玉米(ZeamaysL.)cdc2和prh1基因的染色体原位杂交物理定位

首次报道了玉米两个低拷贝基因ｃｄｃ２和ｐｒｈ１生物素标记的染色体原位杂交结果。供试探针为这两个基因的ｃＤＮＡ克隆ｃｄｃ２ＺｍＡ和ＺｍＰＰ１，其长度分别为１．３ｋｂ和１．７ｋｂ。结果表明，ｃｄｃ２ＺｍＡ的信号分布在第４、８和９染色体长臂，与着丝粒的百分距离分别为５７．８７±２．６８、２８．４２±１．４５和８８．１６±３．２８，检出率为１０．０７％．３．１３％和８．３３％。ｐｒｈ１ＺｍＰＰ１的信号分布在第４、６和８染色体长臂，与着丝粒的百分距离分别为５３．６２±１．１７．６０．７７±２．９０和１７．１０±１．６１，检出率为１２．０７％．５．１７％和６．４７％。对非放射性原位杂交技术以及基因ｃｄｃ２和ｐｒｈ１的物理位置与功能间的关系作了讨论。

染色体原位杂交技术与植物体细胞杂种遗传鉴定

染色体原位杂交技术近年发展较快,已广泛应用于植物遗传育种实践。在植物体细胞杂种遗传鉴定方面,染色体原位杂交技术也日益显示出其优势,可用于倍性变异的来源检测,非对称杂种的非对称程度确认,融合双亲的基因组互作、染色体行为分析,以及融合双亲染色体在体细胞杂种有性过程中的传递等。还探讨了染色体原位杂交技术在柑桔远缘体细胞杂种遗传鉴定中的应用前景。

染色体原位杂交技术在植物亲缘关系研究中的应用

该文综述了近年来染色体原位杂交技术 (ISH)在植物亲缘关系研究中的应用 .文中介绍了 3种基于不同探针类型的ISH技术 ,以及该项技术在植物供体基因组的识别、不同供体基因组之间关系和物种形成过程中供体基因组的变化等方面的具体应用 ,文章还指出了ISH在该领域的应用前景和它存在的局限性 .

玉米(Zea mays L.)中凋亡相关基因c-myc同源序列的检出及其染色体原位杂交定位

原癌基因c-myc是普遍存在于动物组织中的一个高度保守的细胞凋亡相关基因,决定着多种动物细胞的凋亡。我们首次以人c-myc的基因组DNA为探针,用生物素标记的原位杂交和酶联级联放大检测系统在玉米中检出了c-myc基因的同源序列,并对其进行了染色体物理定位。在第5染色体长臂近末端、第4染色体长臂近着丝粒及第1染色体短臂近着丝粒处检测到杂交信号,信号与着丝粒的百分距离分别为96.21±4.46、24.11±0.47和10.02±1.04,本结果为寻找和研究植物细胞凋亡基因提供了重要线索。

荧光染色体原位杂交方法建立及在产前诊断中的应用

目的建立并优化荧光染色体原位杂交方法,应用于快速产前诊断21、18、13、X和Y染色体数目异常。方法常规穿刺取羊水或脐带血样本,经低渗、固定、制片、老化等操作过程,直接利用21、18、13、X、Y染色体的特异性探针杂交,荧光显微镜下观察杂交信号,判断羊水或脐带血细胞中21、18、13、X和Y染色体的数目。结果 90%以上的细胞显示相应的荧光信号视为正常男性或女性。136例羊水或脐血,检出21三体5例,18三体2例,性染色体异常(47,XYY)1例,与染色体核型分析结果一致,均在72小时给出报告。结论利用荧光染色体原位杂交方法进行产前诊断,可快速提供准确的结果,具有诊断参考价值。

758例遗传咨询病例的细胞遗传学研究——附2例染色体原位杂交诊断

近年来,我们在临床医学细胞遗传学研究中。坚持科研为临床服务的方向。自1985年5月至1990年5月从遗传咨询病人中选择758例进行了细胞遗传学研究,检出染色体数目及结构异常者66例,占8.7%（不包括Dp+或Gp+病例）,其中发现3种5例世界首报及4种7例国内首报异常染色体核型,并已经中国遗传医学中心湖南医科大学医学细胞遗传学国家培训中心的专家鉴定通过。现报告如下。

~3H标记DNA探针进行染色体原位杂交

近年来,由于重组DNA技术在医学科学上的应用,使遗传病的诊断从表型水平、蛋白质水平及染色体水平跨入核酸水平,从而形成了基因诊断的新领域。染色体原位杂交是一种简便、直接、精确的染色体基因定位方法。我们用~3H标记人Y染色体特异性DNA探针(PY3·4)进行染色体原位杂交。

生物素标记核酸探针染色体原位杂交及其临床应用

采用随机引物法使生物素标记DNA探针PY3·4，对正常男性、女性及两例47，XYY患儿的染色体进行原位杂交，免疫荧光检测系统检测，结果显示PY3·4有高度特异性，可作为Y染色体的标记探针。此方法具有稳定、安全、价廉、特异性强，降低本底等优点，可取代同位素标记的方法用于染色体上基因定位，检出染色体畸变以及癌变机理等研究。

生物素标记DNA探针进行染色体原位杂交

进行基因定位最直按的方法是染色体原位杂交(Chromosomal in situ hybridization)。以前,这种技术都是用氚标记的探针完成,但使用氚有许多不便之处,诸如探针比活性低,常需多种~3H—dNTP共参入才能满足要求等。

染色体原位杂交技术发展现状

染色体原位杂交技术是建立在DNA变性、复性动力学基础上,利用核酸分子的碱基序列配对的互补性,将已知的带有标记的DNA探针与细胞标本的染色体上经变性解链后的单链DNA,通过二者特定碱基序列互补,结合成长性核酸杂交分子,经放射性、非放射性方法在染色体上显示出其位置。1970年Pardue等在细胞学标本上建立了DNA-DNA杂交方法标记着染色体原位杂交方法的产生。

植物染色体原位杂交技术的研究进展

综述了染色体原位杂交技术的原理、方法及其在植物分子细胞遗传学研究上应用的进展 。

Y染色体原位杂交在追踪间充质干细胞上的应用

背景:间充质干细胞移植治疗多发性硬化症是一种被日渐关注的新型治疗手段。然而,间充质干细胞是通过穿越血脑屏障发挥细胞替代作用还是通过免疫抑制发挥治疗作用仍有待进一步验证。目的:建立稳定有效的Y染色体原位杂交方法,观察间充质干细胞在多发性硬化症模型小鼠中的分布。设计、时间及地点:观察性实验,于2007-09/2009-02在健康科学研究所分子免疫学实验室完成。材料:C57BL/6小鼠30只,6～8周龄,体质量15～20g,雌鼠用于建立实验性自身免疫性脑脊髓炎模型。方法:用地高辛标记了针对Y染色体的DNA探针,进行原位杂交验证探针的特异性和敏感性。再将从雄鼠中分离的间充质干细胞移植到雌性实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠体内,进行原位杂交。主要观察指标:光学和荧光显微镜观察间充质干细胞在实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠体内的分布情况。结果:实验确立了探针的Y染色体特异性和敏感性,进一步建立了有效的原位杂交方法。追踪到间充质干细胞在实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠的脊髓内分布极少,而外周免疫器官内有一定数量的分布,表明间充质干细胞可能是通过外周免疫调节发挥治疗作用。结论:在外周脾和淋巴结内有一定数量的间充质干细胞分布,而在中枢神经系统的脊髓内只有极少数的间充质干细胞。

植物染色体原位杂交技术的发展

染色体原位杂交技术是现代生物技术的重要组成部分。它具有直接、准确、便捷等特点,在生物科学研究中发挥着重要的作用。随着分子生物学的进步,染色体原位杂交技术不断改进和完善,新的染色体原位杂交技术不断涌现。本文对染色体原位杂交探针、染色体原位杂交靶DNA类型、染色体原位杂交新技术及应用等方面进行了综述。

染色体原位杂交技术在植物研究中的应用

染色体原位杂交(chromosome in situ hybridization,CISH)是一种新兴的日趋完善的技术。本文从以下几个方面对其在植物研究中的应用进行了综述:(1)外源染色质及远缘杂种的鉴定;(2)多倍体起源、非整倍体的鉴定;(3)植物基因工程及基因表达研究;(4)物种进化及亲缘关系的探讨;(5)植物基因物理图谱的构建等。

染色体原位杂交技术及其应用

染色体原位杂交作为一种直接、快速、有效的基因定位技术最早是由Pardue等于1970年报道的。当时采用小鼠随体DNA为模板,利用氚标记的核苷酸在体外转录合成RNA探针。再用该探针与中期染色体标本进行原位杂交,然后进行放射自显影,显影后用吉姆萨染色,发现银粒大部分集中在染色体上的深染着丝粒区,首次证明小鼠随体DNA主要分布于染色体上的结构异染色质区。

染色体组荧光原位杂交及C-带鉴定小麦中的簇毛麦染色体

通过分子细胞生物学方法，对抗白粉病、高蛋白质含量“小麦×簇毛麦”杂种后代端体附加系进行染色体组荧光原位杂交，以鉴定附加染色体来源．结果表明，附加端体染色体为簇毛麦染色体，染色体C－带分析结果显示，该端体可能为簇毛麦6Vs或7Vs染色体．该端体染色体携有抗白粉病和高蛋白质基因，利用染色体显微操作技术可对这些优良基因进行分离、克隆并加以利用．染色体原位杂交结果还发现，通过“小麦－簇毛麦”易位系6Vs／7AL易位染色体转移操作，已将易位染色体转移到推广小麦品种“川育12”中．此外，还观察到同源染色体在细胞内为相邻排列。

染色体组荧光原位杂交鉴定小麦中的簇毛麦染色体

染色体组荧光原位杂交鉴定小麦中的簇毛麦染色体余懋群１邓光兵１Ｍ．Ｃｅｒｂａｈ２马欣荣１陈静１Ｏ．Ｐａｎａｕｄ２Ｓ．Ｙａｋｏｖｌｅｖ２（１．中国科学院成都生物研究所，成都６１００４１）（２．ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｅＰａｒｉｓＳｕｄ，Ｌａｂｏｒａｔｏｉｒｅ...

染色体原位杂交技术与植物显微技术实验探索

染色体原位杂交技术作为植物分子细胞遗传学研究的重要手段被广泛地应用于基因定位、染色体结构变异、物种的起源、进化和亲缘关系分析,物理图谱的构建,转基因植物的鉴定等多个方面。在植物显微技术实验中,以研究生的科研选题与兴趣为主导选材进行石蜡切片、显微摄影直至获得照片;同时合理安排木材切片、压片技术、花粉在柱头上萌发和花粉管伸长、染色体原位杂交技术等多个其他实验,有的放矢、因人施教能够激发学生自主学习的兴趣,收到良好的教学效果。