染色体微切割、微分离与微克隆技术研究进展

本文详细介绍了染色体微切割、微分离与微克隆技术在动物、人类及植物中的创立与发展，评述了不同染色体微切割、微分离与微克隆方法的优缺点，总结了这项技术在遗传学研究中的应用，提出了利用这项技术在植物分子遗传学研究中的新方向。

染色体微切割、微分离、微克隆技术及其研究进展

自1981年染色体微切割及微克隆技术创建以来 ,该技术已广泛应用于人类及动植物遗传学、医学、进化学等研究领域 ,主要包括构建特定染色体或染色体区域的DNA文库、制备染色体描绘探针池以研究染色体重排和染色体进化等。本文对该技术的产生、发展及某些研究进展作一综述。

植物染色体微分离、微切割与微克隆技术的研究进展

介绍了染色体微分离、微切割与微克隆技术的发展历史;综述了植物染色体微分离、微切割和微克隆技术的研究进展及其应用与展望。

染色体核型分析及染色体显微分离技术研究进展

染色体核型分析是遗传学研究的重要手段,也是物种分类和鉴定的基本依据。染色体显微切割技术是细胞遗传学和分子遗传学相结合的一种技术,应用前景广阔。重点综述了染色体核型分析和单染色体显微切割技术的操作规程。

染色体显微切割与DOP-PCR结合对赤麂Sry基因克隆、测序及初步定位

应用显微切割技术获得赤麂１号、Ｙ１、Ｙ２染色体，通过ＤＯＰ－ＰＣＲ增加模板ＤＮＡ拷贝数，然后用人的性别决定基因（Ｓｅｘ－ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ Ｒｅｇｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ Ｙ， ＳＲＹ）中ＨＭＧ框内设计１对引物，对ＤＯＰ－ＰＣＲ产物进行扩增。在雄性赤麂Ｙ２染色体ＤＯＰ－ＰＣＲ产物中扩增出与人ＳＲＹ基因同源的Ｓｒｙ基因片段，克隆、测序，首次在分子水平上证明赤麂Ｙ２染色体是真正的Ｙ染色体，同时对赤麂Ｓｒｙ基因进行了初步定位。

小冰麦异附加系中携带BYDV抗性基因染色体的微分离及其文库的建立

采用微玻璃针法显微分离了小冰麦异附加系TAI 2 7中附加有中间偃麦草 (天蓝冰草 )的一对染色体 ,这对染色体上携带有抗大麦黄矮病的抗性基因。经过蛋白酶K消化和两轮寡聚核苷酸引物 PCR (degenerateoligonucleotideprimedPCR ,DOP PCR)扩增后 ,用TAI 2 7和中间偃麦草的总DNA为探针的Southern杂交证明PCR产物确是来自这对小染色体。第二轮PCR产物被连接至pGEM Tvector中并转化大肠杆菌 ,获得小染色体DNA文库。初步分析文库共有 2× 10 5个克隆子 ,插入片段长度在 2 50～ 12 0 0bp之间 ,平均 530bp ,其中单、低拷贝序列占 57% ,中、高拷贝序列占 4 3%。

植物染色体显微切割技术的研究现状与展望

植物染色体显微切割技术的研究现状与展望马有志徐琼芳辛志勇（中国农业科学院作物育种栽培研究所，北京１０００８１）ＴｈｅＡｄｖａｎｃｅｓｏｆｔｈｅＴｅｃｈｎｉｑｕｅｏｆＰｌａｎｔＣｈｒｏｍｏｓｏｍｅＭｉｃｒｏｄｉｓｅｃｔｉｏｎＭａＹｏｕｚｈｉＸｕＱｉｏｎ...

植物染色体微切割、微收集及微扩增技术应用

为使染色体微切割、微收集、微扩增技术在植物精细遗传图谱及物理图谱构建中有效应用,利用SLuCUT全自动激光显微切割系统对普通小麦"中国春"和中间燕麦草染色体进行了微切割、微收集和微克隆研究。结果表明,SLuCUT-A全自动激光显微切割系统使植物染色体的微切割、微分离和微收集技术操作简单、快速准确、污染轻、样本不被降解等;DOP-PCR微量扩增条件适于普通小麦和中间燕麦草微量染色体的高效扩增,通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳可以快速、准确地分析判断微扩增产物的来源。

一种改进的染色体显微切割方法

本文介绍了利用普通光学显微镜进行染色体显微切割的方法．先使显微镜物镜焦点平面升高约7mm，将制在盖玻片上的染色体标本反扣在自制的玻璃台架上，从物镜下方进行染色体切割，这样就解决了在100×油浸物镜下不能切割染色体的困难，实现了在高放大倍数（放大率1000～1500×）条件下进行染色体显微切割的问题，大大提高了显微切割的精度和准确度．

黑麦B染色体显微切割和微克隆

显微分离出两条黑麦Ｂ染色体，经蛋白酶Ｋ处理，Ｓａｕ３ＡＩ酶切后，用ＬＡ－ＰＣＲ（ＬｉｎｋｅｒＡｄａｐｔｅｒＰＣＲ）方法进行扩增，得到０．２～２ｋｂ的ＤＮＡ片段．Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析结果表明，此扩增产物来源于黑麦Ｂ染色体．将部分ＰＣＲ产物克隆到ｐＵＣ１９载体中，获得了５０００个克隆．

激光显微切割技术切割棉花单条染色体的研究

为使冷激光显微切割技术在植物染色体遗传分析中广泛应用，本研究利用SLuCUT全自动激光显微切割系统对亚洲棉单条染色体进行了微切割、微收集和微克隆研究。结果表明，SLuCUT全自动激光显微切割系统切割植物单条染色体具有操作简单、快速准确、污染轻等优点。SLuCUT全自动激光显微切割系统是目前最先进、最高效的染色体微切割、微分离和微收集系统。

染色体显微切割技术及其在植物中的应用研究进展

染色体微切割与微克隆技术首先在动物和人类上得到应用,随着PCR技术的发展,该技术在植物遗传与进化研究等方面也得到了较为广泛应用。本文就植物染色体显微切割和微克隆技术的原理、主要操作规程以及在植物中应用的研究现状、存在问题进行了综述。

染色体微切割、微克隆技术及其研究进展

本文综述了染色体显微切割与微克隆技术的原理、方法、应用及研究进展，尤其对几种染色体显微切割的方法、染色体的体外扩增技术ＤＯＰ－ＰＣＲ、ＬＡ－ＰＣＲ等进行了比较分析。对染色体微切割、微克隆技术研究中存在的问题和应用前景进行了初步探讨。

植物染色体微分离微克隆技术研究进展与展望

染色体微分离与微克隆技术是细胞遗传学与分子遗传学相结合的一项桥梁技术 ,近年来在植物中的应用日渐活跃 .本文综述了该技术在植物中的研究进展 。

染色体微切割、微克隆技术及其应用

介绍了染色体微切割、微克隆技术的原理及主要方法 。

山羊单条染色体激光显微切割的研究

激光显微切割技术已经成为一种能够快速稳定地从复杂组织获取均一样本的工具,该技术已经有了较为广泛的应用,并随着研究的不段深入,成为单细胞的分离和表达研究必不可少的应用工具。目前,使用激光显微切割分离细胞等研究已非常广泛,但在单条染色体分离的研究上,报道甚少,尤其在山羊上还没有激光显微切割的相关报道。因此,针对山羊单条染色体的分离进行细胞培养、膜玻片核型制备和激光显微切割等条件摸索,确定在ConA刺激剂作用下,培养48h后加入秋水仙素作用淋巴细胞5h,细胞生长良好,可以分离和获得较为理想的单条染色体。为大型哺乳动物的单条染色体分离研究提供借鉴。

人类高分辨染色体显微切割、PCR、微克隆、探针池技术及其应用

人类高分辨染色体显微切割、ＰＣＲ、微克隆、探针池技术及其应用徐磊，夏家辉（湖南医科大学医学遗传国家重点实验室，长沙４１００７８）医学本身的发展，使临床病种的构成发生了质的改变，随着传染病的控制，遗传病以及遗传与环境共同作用所致的恶性肿瘤已成为临床常见...

人类染色体显微切割、微克隆与染色体区带特异性绘画技术

本文运用染色体显微切割与微克隆的方法,切割了X染色体、Y染色体、2q33→qter和8q24.1区带,用人工合成的寡核苷酸为引物,进行DNA体外扩增、基因克隆.同时,以次级PCR产物为探针池,建立了染色体特异性以及染色体区带特异性绘画技术.运用染色体显微切割、微克隆生产的探针池的特异性,不仅通过染色体区带特异性绘画技术得到了验证,而且,

染色体微切割、微分离、微克隆技术在植物育种上的应用与展望

染色体微切割、微分离与微克隆研究是在近二十多年发展起来的一门新兴的染色体研究领域,是细胞遗传学通往分子遗传学研究的直接桥梁,在植物育种领域已被广泛加以利用,用以构建染色体特异的或染色体区带特异的探针池probe或构建染色体或染色体区带特异的DNA文库等方面。文中就该项技术的概念、方法、在植物育种研究领域的应用及其前景,以及未来的研究方向等进行了论述。