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以小麦根尖分生组织细胞核及染色体制备高分子量DNA
被引量:
3
1
作者
郭东伟
佘茂云
+4 位作者
李连城
陈耀峰
陈明
徐兆师
马有志
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第12期1920-1923,共4页
为了克服以叶片为材提取HMW DNA的局限性,优化了一套简便、实用的提取方法。该法以细胞周期同步化处理的根尖分生组织为材料,利用机械匀浆释放细胞核或中期染色体制备悬浮液,再以蔗糖密度梯度离心和流式分选技术分别分离细胞核和染色体...
为了克服以叶片为材提取HMW DNA的局限性,优化了一套简便、实用的提取方法。该法以细胞周期同步化处理的根尖分生组织为材料,利用机械匀浆释放细胞核或中期染色体制备悬浮液,再以蔗糖密度梯度离心和流式分选技术分别分离细胞核和染色体,经去蛋白、酶切、透析,获得HMW DNA。经检测,来自200条根尖(10个胶块)的HMW DNA的浓度约为4~20ng/μL,而连接、转化后的BAC克隆平均插入片段超过100kb。证明该法适用于提取HMW DNA以构建BAC文库。
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关键词
高分子量DNA
蔗糖密度梯度离心
细胞周期同步化
染色体流式分选
BAC
下载PDF
职称材料
题名
以小麦根尖分生组织细胞核及染色体制备高分子量DNA
被引量:
3
1
作者
郭东伟
佘茂云
李连城
陈耀峰
陈明
徐兆师
马有志
机构
西北农林科技大学农学院
中国农业科学院作物科学研究所/农业部遗传育种重点开放实验室
出处
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第12期1920-1923,共4页
基金
西北农林科技大学青年教师基金
文摘
为了克服以叶片为材提取HMW DNA的局限性,优化了一套简便、实用的提取方法。该法以细胞周期同步化处理的根尖分生组织为材料,利用机械匀浆释放细胞核或中期染色体制备悬浮液,再以蔗糖密度梯度离心和流式分选技术分别分离细胞核和染色体,经去蛋白、酶切、透析,获得HMW DNA。经检测,来自200条根尖(10个胶块)的HMW DNA的浓度约为4~20ng/μL,而连接、转化后的BAC克隆平均插入片段超过100kb。证明该法适用于提取HMW DNA以构建BAC文库。
关键词
高分子量DNA
蔗糖密度梯度离心
细胞周期同步化
染色体流式分选
BAC
Keywords
High molecular weight DNA
Sucrose gradient centrifugation
Synchronization of cell cycle
Chromosome flow sorting
BAC
分类号
S512.1 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
以小麦根尖分生组织细胞核及染色体制备高分子量DNA
郭东伟
佘茂云
李连城
陈耀峰
陈明
徐兆师
马有志
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
3
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