水稻第六染色体长臂亚端粒区遗传图与物理图的整合

生物染色体亚端粒区域在物种进化过程中是高度活跃的。为了认识水稻染色体亚端粒区域的组织结构，用水稻第六染色体长臂亚端粒区的 ＲＦＬＰ标记 Ｇ３４２和 Ｒ１１６７作探针筛选ＢＡＣ文库，以得到的阳性ＢＡＣ克隆为起点进行染色体步行，构建了覆盖这２个分子标记区域约５００ｋｂ的ＢＡＣ跨叠克隆群，将这一区域的遗传图和物理图进行了整合。对１４个ＢＡＣ克隆插入末端进行了亚克隆，鉴定的７个亚克隆末端为单拷贝或低拷贝序列，其中５个定位于Ｇ３４２和Ｒ１１６７的侧翼区域。用覆盖这一区域的ＢＡＣ插入片段作探针对ｃＤＮＡ文库进行初步筛选，获得４个不同的阳性ｃＤＮＡ克隆。

应用多重连接探针扩增筛查高风险胎儿染色体亚端粒区变异

目的探讨多重连接探针扩增（multiplex ligation—dependent probe amplification，MLPA）技术在产前大规模筛查染色体亚端粒区变异中的应用。方法选取1050例高风险胎儿，抽取羊水或脐带血，进行核型分析和MLPA检测。染色体亚端粒区变异结果用染色体微阵列验证。结果核型分析发现染色体非整倍体23例，末端异常8例。MLPA检出了所有核型分析发现的染色体非整倍体和末端异常，并对4例染色体末端异常提供了更清晰的描述。此外，MLPA发现5例核型分析为正常的样本存在染色体亚端粒区变异，经微阵列验证2例为假阳性结果，假阳性率为0．19％。MLPA实际检出染色体亚端粒区变异11例，检出率为1．05％。结论将MLPA技术应用于大规模筛查高风险胎儿的染色体异常，可以缩短检测周期，发现亚微观染色体变异，为遗传咨询和产前诊断提供依据。