAK2和p-STAT3的表达上调,cleaved caspase-3的表达下调[分别为3 003±613比1 247± 440、42％±8％比53％±6％、21％±3％比33％±6％、（584±78）比（918±136） pmol、1.73±0.29比1.06±0.24、1.75±0.19比1.01±0.16、1.6±0.4比2.2±0.5,t=2.837～9.249,均P＜0.05].I/R组与IPO组,BpV＋I/R组与I/R组比较上述指标差异无统计学意义.结论 PTEN抑制可通过激活JAK2/STAT3信号通路从而恢复缺血后处理对糖尿病再灌注损伤心肌的保护作用。

电针对局灶性脑缺血大鼠10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白和神经生长相关蛋白-43表达的影响

目的探讨电针对胡须体觉皮层局灶性脑缺血大鼠10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白(PTEN)和神经生长相关蛋白43(GAP-43)表达的影响。方法 24只成年健康雄性Sprague-Dawley大鼠分为假手术组(n=8)、模型组(n=8)及电针组(n=8)。于造模成功后第3天,电针组予电针百会(DU20)和风府(DU16)30 min,每天1次。造模前1 d,给药后3 d、7 d和14 d,应用角落测试进行行为学检测;给药后14 d采用Western blotting检测梗死周边区PTEN、GAP-43蛋白的表达。结果电针组向右转的次数较模型组显著下降(P<0.001)。模型组GAP-43表达较假手术组升高(P<0.05),电针组较模型组升高(P<0.05)。模型组PTEN表达与假手术组无显著性差异(P=0.460),电针组较模型组显著降低(P<0.001)。结论电针可能通过抑制PTEN和增加GAP-43的表达促进脑缺血后神经再生和功能恢复。

胶质母细胞瘤1号染色体杂合性丢失的初步研究

目的 寻找胶质母细胞瘤 (GBM) 1号染色体上可能存在肿瘤抑制基因的杂合性丢失 (LOH)区域 ,为发现和定位肿瘤抑制基因提供线索和依据。方法 应用聚合酶链反应 (PCR)方法 ,采用荧光标记的引物和 377型DNA自动序列分析仪 ,分析了 2 1例GBM 1号染色体上 31个微卫星多态性标记的LOH。结果 在 5 2 % (11/ 2 1例 )GBM的 1号染色体上观察到了LOH ,在 2 0 % (94/ 46 3)可提供信息位点存在LOH。其中 1p的LOH率高于1q ,1p和 1q的LOH率分别为 43 % (9/ 2 1)、33% (7/ 2 1)。 1p上各微卫星位点的LOH率均小于 30 %。在 1q的下列位点上检测到了较高LOH率 :1q2 4- 1q2 5上的D1s2 18(31.6 % )、1q32 .3 - 1q43上的D1s2 785 (31.6 % ) -D1s2 842 (37.5 % )。结论 染色体 1p在GBM的分子发病机制中并不重要 ,而染色体 1q上遗传物质的分子遗传学变化可能在GBM的发生发展中起着重要作用 ,染色体 1q2 4- 1q2 5上的D1s2 18和 1q32 .3 - 1q43上的D1s2 785 -D1s2

α粒子诱发BEP2D细胞转化过程中染色体数目的变化

目的 :人支气管上皮细胞BEP2D在受到 1 5Gy2 38 Puα粒子单次照射诱发转化 ,观察染色体数目的变化。方法 :常规的中期染色体计数方法。结果 :在细胞转化过程中 ,细胞染色体数目不稳定 ,有向非整倍体发展的趋势 ,而且主要涉及C组和D组染色体的丢失。结论 :可能是α粒子照射后细胞转化的早期事件 ,在转化的启动和促进中发挥重要作用。

偏凸-柱穗山羊草双二倍体SDAU18 PMC MI染色体数目异常

为探讨偏凸-柱穗山羊草双二倍体SDAU18减数第一分裂中期(PMCMI)染色体丢失特点,利用改良卡宝品红压片法,对SDAU18及其双亲的PMCMI染色体构型进行观察。结果表明:在SDAU18的同一枚花药中,部分PMCsMI出现了不同程度的染色体丢失现象,发生染色体丢失的PMCMI频率平均为4.64%,染色体数目异常的PMCsMI的平均染色体构型为:2n=12.77I+5.26IIR+1.57IIO+0.02III=26.49。其双亲的PMCMI的染色体数目均表现正常,均由14个二价体组成。SDAU18PMCSMI染色体数目变异的特点比较罕见。

细胞异常分裂与染色体病

本文简单介绍了细胞异常分裂类型与染色体病的关系及影响细胞分裂的因素和预防措施。

急性粒单细胞白血病和急性单核细胞白血病骨髓染色体研究

对23例成人急性粒单细胞白血病(M_4)和急性单核细胞白血病(M_5)骨髓染色体核型进行了观察,发现7例有克隆性异常,3例 M_4表现为7号染色体丢失或缺失,其中1例伴有异常嗜酸细胞增多者有特异性16号臂间倒位。4例 M_5有复杂的多个克隆性异常。

油菜染色体组的稳定性

油菜基因组是一个天然的双二倍体(2n=38),其染色体由A(n=10)和C(n=9)染色体组组成。用油菜的人工四倍体获得的二倍体、三倍体和四倍体进行相互杂交,获得了具有各种不同染色体数的非整倍体,即2n=76,67,58,52和46条染色体,这五种植物和它们的后代已被细胞学所证实。在每一种后代中,染色体的平均数均低于其亲本的染色体数。另外,亚二倍体即2n=29,31和32条染色体的后代比其亲本的染色体数目多。由此得出,每一种非整倍体,不论其染色体数低于或高于二倍体,均倾向于恢复原始的二倍体。这显示了油菜双二倍体状态具有很强的稳定性。

miR-21低表达对垂体瘤细胞系RC-4BC增殖、凋亡的影响及与PTEN靶向关系

目的观察微小RNA-21(miR-21)低表达对垂体瘤细胞系RC-4BC增殖、凋亡的影响,并分析其与第10号染色体丢失的张力蛋白同源磷酸酶基因(PTEN)的靶向关系。方法取对数生长期的RC-4BC细胞分为两组,沉默组转染miR-21抑制物miR-21 inhibitor,阴性对照组转染抑制物阴性对照NC-inhibitor,采用RT-PCR法检测miR-21、第10号染色体丢失的张力蛋白同源磷酸酶基因(PTEN)mRNA,采用CCK8实验观察两组细胞增殖能力(以OD值表示),采用平板克隆实验观察两组细胞集落形成能力(以集落形成数表示),采用流式细胞术观察两组细胞凋亡率并观察细胞周期分布情况。收集RC-4BC细胞制备单细胞悬液,分别将miR-21 mimics或NC-mimics与PTEN-WT或PTEN-MUT共转染至RC-4BC细胞,转染后细胞标记为miR-21 mimics+PTEN-WT组、NC-mimics+PTEN-WT组、miR-21 mimics+PTEN-MUT组、NC-mimics+PTEN-MUT组,采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-21与PTEN的靶向关系。结果沉默组RC-4BC细胞中miR-21、PTEN mRNA相对表达量分别为0.30±0.08、2.89±0.14,阴性对照组RC-4BC细胞中miR-21、PTEN mRNA相对表达量分别为1.01±0.02、0.99±0.03,两组相比,P均<0.05。沉默组RC-4BC细胞24 h、48 h、72 h时OD值均低于阴性对照组(P均<0.05)。沉默组RC-4BC细胞集落形成数低于阴性对照组(P<0.05)。沉默组RC-4BC细胞凋亡率高于阴性对照组(P<0.05)。沉默组RC-4BC细胞G0/G1期占比65.65%±7.82%、S期占比19.25%±3.70%,阴性对照组RC-4BC细胞G0/G1期占比45.62%±5.03%、S期占比35.72%±4.67%,两组相比,P均<0.05。miR-21 mimics+PTEN-WT组、NC-mimics+PTEN-WT组、miR-21 mimics+PTEN-MUT组、NC-mimics+PTEN-MUT组细胞的相对荧光素酶活性分别为0.39±0.07、1.02±0.03、1.01±0.04、1.00±0.03,其中miR-21 mimics+PTEN-WT组相对荧光素酶活性与其他各组相比,P均<0.05。结论沉默miR-21能够移至垂体瘤细胞系RC-4BC的增殖、促进其凋亡,其机制可能与靶向调控PTEN基因有关。

急性脑梗死患者血清CXCL1、PTEN mRNA水平与病情严重程度及预后的关系

目的探讨急性脑梗死患者血清CXC趋化因子配体1(CXCL1)、第10染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(PTEN)mRNA水平与病情严重程度及预后的关系。方法将2022年3月至2023年3月该院收治的102例急性脑梗死患者纳入研究作为试验组,另选取同期于该院进行体检的85例健康者作为对照组。收集纳入研究者的空腹静脉血血清标本。采用酶联免疫吸附法检测血清CXCL1水平。采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测血清PTEN mRNA相对表达水平(下称水平)。根据美国国立卫生研究院脑卒中量表(NIHSS)评分将试验组患者分神经功能缺损程度不同的3组(重症组、中度组、轻度组),比较3组血清CXCL1、PTEN mRNA水平。根据计算机断层扫描(CT)或磁共振成像(MRI)评估脑梗死体积,将试验组患者分为小型梗死组、中型梗死组和大型梗死组,比较3组血清CXCL1、PTEN mRNA水平。根据改良Rankin量表(mRS)将试验组患者分为预后良好组和预后不良组,比较2组患者血清CXCL1、PTEN mRNA水平。采用Pearson相关分析急性脑梗死患者血清CXCL1、PTEN mRNA水平的相关性。采用多因素Logistics回归分析影响急性脑梗死患者预后的因素。结果试验组有糖尿病史、高血压史者占比及血清CXCL1、PTEN mRNA水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。随着神经功能缺损程度的增加,血清CXCL1水平、PTEN mRNA水平均增加,重症组、中度组、轻度组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。随着梗死面积增加,血清中CXCL1、PTEN mRNA水平均增加,小型梗死组、中型梗死组和大型梗死组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。预后不良组有糖尿病史者占比、有高血压史者占比及血清CXCL1、PTEN mRNA水平均高于预后良好组(P<0.05)。急性脑梗死患者血清CXCL1水平和PTEN mRNA水平呈正相关(r=0.479,P<0.001)。血清CXCL1、PTEN mRNA水平及糖尿病史、高血压史均为急性脑梗死患者预后的影响因素(P<0.05)。结论急性脑梗死患者血清CXCL1、PTEN mRNA水平升高,可用于评估患者病情程度和预后。